应用蚕豆根尖微核试验测定维生素C的抑突变性

季守莲，宋正蕊，夏自然

（大理学院公共卫生学院，云南大理 671000）

应用蚕豆根尖微核试验测定维生素C的抑突变性

季守莲，宋正蕊，夏自然

（大理学院公共卫生学院，云南大理 671000）

目的：了解水果蔬菜中维生素C的抑突变性。方法：应用荧光法测定水果、蔬菜中维生素C的含量，蚕豆根尖微核技术检验维生素C的抑突变性。结果：9种水果蔬菜的维生素C含量为（39.19±29.65）mg/100 g，蚕豆根尖微核率（MCN‰）与阳性对照比较均有统计学意义（P＜0.05）。结论：水果、蔬菜中的维生素C对诱变中的蚕豆根尖细胞有一定的抑突变性，且抑制细胞突变与水果、蔬菜中维生素C的含量有剂量—效应关系。维生素C越高，抑突变的效应越明显。

蚕豆；微核试验；荧光法；维生素C；抑突变性

维生素C又称L-抗坏血酸，是人体需要量最大的水溶性维生素，据有关调查结果显示，人体每天摄入足够的维生素C，可以减少癌症的发生概率〔1〕。维生素C主要来源于新鲜蔬菜、水果，维生素C是维持机体生命活动过程所必需的低分子有机化合物，它具有抗氧化作用，能提高机体免疫力，有助于铁的吸收，抗肿瘤等功能〔2〕。为了解大理市部分时鲜水果蔬菜中维生素C的含量与抗突变关系，用荧光法测定其维生素C的含量，并结合蚕豆根尖微核试验进行维生素C抗突变关系研究。

1 材料与方法

1.1 试验材料 大理市凤仪镇产蚕豆〔3〕、维生素C含量高的9种本地市售时鲜水果、蔬菜（冰糖橙、草莓、美国脐橙、小番茄、大番茄、小白菜、青柠檬、红蛇、水晶红富士）。

1.2 蚕豆根尖微核试验

1.2.1 样品液配制 在样品组中分别加入捣碎后浸出的水果、蔬菜原汁和2μg/m L的环磷酰胺各7 m L，阳性组为2μg/m L的环磷酰胺15 m L，阴性组为15 m L的蒸馏水。

1.2.2 微核试验 按常规方法进行蚕豆根尖微核试验。浸种，催芽，用各类样品液处理根尖5 h，按常规方法对蚕豆根尖细胞固定、染色、制片镜检。每个组观察3个根尖，每个根尖观察1 000个细胞，计算微核千分率（MCN‰），并用SPSS统计软件进行统计学处理。

1.3 维生素C含量测定 使用960型荧光分光光度计〔4〕，标准曲线法测定各类水果、蔬菜的维生素C含量，得出直线方程：Y=0.842 7X-0.008 1，r=0.995 3。

2 结果

大理市部分蔬菜水果维生素C含量及微核测定结果。见表1。

表1 9种水果蔬菜维生素C含量及微核测定结果

3 讨论

对试验结果进行t检验，表明各组样本的微核千分率与阳性对照组相比差异具有统计学意义，P＜0.05。水果、蔬菜中的维生素C确实具有抑制细胞突变的性能，各样品组压片后镜检观察到少数细胞的染色体分裂后期有断片、桥的情况，特别是阳性对照组根尖细胞后期异常比较明显，上述情况在维生素C含量较高组被观察到的细胞相比维生素C含量低的样品组少，由此也可证明维生素C对细胞染色体畸变的抑制性。在细胞早期出现断片、桥的情况比细胞分裂后期少。有关资料表明：诱变剂对蚕豆根尖细胞的遗传损伤发生较早，在后期仅出现异常和微核而已。因此，防止细胞染色体畸变应从早期开始、早期监测，以便采取相应措施预防和减少诱变物对机体细胞的危害〔5〕。

维生素C的含量与微核千分率成负相关（-0.927），即维生素C含量越高，微核千分率就越小，抑突变性就越大。大量摄入维生素C，可以制造大量免疫球蛋白，可以使抗癌的淋巴细胞高效率地发挥作用〔6〕。

蚕豆根尖微核技术是全球公认的环境致突变性检测技术，也被公认为筛选致突变物的主要方法之一。1982年Degrssi和Rizzoni应用蚕豆根尖微核技术，从此蚕豆根尖微核技术正式形成，成为目前研究和运用较多的拟代替动物培养细胞检测环境“致癌、致畸、致突变”物质的高等植物细胞检测体系〔7-8〕。

4 建议

各方面的研究表明：维生素C主要食物来源为蔬菜与水果，如青菜、韭菜、塌棵菜、菠菜，柿子椒等深色蔬菜和花菜，以及草莓、柑桔、苹果、柚子等水果含维生素C量均较高。野生的苋菜、苜蓿、刺梨、猕猴桃、酸枣等含量尤其丰富〔9〕。所以，人们多吃新鲜的水果、蔬菜，可预防癌症，降低癌症的发生概率。对癌症的高发人群实行定期服用足够的维生素C，定期监测使用维生素C的情况。

常言道：药补不如食补。随着科技的发展，现在一年四季均有新鲜蔬菜、水果出售，人们摄入维生素C的机会较多，并且随着人们生活水平的提高及对健康认识的提高，新鲜蔬菜、水果的摄入量增加，维生素C的摄入也随之增加，这对提高机体的免疫力，抗癌（抗突变）有较大的促进作用。

〔1〕曾益新.肿瘤学〔M〕.北京：人民卫生出版社，2003：1-7.

〔2〕吴坤，孙秀发.营养与食品卫生学〔M〕.北京：人民卫生出版社，2004：81-84.

〔3〕季守莲，宋正蕊，杨廷仕，等.应用两种大理州蚕豆作微核实验材料的筛选〔J〕.癌变·畸变·突变，2004，16（1）：52-53.

〔4〕GB 12392-90，蔬菜、水果及其制品中对抗坏血酸的测定方法（荧光法和2.4—二硝基苯肼法）〔S〕.

〔5〕GrantW F.Higher plantassays for the detection of chromo so mal aberrations and genemutations-a brief historical background on their use for screening and monitoring environmental chemicals〔J〕.Mutat Res，1999，426：107-112.

〔6〕郭芳彬.蜂王浆对免疫系统的作用〔J〕.养蜂科技，1999，30（1）：30-31.

〔7〕马志敏，杨雄波，季守莲，等.蚕豆根尖微核技术测定美洲大蠊提取物的抑突变性〔J〕.大理学院学报，2008，7（12）：25-27.

〔8〕季守莲，宋正蕊，刘晓莉，等.某地区各类饮用水及水源水致突变性研究〔J〕.实用预防医学，2005，3（12）：474-475.

〔9〕多力坤·买买提玉素甫.用微核试验研究小枣的抗突变作用〔J〕.生物技术，2008，18（6）：53-54.

（责任编辑 蒋 康）

Vicia F aba R oot T ip Micronucleus T est for the A nti-mutation E ffect of V itam in C

JIShoulian,SONG Zhengrui,XIA Ziran
（C ollege of Public Health,DaliUniversity,Dali,Yunnan 671000,China）

Objective：To investigate the anti-mutation effect of vitamin C in fruits and vegetables.MethodsThe content of vitamin C in fruits and vegetablesweremeasured by fluorescence array,anti-mutation effect of vitamin C were assessed bymicronucleus test in vicia faba root tip.ResultsThe content of vitamin C in nine kinds of fruits and vegetables was 39.19±29.65 mg/100g.There was statistic difference（P＜0.05）between each group and positive control group in micronucleus rate of vicia faba root tip.ConclusionThere was an anti-mutation effect of vitamin C from fruit and vegetables in suppression vicia faba root tip cellularmutation,and this anti-effectwould increase in a dose-dependentmanner.

vicia faba root tip；micronucleus test；fluorescence assay；vitamin C；anti-mutation effect

S643.6

A

1672-2345（2010）12-0023-02

2010-10-13

季守莲，高级实验师，主要从事卫生检验研究.