痛风舒缓胶囊急性毒性实验研究

杨丹莉，王莘宇，杨竞，夏文，龚其海，吴芹，金凤，聂晶，王井洪

（遵义医学院药理教研室暨贵州省基础药理重点实验室,贵州遵义563000）

痛风是危害人类健康的一种严重的代谢性疾病[1]。我国传统中医验方治疗痛风具有独特的优势，可以进行全身调节，防治并举，且临床报道有较好的疗效，不易复发，无明显不良反应。痛风舒缓胶囊（TFSHC）是根据传统验方，加以改进拟申报的六类中药新药。本实验拟观察TFSHC对小鼠有无急性毒性反应，确定TFSHC的安全范围。

急性毒性是指动物一次或24h内多次接受一定剂量的受试物，在一定时间内出现的毒性反应[2]。本实验通过一次性给予小鼠最大容量、最大浓度的TFSHC，观察该药对小鼠有无急性毒性，并计算小鼠的最大耐受倍数，为该药的新药的研发提供部分临床前研究的安全性评价的资料[3]。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1动物 昆明种小鼠，雌雄各半，体重20±4g，由重庆第三军医大学提供，许可证号为 SCXK(渝)2007-001。

1.1.2 药物 痛风舒缓胶囊（已申请专利），批号：20090920。

1.1.3 仪器电子分析天平，北京赛多利斯天平有限公司，型号：BS 110S。

1.2 方法 昆明种小鼠40只，体重20±4g，随机分为TFSHC组和生理盐水对照组（20只/组，雌雄各半）。禁食不禁水12h，分别单次给予最大容积(0.4 mL/10g)的TFSHC液54g/kg和等体积生理盐水灌胃。观察小鼠的一般情况（体重、摄食、皮毛、行为、分泌物、排泄物等）及中毒、死亡情况。记录在给药前和给药后第2、4、6、8、10、12、14天称量小鼠的体重和摄食量。第14天处死动物，观察器官变化情况并行组织病理学检查。计算给药后小鼠体重增长百分比，体重增长百分率 =（给药后体重 -给药前体重）/给药前体重 ×100%和小鼠TFSHC的最大耐受量倍数,小鼠的最大耐受量倍数＝每只小鼠的耐受药量/小鼠的平均体重（20g）×成人的平均体重（50000g）/成人每日用量(倍)[4]。

2 数据统计处理

3 结果

3.1 给TFSHC后小鼠体重变化 分别在给药前和给药后第 2、4、6、8、10、12、14天称量每只小鼠体重，并计算小鼠体重变化，见图1。

图1 TFSHC对小鼠体重的影响（g ，n=10）

3.2 给TFSHC后小鼠体重增长百分比变化 分别在给药前和给药后第2、4、6、8、10、12、14天称量每只小鼠体重，并计算小鼠体重增长的百分比变化，体重增长百分率 =（给药后体重—给药前体重）/给药前体重×100%，见图2。± ，n=10）

图2 TFSHC对雄性小鼠体重百分比增长的变化（﹪，

3.3 给TFSHC后小鼠不同时间进食量变化 分 别在给药前和给药后第2、4、6、8、10、12、14天称量小鼠进食量，并计算每只小鼠每天进食量，见图3。

图3 TFSHC对小鼠进食量的变化情况（g，± ，n=10）

3.4 小鼠死亡情况 无1例小鼠死亡。

3.5 一般情况 TFSHC组的小鼠外观，行为活动均无异常，动物未见活动减少、蜷缩、松毛等现象，鼻、眼、口腔未见分泌物。

3.6 小鼠组织器官大体解剖的情况TFSHC组的心、肝、脾、肺、肾等组织的颜色正常，组织器官及腹腔均未见异常和肿物。

3.7 小鼠的最大耐受量倍数计算[4]小鼠的最大耐受量倍数＝1.08/20×50000/3.6＝ 750(倍)

4 讨论

痛风是一种难治愈、易复发的代谢性风湿病，特征为反复发作的急性关节炎、痛风石慢性关节炎以及关节畸形，与嘌呤代谢异常关系密切[1，5]。目前，痛风的西药治疗都是对症处理，不利于整体治疗，且有诸多毒副作用和不良反应。而中医药治疗痛风可以进行全身调节，标本兼治，防治并举，临床和实验研究均显示有较好的疗效，且无明显毒副反应[6]。因此，研究防治痛风的中药制剂意义重大。现代药理研究已证实白芍具有镇痛作用，可扩张血管，降低血压；威灵仙具有抗利尿作用及降血糖作用；金钱草具有利尿通淋，清热解毒，抗炎作用；泽泻具有降血脂及利尿作用。TFSHC由白芍、威灵仙、牛寄奴、金钱草、泽泻等组成，有清热散结，化瘀止痛的功效，其药效已在前期试验中得到证实。

TFSHC属于未在国内上市销售的由中药、天然药物组成的非注射给药的复方制剂，符合中医药理论，有一定的临床应用经验，参照《中华人民共和国药品管理法》、《中药、天然药物急性毒性研究技术指导原则》，故采用一种动物，按拟临床给药途径进行急性毒性反应的观察。本实验通过灌胃给药观察TFSHC对小鼠的急性毒性，了解受试物单次给药后动物所产生的毒性反应及其严重程度，为临床安全用药提供一定的参考，为药效学试验、长期毒性和特殊毒性试验选择剂量提供依据。经前期预实验发现，TFSHC测不出致死量，故本实验只能测定最大给药量。通过本实验可以看出给TFSHC组无1例小鼠死亡、行为活动和外观正常，动物未见活动减少、蜷缩、松毛等现象，鼻、眼、口腔未见分泌物；心、肝、脾、肺、肾等脏器的外观及切面颜色、大小、质地均未见异常；胸腹腔均未见异常渗出和肿物。与生理盐水对照组比较，TFSHC组的体重变化和进食量无显著差异。说明在此最大给药剂量下（54g/kg）TFSHC对小鼠无急性毒性反应，其耐受人用量的750倍，较为安全，TFSHC值得进一步做其临床前长期毒性试验的研究。

[1] 陈光亮,徐淑云.高尿酸血症研究进展[J].中国药理学通报,2003,19（10）:1088-1092

[2] 中药、天然药物急性毒性研究技术指导原则[S].2005年.

[3] 袁伯俊，王治乔.新药临床前安全性评价与实践[M].北京:军事医学科学出版社，1997.22-42.

[4] 陈奇.中药药理研究方法学[M]．北京:人民卫生出版社,1993.112-119.

[5] 王永峰,刘新生.中医药治疗痛风的研究思路与方法[J].国医论坛,2000,15（6）:20-21.

[6] 吴花,耿宝琴.痛风的药物防治[J].国外医药-合成药-生化药制剂分册,1998,19（3）:156.