牙周基础治疗对重度侵袭性牙周炎患者血清及龈沟液中TNF-α、IL-4 水平的影响

鞠 铎 姚 华 (浙江大学医学院附属第一医院口腔中心,浙江 杭州 310003)

牙周炎是侵犯牙龈以及牙周组织的慢性炎症,其主要病理特征为牙周袋的形成、袋壁炎症、牙槽骨吸收以及牙齿逐渐松动等,是导致成人牙齿缺失的主要原因之一〔1,2〕。牙周炎分为慢性牙周炎、侵袭性牙周炎等类型,侵袭性牙周炎的临床表现以及实验室检查等方面均有别于慢性牙周炎〔3〕。侵袭性牙周炎多伴随有咀嚼功能障碍,主要由放线杆菌感染引起,该细菌在侵袭性牙周炎患者牙龈下菌斑中的分离培养阳性率高达90%～100%〔4〕。牙周基础治疗是目前治疗牙周炎的主要手段之一,如今已在临床上推广应用〔5〕。据报道,牙周基础治疗可导致侵袭性牙周炎患者血清及龈沟液中多种细胞因子的浓度发生变化〔6〕。本研究旨在探讨牙周基础治疗对重度侵袭性牙周炎患者血清及龈沟液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)水平的影响。

1 资料与方法

1.1 研究对象 2009年1月至2011年4月,我科共收治重度侵袭性牙周炎患者53例,其中男性37例,女性16例;年龄22～35〔平均(26.3±1.4)〕岁。所有患者均无严重的慢性系统性疾病;近期未服用过任何抗生素;就诊前6个月内未接受过牙周治疗;女性患者未怀孕。

1.2 牙周基础治疗方法 牙周基础治疗包括如下内容:①菌斑控制:应使菌斑牙面数控制在20%以下;②龈上洁治术:使用洁治器械去除龈上牙石、色渍、菌斑,并磨光牙面,以延迟菌斑和牙石的沉积。③龈下刮治术(根面平整术):使用比较精细的龈下刮治器刮除位于牙周袋内根面上的牙石、菌斑。④咬合调整法(选磨法):通过磨改牙齿外形消除创伤性咬合和食物嵌塞。⑤松牙固定术。

1.3 TNF-α、IL-4测定方法 TNF-α测定采用BioELISA技术:①取出试剂盒,恢复至室温。②将待测血清、不同浓度的TNF-α标准品分别加至相应微孔中,每孔100 μ l,箔纸封板,37℃孵育1 h。③甩尽微孔中的液体,每孔注入事先配好的洗液至少300 μ l,洗孔,重复此步骤4次,甩尽孔内液体后在吸水纸上拍干。④每孔加入工作浓度的生物素化抗TNF-α单克隆抗体100 μ l,37℃孵育1 h;洗板,方法同上。⑤每孔加入工作浓度的辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲合素100 μ l,37℃孵育1 h;洗板,方法同上。⑥每孔加酶底物溶液100 μ l,37℃避光反应10～15 min,每孔加入终止液100 μ l,轻轻混匀,30 min内于酶标仪450 nm波长测吸光度。⑦以TNF-α标准品浓度为横坐标,相应吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。⑧根据待测血清的吸光度、标准曲线计算待测血清中的TNF-α浓度。IL-4的测定方法同TNF-α。

1.4 统计学分析 应用SPSS16.0统计软件进行分析,计量资料采用±s表示,采用t检验。

2 结 果

2.1 重度侵袭性牙周炎患者牙周基础治疗前后牙周探诊深度(PD)、附着水平(AL)、探诊出血指数(BOP)的比较 重度侵袭性牙周炎患者经牙周基础治疗后,PD、AL、BOP显著低于治疗前,两者相比差异具有统计学意义(均 P＜0.05)。见表1。

2.2 重度侵袭性牙周炎患者牙周基础治疗前后血清TNF-α、IL-4水平的比较 重度侵袭性牙周炎患者经牙周基础治疗后,血清中 TNF-α、IL-4与治疗前相比差异无统计学意义(均 P＞0.05)。见表2。

2.3 重度侵袭性牙周炎患者牙周基础治疗前后龈沟液TNF-α、IL-4水平的比较 重度侵袭性牙周炎患者经牙周基础治疗后,龈沟液中TNF-α显著低于治疗前,差异具有统计学意义(P＜0.05);而IL-4显著高于治疗前,差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表3。

表1 重度侵袭性牙周炎患者牙周基础治疗前后PD、AL、BOP 的比较( ±s)

表1 重度侵袭性牙周炎患者牙周基础治疗前后PD、AL、BOP 的比较( ±s)

时间 PD(mm) AL(mm) BOP治疗前 4.34±0.69 2.59 ±1.17 3.06±0.56治疗后 2.56±0.42 1.34 ±0.95 2.08±041 t值 10.364 8.351 11.057 P值 0.015 0.026 0.034

表2 重度侵袭性牙周炎患者牙周基础治疗前后血清 TNF-α、IL-4水平的比较( ±s,ng/L)

表2 重度侵袭性牙周炎患者牙周基础治疗前后血清 TNF-α、IL-4水平的比较( ±s,ng/L)

时间 TNF-α IL-4治疗前 1.94±0.35 41.3±7.9治疗后 1.89±0.38 40.9±8.1 t值 3.267 2.304 P值 0.126 0.072

表3 重度侵袭性牙周炎患者牙周基础治疗前后龈沟液TNF-α、IL-4 水平的比较±s)

表3 重度侵袭性牙周炎患者牙周基础治疗前后龈沟液TNF-α、IL-4 水平的比较±s)

时间 TNF-α(μ g/L) IL-4(ng/L)治疗前 7.3±1.9 29.4±5.1治疗后 3.5±1.3 67.3±12.7 t值 9.3640 8.109 P值 0.016 0.042

3 讨 论

TNF,又称淋巴毒素,包括 TNF-α、TNF-β两个亚型,其中TNF-α相对分子质量为17 000,常以二聚体的形式存在。TNF-α主要由活化的单核-巨噬细胞、活化的自然杀伤细胞、抗原刺激的 T细胞、肥大细胞分泌〔7〕。TNF-α具有广泛的生物学活性,能促进急性期反应物质、IL-1、IL-6以及 IL-8的合成,增强主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类抗原表达以及细胞毒性T淋巴细胞的活性,引起内皮细胞的黏附性增强以及白细胞增多,此外还对多种病毒感染细胞、肿瘤细胞具有细胞毒或抑制生长作用〔8〕。IL-4是一种由活化 T细胞产生的细胞因子,相对分子治疗18 000～20 000,在B细胞生长的早期可使其活化进入G1期,在B细胞对蛋白质性抗原发生免疫应答时起不可或缺的作用〔9〕。此外,IL-4可以增强B细胞膜上表达CD23以及MHCⅡ类抗原,诱导抗体的同种型转换,增强单核-巨噬细胞表达MHCⅡ类抗原,与IL-3协同刺激肥大细胞增殖、活化细胞毒性 T 淋巴细胞〔10〕。

在本研究中,经牙周基础治疗后,重度侵袭性牙周炎患者PD、AL、BOP显著低于治疗前,因此牙周基础治疗对重度侵袭性牙周炎患者的疗效较好。另外,重度侵袭性牙周炎患者经牙周基础治疗后,血清中TNF-α、IL-4与治疗前相比差异无统计学意义(均P＞0.05);这可能是因为侵袭性牙周炎为局限性炎症,牙周基础治疗是针对局限性炎症的治疗,因此对重度侵袭性牙周炎患者血清中细胞因子浓度的影响不大。最后,重度侵袭性牙周炎患者经牙周基础治疗后,龈沟液中TNF-α显著低于治疗前,而IL-4显著高于治疗前,这主要是因为经过牙周基础治疗后,重度侵袭性牙周炎患者牙周局部的炎症强度减弱,进一步导致龈沟液中 TNF-α浓度降低、IL-4浓度升高。

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