孙 萍,盛家和,姚晓宾
河南省肿瘤医院检验科,河南郑州 450003
我院从2009年开始使用AVE-763B全自动尿沉渣分析仪进行尿沉渣检测,在检测过程中,笔者发现,该仪器具有快速、不易污染、并减轻了工作中的劳动强度等优点,而且它能及时对流动视野中的有形成分进行捕捉、判别、并定量报告,使尿沉渣的检测自动化、操作规范化。但在使用过程中,笔者也同时发现,各检测项目均存在不同程度的干扰因素,尤其是红细胞和白细胞。目前尿液分析的方法主要有显微镜检查法、流式尿液有形成分分析法、干化学法等,显微镜检查法是最常使用并得到公认的检测方法[1-2]。为此,笔者将通过AVE-763尿沉渣分析仪与显微镜镜检对尿沉渣中红、白细胞的检测进行比较,并进一步探讨其假阳性影响因素,为今后工作积累经验。
选择2010年3~8月来我院就诊的门诊患者50例,住院患者1530例,其中,女877例,男653例,用一次性尿杯留取中段晨尿(尿量>20 ml)待检。
AVE-763B全自动尿沉渣分析仪及其配套试剂,OLYMPUS显微镜,水平式离心机,离心管,尿沉渣计数板。
所有留取的尿标本经人工充分混匀后分别倒入2支清洁的试管内,各10 ml左右。一份上AVE-763B全自动尿沉渣分析仪做自动分析检测,另一份按《全国临床检验操作规程》(第3版)[3]尿沉渣检查的方法,离心沉淀后取尿沉渣进行显微镜检查,所有标本检测均在2 h内完成。
AVE-763B 全自动尿沉渣分析仪:红细胞:0~4 个/μl,白细胞0~8个/μl。显微镜镜检正常参考范围:红细胞0~3个/HP,白细胞0~5个/HP,超过此范围为阳性。以显微镜检查作为尿常规检查中有关形态学检查的“金标准”,AVE测得阳性标本而显微镜镜检阴性视为假阳性,AVE测得阴性标本而显微镜镜检阳性视为假阴性。
使用SPSS 13.0统计学软件,仪器法和镜检法比较采用配对χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
AVE-763B全自动尿沉渣分析仪与显微镜检查尿中红细胞和白细胞,结果比较见表1。配对χ2检验结果显示两种检测方法差异无统计学意义(P>0.05),红细胞和白细胞检测两种方法比较Kappa值均大于0.8,说明两种方法对红细胞和白细胞检测均具有较高的一致性。镜检法检测红细胞的假阳性率为12.7%,白细胞的假阳性率为9.5%。
表1 AVE-763B尿沉渣分析仪与手工镜检结果比较(例)
虽然仪器法和镜检法具有较好的一致性,但是仍存在一定程度的误判,红细胞检测的假阳性率为12.7%,假阴性率为14.9%,白细胞检测的假阳性率为9.5%,假阴性率为1.6%。红细胞检测存在更多的干扰因素引起仪器误判,常见的影响因素见表2。结晶和霉菌孢子易引起仪器误判为红细胞,上皮细胞和大量红细胞易引起仪器误判为白细胞。
表2 仪器法假阳性的主要影响因素
尿液有形成分检查是常规尿液分析中不可缺少的组成部分,是诊断肾脏疾病及泌尿系统疾病的主要方法之一,并可为临床提供诊断及鉴别诊断的依据。AVE-763B全自动尿沉渣分析仪采用“机器视觉技术”,即通过全自动显微镜和数码图像采集单元的配合,采用计算机图像处理与识别软件,自动跟踪,识别和分类尿液中的有形成分。独创低倍镜扫描阴性过筛,低倍镜目标定位,高倍镜跟踪识别功能,通过显微镜对流动计数池内的有形成分的显微放大,由主机控制摄像同步装置对分布在视阈内的样品摄取多幅图像进行分析处理,实现了样品的传送、样品的染色、混匀、吸取、排放及定量以及显微镜镜检过程的全自动控制,需人工干预少。在检测过程中笔者发现,该仪器对阴性标本过筛较可靠,不失为一种尿液筛查好方法,但尿中有形成分复杂,有干扰因素存在会引起仪器误认造成假阳性,需要人工辨认[4]。
本实验结果显示仪器法和镜检法检测红细胞Kappa值为0.83,白细胞Kappa值为0.88,说明两种方法具有较好的一致性,两种检测方法比较差异无统计学意义(P>0.05)。但是在工作中,仪器法仍存在一定程度的误判,由表2可知:结晶是造成红细胞假阳性的最主要因素,这可能与在做质控过程中,用高倍镜调焦距时光线太强,致使结晶类物质反光太强,且某些结晶与红细胞体积大小相似,以致机器误认有关。霉菌孢子和成团的细菌也是造成红细胞假阳性增高的原因。因此,当尿液中出现上述成分而提示红细胞结果异常时,应镜检复查[5]。白细胞假阳性大部分是由于鳞状上皮细胞引起,占70.5%。当尿中出现鳞状上皮细胞时,由于其细胞核与白细胞体积和形态较相似,在机器摄取的图像中,鳞状上皮细胞的核就会出现蓝色的“+”,显示是白细胞,而被机器误认。当尿中红细胞数量较多时,大量的红细胞会造成白细胞假阳性。笔者在检测过程中发现像草酸钙结晶、非晶形盐类结晶对红、白细胞均有一定程度的影响,会造成二者呈假阳性增高,本组中结晶对红细胞造成的假阳性占62.4%,对白细胞造成的假阳性占10.3%。
在医院尿标本不断增多的情况下,对每个标本都严格操作进行人工镜检是很困难的。全自动尿沉渣分析仪的普及,解决了尿液分析中的主要问题。AVE-763B全自动尿沉渣分析仪规范了尿液检查的报告形式和尿液自动检测的标定,操作简便。由于尿中有形成分形态大小不一,存在干扰因素,因此,当尿沉渣分析仪与镜检不符时,要以显微镜检查为准,并密切结合临床综合分析,必要时进行动态观察[6]。
[1]丛玉隆,马俊龙,岳秀玲,等.中国健康人尿液显微镜检测法有形成分结果调查[J].临床检验杂志,2006,24(2):81-84.
[2]丛玉隆.尿沉渣检查标准化建议[J].中华检验学杂志,2002,25(7):249-250.
[3]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].3版.南京:东南大学出版社,2006:293-296.
[4]左新华.AVE-762沉渣分析仪、尿干化学分析仪及尿沉渣镜检联合监测的临床应用价值[J].实验与检验医学,2010,28(1):75-78.
[5]李一龙.UF-100尿沉渣仪红细胞测定质量探讨及对策[J].中国现代医生,2009,47(31):89-90.
[6]李光亮,金晓东,陈广平.UF-100尿沉渣分析仪和干化学测定尿中白细胞和红细胞的比较[J].国外医学:临床生物化学和检验学分册,2005,26(1):62.