当归中的一个新苯酞类化合物

陈鸳谊，李行诺，张翠萍，葛志伟，颜继忠

（1.浙江工业大学 药学院，浙江 杭州 310032；2.浙江大学 药学院，浙江 杭州 310058）

当归中的一个新苯酞类化合物

陈鸳谊1，李行诺1，张翠萍1，葛志伟2，颜继忠1

（1.浙江工业大学 药学院，浙江 杭州 310032；2.浙江大学 药学院，浙江 杭州 310058）

为研究当归根茎中的有效化学成分，采用D101大孔吸附树脂、硅胶柱色谱和反相高效制备液相色谱等方法从当归乙醇提取物中分离纯化得到7个化合物，通过化合物的理化性质和波谱数据鉴定为senkyunolide H（Ⅰ），senkyunolide I（Ⅱ），Z-6-羟基-7-甲氧基－藁本内酯（Ⅲ），Z-藁本内酯（Ⅳ），E-6，7-反式－二羟基藁本内酯（Ⅴ），阿魏酸（Ⅵ），falcarindiol（Ⅶ），其中化合物Ⅲ为一新的苯酞类化合物.

当归；Z-6-羟基-7-甲氧基－藁本内酯；苯酞类化合物

当归为伞形科植物Angelicasinensis的干燥根［1］，药用历史悠久，素有“十方九归”之说，具有补血活血、润肠、调经之功效.现代药理研究发现，其对心血管系统疾病和肿瘤疾病亦有较好的疗效［2］.当归成分非常复杂，主要含有苯酞类、香豆素类、黄酮类以及有机酸类化合物［3］.为进一步研究当归的药效物质基础和建立当归快速提取分离的工艺流程，对当归的化学成分进行了比较系统的研究，为建立当归工业化生产的质量控制标准奠定实验基础.对当归中主要挥发性成分进行了分离和鉴定.在HPLC的指导下，采用大孔吸附树脂、硅胶柱色谱和制备型高效液相色谱等方法从当归90%乙醇提取物中分离得到了7个化合物.

1 仪器与试剂

美国Agilent 1100制备型高效液相色谱仪，HP chemstations处理软件（安捷伦科技有限公司，美国）；分析型高效液相色谱（Knauer，杭州绿绵安特分析系统装备有限公司），进样器 Auto sampter 3800，四元梯度泵、在线脱气机、多波长紫外检测器；BRUKER AC-80型磁共振光谱仪（TMS为内标）测定.Mill-Q超纯水器（Mllipore公司）；柱色谱硅胶（100～200目）和薄层色谱硅胶均为青岛海洋化工厂产品.甲醇为色谱纯，购自美国Merck公司，其他溶剂均为分析纯.当归（Angelicasinensis）药材购于杭州胡庆余堂，样品保存于浙江工业大学药学院.

2 提取与分离

当归干燥根3.0 kg，用90%乙醇回流提取2次，每次1.5 h，提取液用纱布滤去固体颗粒，减压浓缩得浸膏1 504 g.浸膏用去离子水溶解，过滤，使用D101大孔吸附树脂进行层析分离，分别用水、20%乙醇、60%乙醇和90%乙醇洗脱，收集60%和90%乙醇洗脱部分，减压浓缩.60%乙醇洗脱组分经硅胶柱色谱分离得到6个流分（Fr.1—6），90%乙醇洗脱组分经硅胶柱色谱分离得到7个流分（Fr.7—14）.各流分经高效制备液相色谱纯化，色谱柱为ZORBAX SB-C18（21.2×250 mm，7μm），流 速8 mL／min，甲醇－水梯度洗脱.Fr.3得到化合物Ⅵ（37 mg），Ⅴ（54 mg），Ⅱ（333 mg），Ⅰ（68 mg）；Fr.8得到化合物Ⅲ（22 mg），Ⅳ（56 mg）；Fr.12得到化合物Ⅶ（45 mg）.化合物Ⅰ－Ⅶ的化学结构分别为

3 结构鉴定

化合物Ⅰ 棕黄色油状物.EI-MS（m／z）：224［M］＋；1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.94（3H，t，J＝7.4 Hz，H-11），1.49（2 H，sext，H-10），1.85（1 H，m，H-5a），2.04（1 H，m，H-5b），2.33（2 H，q，H-9），2.40（1 H，m，H-4a），2.64（1 H，m，H-4b），3.94（1H，dt，J＝3.2，9.6 Hz，H-6），4.57（1H，d，J＝3.5 Hz，H-7），5.30（1H，t，J＝7.9 Hz，H-8）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：169.4（C-1），153.2（C-3），148.2（C-3a），125.4（C-7a），114.4（C-8），67.3（C-6），63.5（C-7），28.1（C-9），25.7（C-5），22.3（C-10），18.4（C-4），13.8（C-11）.以上数据与文献［4］报道基本一致，鉴定化合物为senkyunolide H.

化合物Ⅱ 棕黄色油状物.EI-MS（m／z）：224［M］＋；1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.95（3H，t，J＝7.4 Hz，H-11），1.49（2 H，sext，H-10），1.89（1H，m，H-5a），2.10（1 H，m，H-5b），2.35（2 H，q，H-9），2.49（1H，m，H-4a），2.56（1H，m，H-4b），3.94（1 H，ddd，J＝9.6，6.4，3.2 Hz，H-6），4.49（1H，d，J＝5.3 Hz，H-7），5.28（1H，t，J＝7.9 Hz，H-8）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：169.2（C-1），153.1（C-3），148.0（C-3a），125.8（C-7a），114.3（C-8），71.6（C-6），67.5（C-7），28.1（C-9），26.5（C-5），22.3（C-10），19.0（C-4），13.8（C-11）.以上数据与文献［5］报道基本一致，鉴定化合物为senkyunolide I.

化合物Ⅲ 棕黄色油状物.［α］2D0＝－1.50（c＝0.28，CHCl3），通 过 HR-EI-MS 可 知 分 子 式 为C13H18O4（m／z238.1216，Cal.238.1205），IR（KBr，cm－1）3 450，2 960，1 760，1 677，1 637，1 466.1HNMR（CDCl3，500 MHz）谱中，高场区给出一个甲基质子信号δ：0.95（3H，t，J＝7.4 Hz，H-11）；四个亚甲基质子信号δ：1.50（2 H，sext，H-10），1.99（2H，m，H-5），2.36（2 H，q，H-9），2.45，2.55（2 H，m，H-4）；两个连有氧原子的次甲基质子信号δ：3.98（1H，J＝3.6 Hz，H-7），4.17（1H，m，H-6）；一个烯氢质子信号δ：5.29（1H，t，J＝7.5 Hz，H-8）.13C-NMR（CDCl3，125 MHz）给出了13个碳信号，包括一个酯羰基碳信号δ：169.4（C-1）；四个烯碳信号δ：154.1（C-3），148.5（C-3a），124.2（C-7a），113.6（C-8）；两个连有氧原子的次甲基碳信号δ：73.8（C-7），67.8（C-6）；一 个 甲 氧 基 碳 信 号 δ：58.7（－OCH3）；四个亚甲基碳信号δ：28.0（C-9），24.4（C-5），22.3（C-10），17.2（C-4）；一个甲基碳信号：δ：13.8（C-11）.通过 HSQC谱对该化合物的碳氢数据进行了准确的归属（表1）.发现除多出一个甲氧基信号，以及6位和7位的碳氢信号出现差异外，该化合物的NMR数据与senkyunolide I（2）的数据十分相近.通过HMBC谱，最终确定甲氧基位于C－7位，并且通过NOESY谱确定C-6位羟基与C-7位甲氧基处于反式（见图1）.经查阅文献，该化合物为一个新的苯酞类化合物，命名为Z-6-羟基-7-甲氧基－藁本内酯.

表1 化合物Ⅲ 的1 H NMR和13 C NMR数据Table 1 1 H NMR and 13 C NMR data of compoundⅢ（CDCl3，J in Hz）

图1 化合物Ⅲ的HMBC和NOESY相关Fig.1 The Key correlations in HMBC and NOESY spectra of compoundⅢ

化合物Ⅳ 浅黄色油状物.EI-MS（m／z）：190［M］＋；1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.96（3H，t，J＝7.4 Hz，H-11），1.50（2 H，sext，H-10），2.38（2H，q，H-9），2.47（2 H，m，H-5），2.61（2H，m，H-4），5.24（1H，t，J＝8.0 Hz，H-8），6.01（1H，m，H-6），6.28（1H，dt，J＝2.0，9.7 Hz，H-7）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：167.6（C-1），148.5（C-3a），147.1（C-3），129.9（C-6），123.9（C-7a），117.0（C-7），112.9（C-8），28.1（C-9），22.4（C-10），18.5（C-4），13.7（C-11）.以上数据与文献［6］报道基本一致，鉴定化合物为Z-藁本内酯.

化合物Ⅴ 浅黄色油状物.EI-MS（m／z）：224［M］＋；1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.96（3H，t，J＝7.4 Hz，H-11），1.51（2H，sext，H-10），1.91，2.10（2H，m，H-5），2.32（2 H，q，H-9），2.73（2H，m，H-4），3.97（1H，m，H-6），4.48（1H，J＝5.3Hz，H-7），5.77（1 H，t，J＝8.6 Hz，H-8）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：169.0（C-1），151.5（C-3），147.6（C-3a），128.2（C-7a），118.2（C-8），71.0（C-6），67.6（C-7），27.9（C-9），26.7（C-5），23.0 （C-10），22.5（C-4），13.6（C-11）.以上数据与文献［7］报道基本一致，鉴定化合物为E-6，7-反式－二羟基藁本内酯.

化合物Ⅵ 灰白色粉末.EI-MS（m／z）：194［M］＋；1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ：3.82（3 H，s，－OCH3），6.38（1 H，d，J＝15.9 Hz，H-8），6.80（1H，d，J＝8 Hz，H-6），7.08（1H，dd，J＝8.5 Hz，H-5），7.28（1H，d，J＝1.5 Hz，H-2），7.49（1H，d，J＝16 Hz，H-7），10.35（1H，brs，Ar-OH）；13CNMR（DMSO-d6，125 MHz）δ：168.2（C-9），149.1（C-4），148.0（C-3），144.4（C-7），125.9（C-1），122.8（C-6），115.9（C-8），115.6（C-5），111.2（C-2），55.7（OCH3）.以上数据与文献［4］报道基本一致，鉴定化合物为阿魏酸.

化合物Ⅶ 棕黄色油状物.EI-MS（m／z）：260［M］＋；1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.90（3H，t，J＝7.0 Hz，H-17），1.29（8 H，m，H-13～H-16），1.38（2H，m，H-12），2.10（2H，m，H-11），4.94（1H，brd，J＝5.3 Hz，H-3），5.20（1 H，d，J＝8.3 Hz，H-8），5.25（1H，m，H-1a），5.49（1H，m，H-1b），5.52（1 H，m，H-10），5.60（1H，m，H-9），5.94（1H，d，J＝1.6 Hz，H-2）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：135.8（C-2），134.4（C-10），127.6（C-9），117.2（C-1），79.8（C-4），78.3（C-7），70.1（C-5），68.6（C-6），63.3（C-3），58.4（C-8），31.7（C-11），29.2（C-12），29.1（C-13），29.0（C-14），27.6（C-15），22.6（C-16），14.0（C-17）.以上数据与文献［8］报道基本一致，鉴定化合物为falcarindiol.

4 结 论

以当归为研究对象，采用加热回流、溶剂萃取法得到90%乙醇提取物.提取液经D101大孔吸附树脂、硅胶柱层析粗分，将得到的各部分进行高效制备液相色谱纯化，得到化合物单体.共分离得到7个化合物单体，通过理化性质和波谱数据鉴定了其结构，其中Z-6-羟基-7-甲氧基－藁本内酯（Ⅲ）为一新的苯酞类化合物.

［1］LIN Long-ze，HE Xian-guo，LIAN Li-zhi，et al.Liquid chromatographic-electrospray mass spectrometric study of the phthalides ofAngelicasinensisand chemical changes of Z-ligustilide［J］.J Chromatogr A，1998，810：71-79.

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A new phthalide derivatives from Angelica sinensis

CHEN Yuan-yi1，LI Xing-nuo1，ZHANG Cui-ping1，GE Zhi-wei2，YAN Ji-zhong1
（College of Pharmaceutical Science，Zhejiang University of Technology，Hangzhou 310032，China；2.College of Pharmaceutical Science，Zhejiang University，Hangzhou 310058，China）

Chemical constituents from the roots and stem ofAngelicasinensiswere isolated and purified with D101 macroporous resin，column chromatography on silica gel and preparative HPLC.Seven compounds were identified as senkyunolide H （Ⅰ），senkyunolide I（Ⅱ），Z-6-hydroxyl-7-methoxyligustilide（Ⅲ），Z-ligustilide（Ⅳ），E-6，7-trans-dihydroxyligustilide（Ⅴ），ferulic acid（Ⅵ），Falcarindiol（Ⅶ）by physical and chemical properties and spectroscopic analysis spectra.Among them，compoundⅢ was a new phthalide derivative.

Angelicasinensis；Z-6-hydroxyl-7-methoxyligustilide；phthalides

R284.1

A

1006-4303（2011）05-0524-04

2010-04-08

国家重大科技专项基金资助项目（2009ZX09313-036）

陈鸳谊（1985—），女，浙江台州人，硕士研究生，研究方向为中药提取与分离，E-mail：chenyuanyi1985＠126.com.通信作者：颜继忠教授，E-mail：yjz＠zjut.edu.cn.

（

刘 岩）