UF-1000i尿沉渣分析仪和尿干化学分析仪与显微镜检查在尿路感染中应用评价

张广波，周丽杰，曹 笠※

(1.大连市第三人民医院检验科，辽宁大连 116022;2.辽河油田第二职工医院检验科，辽宁盘锦 124010)

迄今，尿细菌培养仍然是确诊尿路感染的金标准，但是从患者留取尿液标本到获取检验报告需3～5 d的时间，将会延缓对尿路感染的诊断和治疗［1］。UF-1000i型全自动尿沉渣分析仪(简称UF-1000i)，尿化学分析仪测定亚硝酸盐、白细胞酯酶和尿沉渣镜检诊断也是检测尿路感染的有意义的指标。UF-1000i型全自动尿沉渣分析仪采用了流式细胞技术和荧光染色的方法对尿液中的有形成分进行定量分析，较镜检法敏感。干化学干扰因素较多影响结果的可靠性。显微镜检查作为传统方法既费时又难以标准化，人为影响因素多。为了探讨联合应用UF-1000i、干化学法、显微镜镜检在诊断尿路感染上的临床应用价值，本研究对220份洁净中段尿标本分别进行UF-1000i和尿干化学分析仪及显微镜检测，将结果与定量尿细菌培养结果作了比较。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 标本来源 随机抽取2010年本院门诊及住院患者中疑似尿路感染的患者尿液标本220份，患者年龄患者年龄18～70岁，男性标本102份，女性标本118份。

1.1.2 采集方法 用洁净一次性尿杯留取中段尿，分装3个试管，每管10 mL。前两管按仪器操作规程在UF-1000i和尿化学分析仪进行分析测定，另一管离心后进行尿沉渣显微镜检查及细菌培养。

1.1.3 仪器和试剂 UF-1000i(日本 Sysmex公司产品);尿十项干化学分析仪(德国宝灵曼公司生产的Miditron JuniorlI型，试条为Combur10 TestM试带条);血平板购于上海伊华医学科技有限公司;OLYUSCMPX-31显微镜。

1.1.4 质控 质控品为厂家提供的原装配套产品。

1.2 方法

1.2.1 UF-1000i检测标本 UF-1000i进行每日质控，数据正常时开始检测，按仪器说明严格正规操作，分装后的第一管尿液标本在UF-1000i检测系统进行检测。将进样针插入含充分混匀样品的试管，按进样开关，仪器自动吸取800 μL样品，分析各种参数，打印分析数据。记录细菌(≥2750/μL为阳性检出)和白细胞(≥20/μL为阳性检出)。

1.2.2 尿干化学分析仪检测标本 第二管尿液标本在尿化学分析仪检测系统进行检测，整个过程在2 h内完成，并按照仪器的操作规程要求进行操作。亚硝酸盐阳性(f+1)或白细胞酯酶阳性(≥1+)作为尿路感染的阳性标准。

1.2.3 显微镜检测 取另一管尿液标本，以相对离心力400×g离心5 min，然后手持离心管45°～90°吸弃上清液，保留0.2 mL沉渣量，轻轻摇匀，用一次性滴管取1滴(20 μL)置于清洁载玻片上，加盖玻片，于高倍镜下连续计数至少10个视野中白细胞数，分别取其平均值，所有操作在2 h内完成。

1.2.4 定量尿细菌培养 用5 μL定量接种环取充分混匀的尿液分别接种血平板和沙氏培养基，放37℃温箱内孵育18～24 h，取出作菌落计数，凡革兰阴性菌≥105cfu/mL，革兰阳性菌≥104cfu/mL为定量尿细菌培养结果阳性，若有2种以上杂菌生长则被视为污染，重新送检。

1.3 统计学方法 统计评价联合应用UF-1000i型全自动尿沉渣分析仪和尿干化学分析、显微镜镜检和尿细菌培养结果，将所得资料进行统计学处理，组间比较用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三种方法的检测结果 220例尿液标本中，尿沉渣细菌培养阳性92例，阳性率42%，阴性128例，阴性率58%;UF-1000i阳性114例，阳性率52%，阴性106例，阴性率48%;干化学检测阳性76例，阳性率35%，阴性144例，阴性率65%。

2.2 UF-1000i与定量尿细菌培养结果的比较UF-1000i检测白细胞、细菌与定量尿细菌培养的结果两者之间的差异有统计学意义(χ2=2.21，P＜0.05)(表1)。UF-1000i有较高的灵敏度(82.6%)，但是，假阳性率非常高(29.7%)。

表1 UF-1000i与定量尿培养结果的比较

2.3 干化学检测与定量尿细菌培养结果的比较干化学检测在诊断尿路感染中(与定量尿细菌培养的结果比较)有较高的假阴性率(28.2%)，但有较高的特异度(92.2%)。两者之间的差异无统计学意义(χ2=1.23，P ＞0.05)(表2)。

表2 干化学检测与定量尿培养结果的比较

2.4 镜检与定量尿细菌培养结果的比较 镜检灵敏度较低(56.5%)，两者之间的差异无统计学意义(χ2=0.69，P ＞0.05)(表3)。

表3 镜检与定量尿培养结果的比较

3 讨论

目前应用于临床尿液分析的方式主要有全自动尿沉渣分析仪法、干化学法及尿显微镜镜检法，由于各实验室之间的差异，尿液分析模式多种多样。为此，不合理的分析模式影响了尿液分析的质量，这样将影响临床医师对尿液检测报告的分析和判断。事实上，目前所采用的三种检测方法各有优缺点。UF-1000i型全自动尿沉渣分析仪将尿液标本进行稀释和染色后，运用流式细胞计数和电阻抗技术，获得尿有形成分的前向散射光信号和前向荧光信号，前向散射光信号反映细胞体积大小，前向荧光信号反映细胞染色质的大小，从而得到尿有形成分的大小、横断面、染色成分、染色部分的长度和体积的信息，分类尿有形成分。细菌由于体积小并含有DNA和RNA，所以前向散射光强度要比红、白细胞弱，但荧光强度要比红细胞强，又比白细胞弱，因此可以从红细胞、白细胞、上皮细胞、管型等尿有形成分中将细菌区分开来，并且可定量显示。但其结果受到细菌种类、菌体大小、标本放置时间等因素的影响。尿液中的淋巴细胞、单核细胞、小圆上皮细胞、个体较大的精子等情况的出现都会影响UF-1000i白细胞计数检测的准确性。这导致UF-1000i检测白细胞和细菌是高敏感性和低特异性的。

本实验中干化学法检测的灵敏度仅为28.3%，假阴性率高达71.7%，特异度为92.2%，提示尿干化学分析仪对亚硝酸盐的测定是特异的，但是如果饮食中缺乏亚硝酸盐，或者有些细菌不含能引起硝酸盐还原为亚硝酸盐的还原酶［2］，或者尿液没有在膀胱中存留足够长时间(4 h以上)以完成硝酸盐向亚硝酸盐的转变等，都会引起假阴性。干化学法亚硝酸盐试验灵敏度约为0.05 g/L［3］，其灵敏度较低，以致假阴性较高。

本研究把UF-1000i和干化学法均阳性的标本，经尿培养全都发现有细菌。证明UF-1000i和干化学法都阳性的标本涂片染色镜检敏感性低的原因可能是由于标本混匀不充分，涂片量不足或染色过程中没有充分固定而导致细菌丢失，也可能由于沉渣中有大量杂物掩蔽难以辨认细菌而造成。

从本实验可见，多数标本UF-1000i和干化学法、镜检3种方法检测结果较一致，在不相符的标本中，UF-1000i阳性率较高，UF-1000i易将小圆上皮细胞、滴虫等误认为白细胞。而干化学法不能检出淋巴细胞，且干扰因素多，某些临床用药可引起干化学法假阴性，而污染甲醛和高浓度胆红素等可以引起干化学法假阳性［4］，差异较大，不能反映治疗前后细菌的改变，因而在诊断尿路感染及治疗效果时，UF-1000i更灵敏、有效。

UF-1000i法、干化学法两法结合更适合于健康普查筛选。中华医学会经过研究初步筛选标准［5］，即在干化学试纸质量合格，尿液分析仪运转正常的情况下，测定结果中的红细胞、白细胞、蛋白质及亚硝酸盐全部为阴性时可免去显微镜检查，但在肾脏疾病，不论干化学结果如何都应作沉渣镜检。而尿沉渣检查对各种疾病(如肾脏、泌尿系统疾病等)有重要临床意义，而如每个尿标本都镜检又极大地浪费了实验时间，降低实验室工作效率，所以对那些干化学法、UF-1000i法都正常的尿液标本，可采用抽样镜检或其他方法来检查。如此通过干化学法、UF-1000i法、镜检法建立阳性标本报警系统，检验人员可多化时间在阳性标本上。

［1］ 娄峥，胡晓波，蒋燕群，等.UF-100尿液分析仪筛查尿路感染临床意义的探讨［J］.检验医学，2004，19(1):54.

［2］ 王春燕，张森发.sysmexVF100尿沉渣分析仪对尿路感染疗效的监测［J］.上海医学检验杂志，2000，15(2):80.

［3］ 叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程［M］.3版.南京:东南大学出版社，2006:290.

［4］ 丛玉隆，马俊龙.尿液干化学分析与显微镜检查［J］.中华医学检验杂志，1997，20(3):135-137.

［5］ 冠丽筠，陈宏础.临床基础检验学［M］.北京:人民卫生出版社，1989:136.