液基薄层找线索细胞与BV blue检测细菌性阴道病结果比较

曾风华，辛 华

(1、吉安市青原区妇幼保健院检验科，江西吉安 343009；2、南昌大学第二附属医院妇产科实验室，江西南昌 330006)

细菌性阴道病(Bacterial vaginosis,BV)是由于阴道内加德纳菌和厌氧菌增多，而乳酸杆菌减少，阴道内生态系统改变而引起的一种疾病。健康妇女阴道菌群中乳酸杆菌占绝大多数，是维持正常阴道微生态的优势菌种，如果因某种原因这种平衡受到破坏，优势菌属转换，BV便得以发生。近年有研究表明，阴道分泌物中唾液酸酶活性与BV之间存在一定的量的关系。BV妇女阴道分泌物中的唾液酸酶活性明显高于正常妇女，正常妇女的阴道分泌物中含很少量的唾液酸酶或不含唾液酸酶[1]。线索细胞(Clue cell)是诊断细菌性阴道病的确定指标，本文探讨液基薄层找线索细胞与快速唾液酸酶法(BV blue)检测细菌性阴道病的结果比较。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 对象 我院妇科2010年9月至2011年4月的门诊病人，年龄，20～55岁，共计102例。

1.2 方法

1.2.1 唾液酸酶检测 BV blue快速诊断试剂盒 (北京明悟德生物技术有限公司)，美国Gryphus进口配装。批号：BVRB113014837×H用棉签收集病人阴道壁(下三分之一段)分泌物样品(尽可能多)，将棉签置于无菌试管中送检。将取样拭子浸入测试管溶液中，轻轻搅动混匀，将带有棉拭子端的测试管，置于37℃恒温器中，温育10min，加2～3滴显示剂至含有棉拭子的试管中轻摇混匀，立即观察测试管内溶液及棉拭子的颜色变化结果。阳性结果：测试管中溶液显蓝色或绿色及棉拭子显蓝色或绿色，均表明BV blue检测阳性，指示阴道致病厌氧菌感染异常，分泌物唾液酸酶活性显著增高。阴性结果：测试管中溶液及棉拭子均为黄色，指示阴道中无显著致病厌氧菌感染，分泌物唾液酸酶活性正常。

1.2.2 方法的局限性 不适用于72h内使用过灌注疗法、栓剂或膏剂的妇女。

1.2.3 新柏氏TCT片检查，将巴氏染色的TCT片，在高倍镜下观察，鳞状上皮细胞被革兰阴性球杆菌覆盖，尤其沿细胞膜边缘排列，外观似线索状，即为线索细胞。片中线索细胞占全部上皮20%以上，即线索细胞阳性,才能判定为阳性结果[2]。TCT片中线索细胞＞20%为阳性,线索细胞>60%～70%为强阳性，同时患者白带稀薄，并有腥臭味，pH值＞4.5时即可诊断为细菌性阴道病。

2 结果

2.1 结果显示两种检测方法结果相一致，经χ2检验，两者无显著差别(P＞0.05)，结果基本一致。

表1 TCT片找线索细胞和BV blue两种检测细菌性阴道病方法结果比较

3 讨论

细菌性阴道病是阴道菌丛微生态相关常见传染性非炎症综合症，可引发妊娠期、产褥期并发症及新生儿感染性疾病。该病多发生于15～44岁的育龄期女性，是育龄期妇女最常见的一种阴道感染性疾病[3]。它是由于阴道正常菌群(含乳酸杆菌)被阴道加特纳菌、厌氧菌、人型支原体构成的混合菌群所取代，造成菌群失调而引起的疾病，而且常易复发，远远高于阴道滴虫与霉菌感染发病率之和[4]；占外阴、阴道感染的40%～50%[5]。过去临床诊断BV的标准为传统的Amsel法(又称金标准法)，具备下列4项指标中至少3项者为细菌性阴道病：A阴道分泌物增多，呈匀质稀薄的阴道分泌物；B pH＞4.5(pH多为5.0～5.5)；C胺臭味试验阳性；D线索细胞(clue cell)。阴道分泌物pH测定就是利用BV阴道PH值升高的原理进行检测，临床实验表示，92%～97%BV患者阴道pH值大于4.5，故以pH值＞4.5为诊断BV的辅助指标之一；根据有些专家研究的结果，阴道菌群正常的妇女在性交后或在月经期、滴虫感染时pH值也可增高，阴道分泌物中混有宫颈黏液也将产生较高的pH值，所以说pH值的测定受多种因素的影响，敏感性较高，但特异性较低。细菌性阴道病存在时，正常菌群中乳酸杆菌大量减少或消失，而阴道加特纳菌、厌氧菌或支原体等微生物过度生长，所以在分泌物中滴加10%KOH溶液可导致游离胺释放，产生典型的鱼腥样气味。但常规的胺试验客观性差，灵敏度低，受实验人员嗅觉功能影响大，某些BV妇女在性交后阴道恶臭味更加强烈，这可能是因为精液的pH值较高，发挥与KOH相同的作用产生了氨味。腐氨也存在精液中，对气味敏感而无BV的妇女会注意到这种气味，所以胺试验的假阳性可发生在近期有性行为的妇女，该方法属于辅细菌性阴道病。线索细胞检查，取阴道分泌物革兰染色后镜下见散在的上皮细胞及其间的细菌。上皮细胞表面粘附很多革兰阴性短小球杆菌，使其边缘呈锯齿状而不清晰，形成所谓线索细胞(Clue cell)。革兰染色制片需要干燥、固定、染色，操作相对复杂，费时费力。尤其是革兰染色过程中反复冲洗，使标本脱落，线索细胞丢失而造成漏诊，影响阳性结果[6]。而线索细胞检测是单项BV临床化验的最有特异性的。湿片中线索细胞的检查虽操作简便，但缺少规范的检查方法和统一的阳性标准，还受到炎症细胞的干扰，直接影响了细菌性阴道病的临床诊断。TCT片背景干净，在高倍镜下观察，鳞状上皮细胞被球杆菌覆盖，细菌像细沙样覆盖在上皮细胞的表面，尤其沿细胞膜边缘排列，外观似线索状，即为线索细胞，线索细胞占上皮细胞20%以上，即可提示为细菌性阴道病。BV blue唾液酸酶快速诊断法结果易观察，操作简便快速，特异性强，试剂有效期长不需要特殊仪器，结果稳定性好，是临床诊断细菌性阴道病的可靠检测方法，但价格昂贵，不能解决看病贵问题，液基薄层TCT片作为一种新型的科学技术，在妇女宫颈防癌普查中，已逐渐代替了传统的宫颈刮片，为广大基层医院所采用，并将成为一种趋势，取代传统的宫颈刮片，国家每年也投入大量的资金为妇女宫颈防癌普查，本研究认为在做液基薄层宫颈防癌普查工作，同时进行线索细胞检查，对临床细菌性阴道病提供有价值的诊断，有效解决群众看病贵问题，非常值得临床广泛开展。

[1]廖衍强.唾液酸酶法诊断细菌性阴道病的临床意义[J].吉林医学,2010,31(8):1068.

[2]白 桦,林 养,吴春芳,等.唾液酸酶法诊断细菌性阴道病的临床应用[J].海南医学院学报,2010,16(4):511～512.

[3]贾长茹,苑 媛.不同方案治疗细菌性阴道病的疗效比较[J].哈尔滨医科大学学报,2009,43:517-518.

[4]张晓萍,肖淑君.阴道唾液酸酵酶检测妊娠合并细菌性阴道病及其对妊娠结局的影响[J].白求恩军医学院学报,2008,6(5):264-265.

[5]沙玉成,马 丽.细菌性阴道病的诊断与治疗进展[J].中国实用妇科与产科杂志,2005,21(3):131-133.

[6]朱新建,黄 烈,钟小强.唾液酸酶检测对细菌性阴道炎的诊断价值与临床应用[J].海南医学,2006,17(5):167-168.