α-松油醇的提取纯化与稳定性实验*

彭峥国，薛健，吴晓波，薛雯

(1.中国医学科学院药用植物研究所，北京 100193;2.江西中医学院药学院，南昌 330004)

α-松油醇是油松节挥发油的主要成分之一［1］，是《中华人民共和国药典》2010年版新收录的药材品种油松节(Lignum Pini Nodi)［2］鉴别的指标性成分，笔者对油松节中α-松油醇的提取纯化工艺进行了研究，采用硅胶柱色谱法从油松节挥发油中分离出纯度较高的α-松油醇，对其进行了纯度方面的分析，并对所得的α-松油醇做了一系列相关的稳定性研究实验。为满足药材鉴别的需要，为药材质量控制提供了有力的保证，更为α-松油醇的储存提供了科学依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent 6890气相色谱仪(FID检测器);电热恒温鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司，DHG-9023A);梅特勒PL203型分析天平(瑞士梅特勒-托利多国际股份有限公司);硅胶;α-松油醇标准品购于和光纯药工业株式会社;硅胶预制板(青岛海洋化工厂)。

1.2 试药 油松节药材由中国医学科学院药用植物研究所张本刚教授鉴定;正己烷(美国Fisher公司)为色谱纯，其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 高纯度 α-松油醇的制备

2.1.1 制备方法 采取水蒸气蒸馏法，从油松节中提取挥发油约2 g。利用薄层色谱法，分析挥发油成分。选取石油醚∶乙酸乙酯作为展开系统，香草醛硫酸作为显色剂［2］。通过调整展开系统的极性，以达到提取分离α-松油醇，最终确定展开系统为石油醚∶乙酸乙酯(20∶1)。称取硅胶10 g，石油醚湿法装柱。称取挥发油0.2 g，上样，用石油醚:乙酸乙酯(20∶1)洗脱，前50mL弃去，然后每20mL接为一个馏分，浓缩，点薄层，显色，确定在130～170mL可以得到较纯的α-松油醇。

2.1.2 α-松油醇的纯度测定 取油松节挥发油适量，精密称定，加正己烷制成浓度为0.2 g·mL-1的溶液。取分离所得 α-松油醇适量，加正己烷制成浓度为0.02 g·mL-1的供试品溶液。进样气相FID检测器。

色谱条件:HP-5毛细管色谱柱(0.32mm×30 m，0.25 μm);氢火焰离子化检测器(FID);进样口温度230℃ ;检测器温度320℃ ;柱温以60℃为起始温度，保持1min，以3℃·min-1升温至140℃，再以50℃·min-1的升温至300℃;载气:氮气;进样方式为分流进样，分流比10∶1;进样量1 μL。见色谱图1。图1可知所提取分离物质为α-松油醇;比较图1中B和C得油松节挥发油经“2.1”项方法处理后，大大提高了α-松油醇的纯度;根据图1中色谱图C，用面积归一化法得出分离所得α-松油醇的纯度为95.2%。

图1 3种溶液的HPLC色谱图A.α-松油醇对照品;B.油松节挥发油;C.提取分离得 α-松油醇;1.α-松油醇Fig.1 HPLC chromatogram of 3 kinds of solutionA.reference substance of α-terpineol;B.volatile oil from pine nodular branch;C.the extract α-terpineol;1.α-terpineol

2.1.3 工艺验证实验 为进一步考察工艺的可靠性及稳定性，取6份药材按上述提取分离工艺进行验证实验，操作方法同前述，6次实验提取分离得α-松油醇纯度的相对标准偏差(RSD)值为3.4%，表明工艺稳定可靠。

2.2 稳定性考察 取油松节中分离所得α-松油醇适量，置于干净的称量瓶中，摊成厚度≤5mm的薄层，然后分别置于60℃温度和照度(4 500±500)lx条件下下放置10 d，每组实验做2个平行。于第5天和第10天取样，按纯度分析条件测试，纯度情况见表1。

表1 α-松油醇高温及光照处理后纯度Tab.1 The purity of α-terpineol treated by high temperature and light %

结果表明:α-松油醇分别在温度60℃和照度(4 500±500)lx条件下，于第5天和第10天纯度都发生了较大的变化。其中分别在高温和强光照的条件下，均存在第10天纯度变化比第5天的纯度变化大。由此可以确定α-松油醇应避光低温储存。

3 讨论

油松节在我国有大量的种植面积［3］，为生产生活中常用的药材。不同产地的油松节所含的α-松油醇的量存在很大的差异。由于α-松油醇具有很强的挥发性，粉碎的油松节样品应尽快进行α-松油醇的提取分离。光照实验的过程中，应保证盛装样品的器皿敞口放置，且注意温度的控制。笔者利用硅胶柱分离法，从油松节中分离得到高纯度的α-松油醇，并针对分离得α-松油醇做相关的稳定性实验，为进一步研究α-松油醇的提取和理化性质奠定了科学基础。

［1］张林林，薛健.油松节药材质量研究［J］.医药导报，2010，30(2):240－242.

［2］国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)［M］.北京:中国医药科技出版社，2010:211.

［3］董岩，邱琴.气相色谱/质谱联用(GC/MS)法分析油松节挥发油化学成分［J］.理化检验:化学分册，2003，12(12):718－720.