黄柏炮制品的考证、化学成分和药理作用研究进展

代 琪，胡 宇，雷 蕾，罗 霄*

(1.成都市食品药品检验研究院 国家药监局中药材质量监测评价重点实验室，四川 成都610045；2.成都中医药大学 基础医学院，四川 成都 611137)

黄柏，习称川黄柏，植物来源为芸香科植物黄皮树的干燥树皮。黄柏味苦性寒，具有清热燥湿、泻火解毒及除骨蒸之功用。经辨证论治可用于湿热诸证、骨蒸劳热、盗汗遗精、疮疡肿痛等证的治疗[1]。以《中国药典》2015年版一部中黄柏三种炮制品(黄柏丝、盐黄柏、黄柏炭)为标准，在不同炮制方法影响下，黄柏所含化学成分及含量、药理作用也会产生变化和差异。本文通过对黄柏不同炮制品化学成分与药理作用差异的相关研究进行文献考证，以期为黄柏的现代运用及炮制方法选取、改进提供参考。

1 黄柏的炮制考证

1.1 传统炮制方法

黄柏最早见于《神农本草经》，名为“檗木”，但并未有完整炮制方法的记载。黄柏详细的炮制方法最早见于《雷公炮炙论》：“用生蜜水浸半日，漉出，晒干，用蜜涂，文武火炙，令蜜尽为度。”在随后的药学著作中，还出现“苦酒制”“微炒”“竹沥浸”“蜜炒”等炮制方法。但在明清以前，多以炒制和蜜制为主。明清以后，炮制方法逐渐丰富，出现酒制、盐制、姜制等方法，还有利用人乳、猪胆汁、童尿等辅料炮制的方法记载[2]。

综上可见，古代对于黄柏的炮制方法丰富且多样，医家以临床使用为需求，十分重视黄柏炮制后的使用，共有蜜制、酒制、盐制、炭制、乳汁制、童便制等多达14种炮制方法[3]。

1.2 现代炮制方法

根据《中国药典》2015版一部，黄柏饮片炮制方法为“除去杂质，喷淋清水，润透，切丝，干燥”。除了黄柏丝，《中国药典》还记载盐黄柏及黄柏炭两种炮制品[4]。而目前对黄柏炮制方法的研究多集中在盐黄柏、酒黄柏、蜜黄柏等炮制品上。祁东利[5]以小檗碱与小檗红碱为标准指标，通过正交设计选出盐黄柏最佳炮制方法为“每100 g黄柏加入盐2 g，闷润1 hr，在150℃～160 ℃下炒8 min”。雷雪霏[6]认为蜜黄柏最佳炮制工艺为“每100 kg黄柏加蜜30 kg润透，在120 ℃～130 ℃下炒4 min”。罗婷等[7]认为黄柏炭的最佳炮制方法是“200 ℃下炮制12～17 min”。相比传统的黄柏炮制方法，目前黄柏标准炮制方法较为单一，酒制、清炒制、蜜制等方法并未进入药典记载，也缺乏炮制工艺与测定标准。因此，在黄柏的具体炮制方法选取与标准规范方面仍需进一步研究。

2 黄柏的化学成分及不同炮制品成分差异

2.1 生物碱类

生物碱被认为是黄柏的主要有效化学成分，包括原小檗碱型生物碱如小檗碱、黄柏碱、巴马汀、药根碱等；阿朴菲型生物碱如木兰花碱、氧化木兰花碱、蝙蝠葛任碱等；苯代异喹啉生物碱如异莲心碱等[8-9]。而经过炮制后，黄柏中的小檗碱受热分解产生小檗红碱[10]。小檗碱与黄柏碱是黄柏药材质量测定的指标成分，刘英波等[11]使用HPLC方法对黄柏不同炮制品小檗碱与黄柏碱含量进行测定发现，三种炮制品种小檗碱含量分别为盐黄柏>黄柏丝>黄柏炭；黄柏碱含量分别为盐黄柏=黄柏丝>黄柏炭。史黎萍等[12]通过HPLC法测定在160 ℃炮制下不同黄柏炮制品主要生物碱含量，发现与黄柏丝相比，盐黄柏各生物碱及总生物碱含量皆增加，黄柏炭则明显减少。这说明黄柏在经盐炮制后有利于其生物碱成分溶出。

2.2 柠檬苦素类

黄柏内酯、黄柏酮是常见的黄柏柠檬苦素类化合物，此外还发现石虎柠檬素A等成分[13]。刘蓬蓬等[14]使用高效液相色谱法测定黄柏丝与盐黄柏中柠檬苦素类化合物含量，发现在160 ℃炮制下盐黄柏与黄柏丝相比，其黄柏内酯、黄柏桐含量均减少。苏慧等[10]通过HPLC方法对黄柏丝与黄柏炭特征图谱比较发现：黄柏丝与黄柏炭黄柏内酯峰面积比值为1∶1，而黄柏酮未检出。这说明炮制会对黄柏柠檬苦素类成分含量造成明显影响。

2.3 酚酸类

通过对黄柏醇化物非生物碱部分进行分离鉴定，发现黄柏中含有绿原酸、(-)-3-O阿魏酰奎宁酸甲酯、(-)-4-O-阿魏酰奎宁酸甲酯、(-)-绿原酸甲酯、(-)-5-O-阿魏酰奎宁酸甲酯、阿魏酸甲酯[15]等酚酸类化合物。吴琦等[16]通过HPLC指纹图谱对比黄柏丝与盐黄柏的化学成分发现，盐黄柏中绿原酸含量较黄柏丝低。李利新等[17]利用RPLC/Q-TOF-MS 技术对黄柏丝及黄柏炭进行含量测定分析，发现黄柏炭中绿原酸、5(或4)-O-阿魏酰奎宁酸甲酯含量较黄柏丝明显降低。这说明经盐炮制及炭化后黄柏中主要酚酸类化合物含量降低。

2.4 其他成分

黄柏还含有黄柏苷、异黄柏苷、槲皮素[18]、双氢山柰酚、黄柏新苷A等黄酮类化合物[19]；β-豆甾醇、-脱氢豆甾醇和β-谷甾醇等甾醇类化合物；β-榄香烯、香芹酮、柠檬烯等挥发油类[18]；反亚油酸、亚油酸、油酸、棕榈酸等脂肪酸类[20]；多糖类[21]；(6S)-去氢催吐萝芙木醇、(6R，7aR)-地芰普内酯[15]等。对于黄柏丝、盐黄柏及黄柏炭关于上述成分的含量差异，目前仍然缺乏相关研究。黄柏不同炮制品的主要化学成分变化见表1。

表1 黄柏不同炮制品的主要化学成分变化情况

3 黄柏不同炮制品的药理作用

3.1 抗炎作用

小檗碱作为黄柏的主要生物碱成分，被研究证明具有抑菌、抗炎等药理活性。通过不同成分的黄柏提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀及鸡蛋清致大鼠足趾肿胀的影响试验发现，川黄柏各成分提取物均具有抗炎作用，但其中生物碱部位抗炎作用最为明显[22]。而黄柏不同炮制品中均含有生物碱成分，且小檗碱与炮制后产生的小檗红碱皆可通过降低磷化ERK/JNK蛋白表达水平而产生抗炎作用[6]，故黄柏丝、盐黄柏及黄柏炭皆具有抗炎的药理作用。南云生等[23]通过黄柏对巴豆油致小鼠耳廓肿胀模型抗炎作用发现，黄柏丝对肿胀抑制率为48.32%，盐黄柏为13.33%，黄柏炭为10.06%，说明黄柏不同炮制品抗炎作用差距明显。

3.2 抑菌作用

体外抑菌评价抑制活性试验证明，川黄柏提取物对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌皆具有抑制作用，且其能够破坏生物膜后渗透入内部，从而对细菌起到抑制和杀灭作用[24]。高洁等[25]通过体外抑制生长实验比较发现，黄柏对大肠埃希菌、金葡菌及沙门氏菌具有较明显的抑制作用。郭明星等[26]在黄柏不同炮制品的抑菌作用研究中发现，盐黄柏对金黄色葡萄球菌及白喉杆菌的抑制作用均优于黄柏丝，符合盐黄柏与黄柏丝主要生物碱含量差异。

3.3 止血作用

黄柏丝、盐黄柏不具备止血的药理作用，而中医理论认为黄柏炒炭后具有收涩止血之功用，可用于便血、崩漏下血等证的治疗。刘晓曼[27]通过小鼠断尾出血模型测定黄柏炭的止血活性，发现黄柏丝无止血效果，而黄柏炭则具有明显的止血作用。将黄柏炭中具有止血活性的新成分命名为黄柏炭碳点(PCC-CDs)，其可能通过促血小板凝聚、提升PAI-1含量抑制纤溶系统而发挥止血作用。

3.4 代谢抑制作用

黄柏可通过调节cAMP-AVP对改善甲亢模型大鼠甲状腺及肾上腺皮质功能皆有作用，而其中改善程度为盐黄柏优于黄柏丝[28]。黄柏丝与盐黄柏可降低大鼠糖酵解及糖分解代谢，分解代谢受到抑制，减少了能量的消耗，产热降低，盐黄柏作用同样优于黄柏丝。而代谢抑制的活性也被认为是黄柏滋阴功用的物质基础，说明经盐炮制后黄柏滋阴功用加强[29]。

3.5 抗氧化作用

研究发现黄柏多糖还原能力较显著，黄柏多糖浓度在4 mg/L时对ABTS+清除能力最强，证明了黄柏的抗氧化活性[30]。孔令东[31]通过肝匀浆脂质过氧化反应方法测定黄柏不同炮制品抗氧化作用发现，盐黄柏抗氧化作用明显低于黄柏丝，黄柏炭则不具备抗氧化作用。

3.6 其他作用

黄柏还具有降血糖、降血脂、降血压[32-33]、抗癌[34-35]、保护肝肾细胞[36-37]、降尿酸、抗心衰、改善血管内皮损伤[38]、保护神经[39]等药理作用。据其药理活性，在现代运用中，黄柏可用于急性肾炎、尿路感染等泌尿系统疾病，糖尿病、甲亢等内分泌疾病，以及溃疡性结肠炎等消化系统疾病的治疗[40]，应用范围广泛，运用前景良好。目前对于上述药理作用在黄柏不同炮制品之间的具体差异，仍缺乏相应研究。

4 讨论

黄柏炮制方法历来多种多样，医者多会根据临床使用的需要而选取不同的辅料和方法对其加以炮制。现今对于黄柏的炮制方法研究，多集中与盐黄柏、酒黄柏、蜜黄柏等不同的炮制品，而《中国药典》明确记载的黄柏炮制品只有黄柏丝、盐黄柏与黄柏炭三种，且其中盐黄柏与黄柏炭仍然缺乏相应炮制工艺标准及含量测定标准。

目前对于黄柏的主要化学成分研究已较为完善，其含有生物碱类、柠檬苦素类、酚酸类、黄酮类等成分。而在不同炮制方法下，黄柏含有的化学成分会出现明显的成分和含量改变。盐黄柏与黄柏丝成分数量变化不明显，黄柏炭中化学成分则明显减少。以主要生物碱成分作为标准，目前多认为盐黄柏生物碱含量高于黄柏丝，而黄柏炭则生物碱含量明显低于黄柏丝，说明经盐炮制有利于黄柏中生物碱的溶出。

除了生物碱部分，目前对黄柏中其他成分(柠檬苦素类、酚酸类等)在不同炮制品下含量差异的研究极少，且对于《中国药典》中明确记载的炮制品黄柏炭的化学成分的研究也十分缺乏，今后应加强该方面的研究。

在药理作用方面，黄柏具有抗炎、抑菌、代谢抑制、抗氧化等作用。经炮制后，黄柏炭还具有明显的止血作用。在抗炎抑菌作用上，其生物碱部分被认为是药理活性的主要物质基础。而在不同实验中，发现黄柏丝抗炎作用优于盐黄柏，而盐黄柏抑菌作用优于黄柏丝，黄柏炭则作用最差，说明不同炮制品抗炎抑菌作用差距明显。在代谢抑制作用上，盐黄柏明显优于黄柏丝，这被认为是盐黄柏经炮制后滋阴作用加强的主要依据。而黄柏炭除了止血作用以外，其他药理作用的研究仍然十分缺乏。

5 结语

黄柏作为中药饮片，不论在祖国医学辨证论治的使用中，还是在通过现代医学手段对其有效化学成分提取后的运用中，都拥有极大的前景。本文通过对黄柏的炮制方法、化学成分、药理作用，以及炮制方法对化学成分及药理作用的影响研究进行文献综述，发现目前对于黄柏的研究重点在其主要有效化学成分(生物碱类)及药理作用的相关研究方面，而对其他化学成分的研究，以及炮制后化学成分含量和药理作用变化的相关研究仍然有所欠缺，特别是对于黄柏炭的研究更需深入。而目前黄柏炮制方法也较为单一，缺乏相应的炮制和检验标准。因此，今后需加强和完善对各炮制品的化学成分与药理作用的研究，为黄柏的科学炮制与临床合理运用提供科学的理论依据。