通心络对糖尿病大鼠血糖及非酶糖基化终产物的影响*

苏晓乾 , 张常喜 ,谢春毅

(1.宁夏医科大学附属医院, 银川 750004; 2.宁夏回族自治区中医研究院,银川 750021; 3.上海中西结合医院,上海 200082)

通心络具有益气通络的作用，有实验证明该药对血糖有降低作用[1]，也有实验证明通心络对血糖作用不明显。但临床发现通心络对于糖尿病患者多种心血管疾病均具有一定治疗作用。本实验旨在观察通心络对糖尿病大鼠血糖和糖化血清蛋白的影响，探讨通心络对糖尿病病变的防治环节。

1 材料和方法

1.1材料 实验选用清洁级、体重(210±20) g、SD雄性大鼠60只(上海复旦大学动物实验中心提供，许可证号：SCXK沪2002-0002)。动物饲养温度25 ℃，湿度40%。

1.2药品及试剂 通心络由石家庄以岭药业股份有限公司提供。链脲佐菌素购自美国Sigma公司，进口分装。糖化血清蛋白(GSP)购自南京建成生物工程公司。G1ucolxend血糖试纸采用德国罗氏公司产品。

1.3主要仪器设备 深低温冰箱：美国REVCO，型号, ULT7150-9V/ULT10140-9V；电子精准天平：Quantum 10509-00347； UV-2102C分光光度计2.1：上海精密科学仪器有限公司 (仪器编号：SFZ 1606016686)；G1ucolxend血糖仪：德国罗氏公司。

1.4方法

1.4.1动物分组及处理 雄性SD大鼠60只，随机取17只分为8周、12周正常对照组，8周组9只、12周组8只，正常饲养，不予特殊处理。其余43只SD大鼠禁食12 h后，按55 mg/kg剂量腹腔内注射浓度为1 mg/ml的链脲佐菌素(用柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液溶解配制，pH 4．2)。注射72 h后用罗氏血糖仪测定大鼠尾尖空腹血糖，血糖值>16.7 mmol/L，且伴有多饮、多食和尿量增加者确定为糖尿病(DM) 模型，纳入糖尿病大鼠分组，不合格者剔除。最后有40只糖尿病造模成功，将其随机分为两组：模型组和通心络组，每组又按取材时间分为8周和12周组；正常对照组和模型组每天予2 ml生理盐水灌胃，通心络治疗组按1.0 g/kg·d-1给药量稀释于2 ml生理盐水中灌胃。正常对照组8周组9只，12周组8只，余各组每组10只。分别于给药8周、12周后腹腔注射1%戊巴比妥钠麻醉后腹主动脉采血约10 ml左右并分离血清，大鼠采血后处死。以分光光度计测定糖化血清蛋白水平。

1.4.2统计学分析 多样本均数比较采用单因素方差分析，组间比较采用LSD检验，均由 Spss 12.0软件完成。

2 结果

本实验持续12周。实验每4周监测血糖1次。以上实验在上海复旦大学实验动物中心完成。重复造模不够标准脱失3只。除正常大鼠组，糖尿病组及各药物组大鼠均出现多食、多饮、多尿、消瘦等症。实验中途脱失4只，其中正常8周组灌胃不当死亡1只，糖尿病8周组死亡1只，通心络8周组、12周组各因灌胃不当各死亡1只，最终进入结果分析53只。

2.1通心络对糖尿病大鼠血糖的影响 造模后初测模型组和通心络治疗组大鼠血糖水平均明显高于正常对照组(P<0.05)，而此两组间血糖水平差异不明显；实验8周时，模型组大鼠血糖水平明显高于正常8周对照组(P<0.05)，通心络治疗组血糖水平略高于模型组(P>0.05)。实验12周时，模型组大鼠血糖水平明显高于正常12周对照组(P<0.05)，通心络12周治疗组血糖水平与模型组无明显差别(P>0.05)。见表1。

表1 各组大鼠血糖比较 mmol/L

2.2通心络对糖尿病大鼠非酶糖基化终产物(糖化血清蛋白)的影响 实验 8周时通心络治疗组糖化血清蛋白水平低于模型组8周组(但P>0.05)；实验12周后通心络治疗组糖化血清蛋白水平明显低于模型组(P<0.05)，见表2。

表2 各组大鼠糖化血清蛋白的影响 mmol/L

3 讨论

近年来随着我国人民生活水平的提高，饮食结构的改变，糖尿病的发病率持续上升。糖尿病及其并发症对人民的身体健康构成了严重的威胁，其心脑血管并发症是致死致残的主要原因。近10年来，中医药防治糖尿病并发症取得了显著的成绩，开展中医药防治DM的基础研究，对阐明中医药对DM的作用机制、提高中医药防治DM研究水平、推进中医药现代化进程，无疑将有所裨益。

糖化血清蛋白是己糖(主要是葡萄糖) 与血清蛋白结合所形成的,其生成是一个缓慢、连续、不可逆的非酶促反应,其合成速率与血清蛋白所处环境中糖的浓度成正比, 有较长的半衰期,可代表6～8 周内糖尿病病人血糖平均浓度[2 ,3]。也代表肌体内组织蛋白非酶促糖基化蛋白的状况。人类单核细胞表面具有糖基化终末产物(AGE)特异性受体[4]，AGE与其受体结合后，可促使单核细胞释放多种细胞因子及生长因子如肿瘤坏死因子ɑ、白介素-l、血小板源生长因子(PDGF)、IGF，TGF-β1等，增加内皮细胞通透性及单核细胞趋化性，并促进血管及心肌ECM的增生[5]，从而导致糖尿病并发症的发生发展。

通心络具有益气通络的作用，但对降糖作用说法不一。通过本实验发现，通心络对糖尿病大鼠的血糖降低不明显，无统计学意义，而应用通心络早期干预可以有效抑制蛋白的非酶糖基化反应，从而有效保护器官组织，并且通过8周组和12周组的比较可以看出，通心络干预治疗时间越长，对蛋白的非酶糖基化反应的抑制作用越好。

1 林楠,宋王宣,薛丽.通心络胶囊治疗糖尿病肾病疗效观察.中国误诊学杂志，2005，5(9)：1663

2 Steinbrook R. Facing the diabetes epidemic-mandatory reporting of glycosylated hemoglobin values in New York City.N Engl J Med, 2006，354: 545

3 Browless M. The role of non - enzymatic glucosulation in thepathogenesis of diabetic angiopathy. Molecular and cellular biology of diabetes mellitus Vol Ⅲ complication of diabetes mellitus. New York :Alan R.Liss Inc ,1989：9-18

4 Myint K M , Yamamoto Y , Sakurai S,etal.Blockade of diabetic vascular injury by controlling of AGE-RAGE system. Curr Drug Targets, 2005, 6(4): 447

5 Zhao H M, Malgorzata P, Wu I H,etal.Inhibiting Glycosphingolipid Synthesis Improves Glycemic Control and Insulin Sensitivity in Animal Models of Type 2 Diabetes.Diabetes, 2007,56: 1210