高效液相色谱法测定罗库溴铵含量的不确定度评定

董军杰 庞文哲 宋更申 姜建国

(河北省医学情报研究所，河北 石家庄 050071)

高效液相色谱法测定罗库溴铵含量的不确定度评定

董军杰 庞文哲1宋更申△姜建国2

(河北省医学情报研究所，河北 石家庄 050071)

高效液相色谱法;不确定度;罗库溴铵

罗库溴铵(rocuronium bromide)是一种新型非去极化神经肌肉阻滞剂，适用于全身麻醉，可使骨骼肌松弛［1］。含量测定是药品质量控制中的重要内容，高效液相色谱法(HPLC)是药典中常用的方法，我们采用HPLC法对罗库库溴铵含量进行测定，并参考有关文献［2-4］对其测量不确定度进行了分析，以期找出影响测定不确定度的因素，对测量不确定度进行探讨，确定测量结果的可信程度。这有助于我们在药品检验工作中做好仪器的维护保养，严格按仪器标准操作规程操作仪器，消除其他的不确定因素。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药 Agilent 1200高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);Sartorius BP 211D型电子天平，Sartorius PB-21型pH计(德国塞多利斯公司);罗库溴铵对照品:河北省药品检验所标定(批号:LK-2008001，含量100.0%);罗库溴铵原料(河北柏奇药业有限公司提供，批号:070101，含量 99.6，水分 0.1%)，四甲基氢氧化铵、乙腈为色谱纯(瑞士Fluka公司);磷酸为分析纯(北京化工厂)，水为超纯水(由美国Millipore超纯水器制备)。

1.2 实验方法

1.2.1 测定法 色谱柱:Agilent Zorbax NH2柱 (250 mm×4.6 mm，5μm)，流动相:0.04 mol/L 的四甲基氢氧化铵溶液(用磷酸调节pH值至7.4)-乙腈(10∶90)为流动相，柱温为35℃，检测波长为207 nm，流速1.0 mL/min，进样量为10μL。

精密称取罗库溴铵约50 mg，置于50 mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取10 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。另取罗库溴铵对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。1.2.2 数学模型 含量计算公式为:

2 结果

2.1 各量值不确定度的识别和分析

2.1.1 A样的不确定度 UC［A样］Agilent1200高效液相色谱仪检定证书给出的定量测量重复性RSD=0.1%，查JJF1059-1999概率分布情况的估计为矩形分布，则引用不确定度等于，故标准偏差S=，因此有 UC［A样］==0.000 58。

2.1.2 A对的不确定度 UC［A对］UC［A对］同 UC［A样］=0.000 58。

2.1.4 P对的不确定度 UC［P对］罗库溴铵对照品纯度为100.0%，纯度标准偏差约为0.3%，按矩形分布，取包含因子 k =，罗库溴铵对照品纯度的标准不确定度UC［P对］= 0.003/=0.001 8。

2.1.5 W样称量的不确定度UC［W样］W样的称样量为50.11 mg。称量不确定度来自2个方面:①称量变动性，在50 g以内，变动性标准偏差为0.07 mg;②天平校正产生的不确定度，按检定证书给出的在95%置信概率时为:±0.15 mg，换算成标准偏差为 0.15/1.96=0.077 mg。

2.1.6 50 mL容量瓶体积的不确定度 UC［V(50mL)］其不确定度来源为:①50 mL容量瓶体积的不确定度，按河北省计量院给定为±0.006 mL，按均匀分布换算成标准偏差为:0. 0 06/=0.0035 mL;②读数的不确定度，重复10次统计出标准偏差为0.009 1 mL;③容量瓶和溶液温度与校正温度不同引起的不确定度，校正温度为26.0℃，使用时温度为26.1℃，相差0.1℃，对水体积膨胀系数为2.1×10-4/℃，则95%置信概率时体积变化的区间为:100×0.1 ×2.1 ×10-4=0.002 1 mL，转换成标准偏差为:0.002 1/1.96=0.001 1 mL。

2.1.7 水分的不确定度UC［G］本品具有引湿性，本品的水分为0.1%，水分报告给出的标准不确定度UC［G］约为 0.000 58。

2.2 各量值的合成标准不确定度 见表1。

表1 罗库溴铵含量测定的有关量值

U［含量(%)］=0.003 7 ×1.00=0.003 7

2.3 不确定度各分量来源分析 见图1。

图1 不确定度各分量来源分析图

2.4 含量(%)的扩展不确定度 实验结果一般用扩展不确定度表示。取包含因子k=2(置信概率为95%)，则含量测定扩展不确定度为:2 ×0.003 7=0.007 4≈0.8%，含量测定结果表达为:含量范围为99.6% ±0.8%(k=2)。

3 讨论

分析评估不确定度时，首先要尽量考虑产生不确定度的所有来源，因为合成不确定度的数值几乎完全取决于重要的不确定度分量。由以上的评定也可以看出，HPLC法测定罗库溴铵的含量，合成不确定度的数值几乎完全取决于重要的不确定度分量，W对和W样贡献最大，P对次之，A样和A对最小。这提示我们在罗库溴铵含量测定的过程中，尤其要关注对照品和样品称量的准确性，以减小该不确定度分量对测定结果不确定度的影响，从而减小测定结果的不确定度。

测量不确定度是在药品定量分析的结果上，对分析结果的可信范围的把握。通过不确定度的评定，能够分析出测定过程中影响结果准确性的主要因素，有利于检测结果可信程度和检测质量的提高。测量不确定度与药品检验工作密切相关，它将在药品检验中起到重要的作用。同时，必须严格控制实验条件，并规范实验操作。测量不确定度用于评估定量方法的可靠性和测量结果的可信程度，对于药品检验具有重要意义。

［1］裴凌，盛卓人.罗库溴铵欧洲研讨会综述［J］.国外医学:麻醉学与复苏分册，1995，16(4):219-222.

［2］国家药典委员会.中华人民共和国药典:二部［M］.北京:化学工业出版社，2005:579.

［3］EURACHEM/CITAC GUIDE.量化分析测量不确定度指南［M］.北京:中国计量出版社，2003:129.

［4］宋更申，周丽，姜建国，等.HPLC法测定罗库溴铵原料的含量［J］.国际药学研究杂志，2010，37(2):127-129.

R927.2

A

1002-2619(2011)12-1913-02

△通讯作者:河北省药品检验所抗生素室，河北 石家庄 050011

1 河北省药品检验所抗生素室，河北 石家庄 050011

2 河北省药品检验所化学室，河北 石家庄 050011

董军杰(1973—)，男，编辑，学士。从事医学编辑工作。

2011-09-15)