前列通片提取工艺的研究

昌志红,邓小玉 (仙桃市彭场卫生院,湖北仙桃43301 8)

前列通片由黄柏等10味中药组成,是我院仿制制剂之一。其制法规定:黄柏与其它6味药用水提取两次。而黄柏与其它药味煎煮可能导致盐酸小檗碱在提取物中的含量显著降低[1]。为了尽量降低前列通片制备过程中药物之间相互作用对成品有效成分的影响,我们进行了如下实验,现报道如下。

1 实验材料

1.1 仪器

LD-6A高效液相色谱仪;SPD-10B检测器;LC-2002色谱工作站;TDL-40B型台式离心机,721紫外分光光度计。

1.2 药品

广东王不留、黄芪、车前子、关黄柏、两头尖 、蒲公英、泽兰经本市药品检验所鉴定为药典收载品种,盐酸小檗碱 (713-9961)、芦丁 (0085-9705)延胡索乙素 (0087-9630)对照品购自湖北省药品检验所。

2 方法与结果

2.1 工艺设计

黄柏单独用水煎提,土茯苓、丹参、川楝子、苦参、赤芍、三棱、当归、香附、芡实等9味药合并用水煎煮提取。

2.2 黄柏的提取

2.2.1 提取条件选择 选用L9(34)正交设计表,以盐酸小檗碱的含量为指标,考察加水量、提取时间、提取次数对提取工艺的影响。因素水平见表1,正交试验结果见表2,方差分析结果见表3。由表2、表3可知:黄柏提取过程中A、C因素对试验结果有显著影响,B因素对实验结果影响较小,故优化提取方案选择A3B2C3。即提取水量为净药材的10倍,水提3次,每次2h。

表1 黄柏提取方法因素水平

表2 黄柏提取方法正交试验

2.2.2 含量测定 取黄柏9份,每份100g,按表2所示方案提取,将以上各样品提取液过滤,并浓缩至50ml,按药典方法测定盐酸小檗碱含量[2]。

2.3 黄芪等6味中药提取方案试验

2.3.1 提取条件 选用L9(34)正交设计表,以总黄酮的含量为指标,考察 A、B、C因素对提取工艺的影响。因素水平表见表4,试验结果见表5,分析结果见表6。由表5、表6可知:黄芪等6味药水提过程中提取次数对试验结果有显著影响,A和C因素对试验结果影响较小,优化提取方案选应A2B2C3。即提取条件为:提取水量为净药材量的8倍,水提3次,每次2h。

表3 黄柏提取方法方差分析

表4 黄芪等提取方法因素水平

表5 黄芪等取方法正交试验

2.3.2 含量测定 取王不留40g、黄芪46g、车前子26g、两头尖34g、蒲公英33g、泽兰33g按正交设计条件用水提取,过滤,浓缩至500ml备用。

1)样品溶液制备。精密量取各试验号的水提液25ml除去水份,以30%乙醇溶解,移至10ml容量瓶中,再加30%乙醇至5ml,各加入10%NaNO20.3ml溶液,混合均匀,取2ml加入10%Al(NO2)30.3ml摇匀,放15min,加入4%NaOH溶液,混合均匀,然后用30%乙醇稀释至规定量。

表6 黄芪等提取方法方差分析

2)准曲线绘制。按文献方法测定芦丁含量测定标准曲线[3],得回归方程A=0.0126C+0.0057,r=0.9996。线性范围 10.0～80.0μ g/ml。

3)含量测定。精密吸取50μ l以上样品溶液,移至10ml容量瓶中,加30%乙醇溶液稀释至规定量,混匀,依法测定,计算即得。

3 结 论

实验表明,前列通片质量标准中的水提取工艺应改为:黄柏加水量为原药材量的10倍,以水提取3次,每次2h。其余药材水提用水量为净药材量的10倍,水提3次,每次2h。提取方法变更后可明显提高前列通片中有效成份的含量,方法较为简单。

[1]郭东艳,陈娟.黄柏中盐酸小檗碱在不同复方中的提取率 [J].时珍国医国药,2009,20(6):1054-1055.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典 (一部)[S].北京:化学工业出版社,2005:94,214.

[3]喻雄华,王天明,曾爱兵.妇炎康片提取工艺的研究 [J].湖南中医杂志,2010,26(2):115.