复方地氯咽炎喷雾剂的制备与质量评价

咽炎是临床上常见疾病之一，易反复发作，传统疗法主要为抗生素治疗，近年来国外报道[1]，加用激素治疗可取得良好疗效。空军总医院以地塞米松磷酸钠和醋酸氯己定为主药，甘草酸二铵和薄荷脑为辅料制备了复方地氯咽炎喷雾剂。其中地塞米松磷酸钠具有抗炎抗过敏的功效，对急性咽炎引起的发热作用有显著的疗效[2]。醋酸氯己定具有较强的抗炎杀菌作用，甘草酸二铵具有较强的抗炎以及镇咳作用，可保护咽部及支气管黏膜免受刺激，作用于喉部末梢神经以减弱咳嗽，从而达到止咳效果，而且其中含甘草甜素可以达到矫味的目的。薄荷脑为纯中药提取物，具有清热止痛、消肿消炎、防腐生肌、清咽润喉之功效。另外，喷雾装置可使药物借助一定的装置从容器中喷出，直接达到黏膜或病变部位避免首过效应，减少药物不良反应，有很好的应用前景。现将其制备及质量控制方法报道如下。

1 仪器与试药

PB－10型精密pH计（北京赛多利斯科学仪器有限公司）；85－2A型双数显磁力加热搅拌器（江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司）；BS1101型电子天平sop（北京赛多利斯天平有限公司）；喷雾装置（万通定量法系统有限公司）；岛津DGU－20A3型全自动高效液相色谱仪（CBM－20A检测器、SIL－20A自动进样器和LC－Solution化学工作站）。地塞米松磷酸钠对照品（天津天药药业股份有限公司，批号为DNa091002）；醋酸氯己定对照品（锦州九泰药业有限公司，批号为090709）；吐温－80（北京益利精细化学品有限公司）；聚乙二醇－12－羟基硬脂酸酯（北京凤仪精求商贸有限责任公司）；复方地氯咽炎喷雾剂（空军总医院制剂研究室自制，批号为100701）；乙腈、三乙胺为色谱纯，水为双蒸水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 处方与制备

处方：醋酸氯己定，地塞米松磷酸钠，甘草酸二铵，薄荷脑，吐温－80，聚乙二醇－12－羟基硬脂酸酯。

制备：将处方量的薄荷脑用吐温－80和聚乙二醇－12－羟基硬脂酸酯溶解，并加蒸馏水至300mL，加入处方量的醋酸氯己定、地塞米松磷酸钠以及甘草酸二铵搅拌至溶解，用1 000mL的量筒定容至刻度，混合均匀，超声，得无色透明溶液，过滤灌装，即可。

2.2 检查

本制剂性状为澄清、透明无色、流动性极好的液体，具有薄荷清凉味，味微苦。相对密度为0.96。3批样品pH平均值为5.5。微生物限度检查[3]未检出活螨，未检出大肠杆菌；每毫升细菌总数未超过100个，霉菌未超过100个。喷射速率、喷射总量均符合2010年版《中国药典（一部）》附录喷雾剂项下有关的各项规定。依据本品的总剂量（25mL）和每次用药量（两主药质量浓度均为1 g/L），总喷数应大于200次。取本品4瓶，除去帽盖，分别挤压阀门连续喷射于1 000mL锥形瓶中，直至喷尽为止，分别计算喷射次数。经检查，3批样品（批号为20100705，20100706，20100707）每瓶总喷数的均值分别为205，209，203。其他条件检查均符合2010年版《中国药典（二部）》附录喷雾剂项下有关的各项规定。

2.3 鉴别

物理性状：取本品5mL，置试管中，用力振摇1min，产生持久性泡沫，放置5min，泡沫消失。

最大吸收波长鉴别：分别称取醋酸氯己定和地塞米松磷酸钠各5 mg，置100 mL量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度，制成每1mL约含50μg的醋酸氯已定和地塞米松磷酸钠溶液，照2010年版《中国药典（二部）》附录Ⅵ分光光度法测定，地塞米松磷酸钠在240 nm波长处有最大吸收，醋酸氯己定在260 nm处有最大吸收。

色谱鉴别：样品含量测定项下记录的色谱图，供试品溶液的主峰的保留时间与对照品溶液的主峰的保留时间一致。

2.4 每喷喷量测定

取样品3瓶，分别试喷数次后，擦净，精密称定，再连续喷射3次，每次喷射后均擦净，精密称定，计算每次喷量，连续喷射10次，擦净，精密称定，再按上述方法测定3次喷量，继续连续喷射10次后，按上述方法再测定4次喷量，计算每瓶10次喷量的平均值。结果样品的每喷喷量为100μL，根据每喷主药含量均为标示含量的80％～120％，每喷两主药含量均约为0.1mg。

2.5 含量测定

2.5.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：Diamonsil C18柱（150 mm×4.6 mm，5μm）；流动相：0.01 mol/L磷酸溶液（用三乙胺调pH至2.8）－乙腈（32∶68），柱温：30℃；检测波长：250 nm；进样量：20μL。保留时间醋酸氯己定为3.3min，地塞米松磷酸钠为4.7min，两者分离度大于1.5。色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

2.5.2 溶液制备

分别精确称取地塞米松钠磷酸钠、醋酸氯己定的原料药各5.00mg，置100 mL容量瓶中，加甲醇－水溶解并稀释至刻度，配置成质量浓度为50μg/mL的地塞米松磷酸钠、醋酸氯己定的对照品贮备液。精密量取两对照品贮备液1 mL，置10mL容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，配制成含地塞米松磷酸钠和醋酸氯己定均为50μg/mL对照品溶液。精密量取同一批号的样品1 mL，置10 mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，配制成质量浓度为100μg/mL的供试品溶液。

2.5.3 方法学考察

线性关系考察：分别精密量取两对照品贮备液0.2，0.4，1.0，1.5，2.0，3.0，4.0mL，置10 mL的容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，配制成含地塞米松磷酸钠和醋酸氯己定均为10.0，20.0，50.0，75.0，100，150，200μg/mL系列标准的溶液，依法进样，记录相应峰面积值。以样品质量浓度（C）对峰面积（A）回归，得地塞米松磷酸钠、醋酸氯己定的回归方程分别为 A=4.38× 104C+1.80×104（r=0.999 5）和 A=2.40×104C+1.08×104（r=0.999 6）。结果表明，地塞米松磷酸钠和醋酸氯己定进样质量浓度线性范围均是10～200μg/mL。

精密度试验：分别精密吸取同一对照品溶液，连续进样6次，依法测定。结果地塞米松磷酸钠和醋酸氯己定峰面积的 RSD分别为0.89％和1.22％（n=6），表明仪器精密度良好。

重现性试验：取同一批号的样品适量，依法制备供试品溶液并测定。结果地塞米松磷酸钠和醋酸氯己定含量的 RSD分别为1.10％和0.90％（n=6），表明方法重现性良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，在室温下避光放置，分别于0，1，2，4，8，12h时依法测定。结果两主药峰面积的 RSD分别为0.80％和0.90％（n=6），表明供试品溶液在12h内稳定。

加样回收试验：精密量取同一批样品0.5 mL共9份，分别置10 mL的容量瓶中，均分为3组，各组分别精密加入质量浓度为50μg/mL的地塞米松磷酸钠、醋酸氯己定的对照品贮备液0.8，1.0，1.2mL，用流动相稀释至刻度，依法测定并计算回收率。结果见表1。

表1 加样回收试验结果（n=9）

2.5.4 样品含量测定

取3批样品，依法制备供试品溶液，并与对照品溶液分别进样20μL，记录峰面积，用外标法计算含量。结果见表2。

表2 样品含量测定结果（％，n=3）

3 讨论

与传统含漱片和润喉片比较，本制剂克服了药物不宜达到咽喉壁与扁桃体的不足之处，且具有吸收快、生物利用度高、生产成本相对低廉可精确定量等优点，故本研究选喷雾剂作为给药剂型。处方中的地塞米松磷酸钠和醋酸氯己定是抗炎抑菌成分，故把两者作为咽喉消炎喷雾剂的含量指标，以保证主药的投料量及产品质量与疗效。

因口腔喷雾剂给药体积不能太大，需要提高浓度来减小喷量、次数。本制剂以一定量的吐温－80作增溶剂，以增加制剂的溶解度。吐温－80最常用，口服安全。根据辅料用量以满足制剂要求的最低使用量原则以及口感和乳光现象的问题，最终确立用吐温－80和聚乙二醇－12－羟基硬脂酸酯两种增溶剂共同增溶，能得到澄清透明的溶液。

根据文献[4]，将甲醇与水的比例调为62∶38，但地塞米松磷酸钠和氯己定的出峰时间接近，分离效果不理想。最后结合文献[5]，调节流动相为0.01mol/L磷酸溶液－乙腈（32∶68），并加三乙胺调pH至2.8（为提高柱子的耐受性），两主药能完全分开，且辅料对其测定无干扰。此条件可用于测定复方咽炎喷雾剂中两主药的含量。

[1]Mary－Lynn，Bonsu B，Kathryn EN，et al.A pilot study of lversus 3 Days of dexamethasoneas add－ontherapy in children with streptococcal pharyngitis[J].Pediatr Infect Dis，2006，25（6）：477－481.

[2]余洁红.布地奈德雾化吸入治疗小儿急性喉炎[J].中国妇幼保健，2005，20（3）：341－342.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2010：附录79.

[4]Ali T，Sedat Y，Hakan T，et al.Clinical efficacy of dexamethasone for acute exudative pharyngitis[J].Emerg Med，2008，35（4）：363－367.

[5]沈国荣.HPLC法测定复方麻黄碱滴鼻剂中成分的含量[J].中国药学杂志，2006，26（11）：1 637.