吕小满,彭 芳,杨永寿,刘光明,肖培云
(大理学院药学院,云南大理 671000)
玉簪抗炎作用的实验研究
吕小满,彭 芳,杨永寿,刘光明,肖培云*
(大理学院药学院,云南大理 671000)
目的:观察玉簪提取物的抗炎作用。方法:通过二甲苯致小鼠耳肿胀及冰醋酸致小鼠毛细血管扩张法观察玉簪提取物的抗炎作用。结果:研究表明6.6,13.2,26.4 g/kg玉簪提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀抑制作用分别为4.5%、34.4%、52.0%,对冰醋酸引起毛细血管通透性抑制作用为6.0%、31.3%、54.6%。结论:玉簪提取物具有显著的抗炎作用,有待进一步开发利用。
玉簪提取物;耳肿胀;通透性;抗炎作用
玉簪Hosta plantaginea(Lam.)Ascher为百合科植物,“甘辛,寒,有毒”,全株均可入药。花入药具有利湿、调经止带之功效,根入药可以清热消肿、解毒止痛,叶能解毒消肿〔1-5〕。研究表明,玉簪化学成分主要以甾体皂苷为主,另外还有黄酮、生物碱、脂肪酸等〔6〕。本文采用玉簪花地上部位提取物进行抗炎实验研究,以期为玉簪的进一步开发利用提供理论基础。
1.1 材料 氢化可的松(天津药业焦作有限公司产,规格:20 mL,100 mg,批号:20090630);阿司匹林(上海医药集团有限公司信谊制药总厂产,规格:25 mg,批号:20080508);冰醋酸(合肥工业大学化学试剂厂产,分析纯,批号:20000901);二甲苯(天津市科密欧化学试剂公司产,分析纯,批号:20060802);玉簪药材(2008年8月采集于大理云龙,经大理学院生药学教研室杨月娥老师鉴定)。
1.2 动物 Km种小鼠,体重(20±2)g,雌雄各30只,由重庆医科大学动物实验中心提供。
1.3 仪器 TU1901双光束紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司产)。
2.1 玉簪提取物制备 玉簪地上部分晒干,粉碎,过80目,70%乙醇中浸泡48 h,上清液用石油醚萃取,乙醇部分旋蒸,得浸膏,备用〔7〕。
2.2 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的方法 小鼠60只,雌雄各半,随机分成空白对照组(N.S),阿司匹林组,氢化可的松组,玉簪提取物低、中、高实验组,每组10只。实验组灌胃玉簪乙醇粗体物(33,66,132 mg/mL),空白对照组灌胃同容量的生理盐水,阳性对照组阿司匹林灌胃给药(200 mg/kg),皮下注射氢化可的松溶液(50 mg/kg),1 次/d,连续7 d。末次给药30min后,用移液器在小鼠右侧耳壳均匀涂抹二甲苯各10μL,左侧耳壳作对照,1 h后处死小鼠,以直径为8mm打孔器将小鼠双耳同部位等面积切下,电子天平称重,以右耳重量减去左耳重量的差值为肿胀值。以两耳片的重量之差作为肿胀度进行统计学检验,并计算肿胀抑制率〔8〕。
肿胀抑制率=(空白对照组-药物处理组)/空白对照组×100%
2.3 对毛细血管通透性影响的方法 小鼠60只,雌雄各半,随机分成空白对照组,阿司匹林组,氢化可的松组,玉簪提取物低、中、高实验组,每组10只。实验组灌胃玉簪乙醇粗体物(33,66,132 mg/mL),空白对照组灌胃给同容量的生理盐水,阳性对照组阿司匹林灌胃给药(200mg/kg),皮下注射氢化可的松溶液(50mg/kg),1 次/d,连续7 d。末次给药1 h后,每只腹腔注射0.6%醋酸0.1 mL/10 g及尾静脉1%注射伊文思蓝0.1mL/10 g,30min后处死,剪开腹腔,用5mL蒸馏水冲洗腹腔数次,取出洗液,离心1 000 r/min,取上清液于紫外可见分光光度计590 nm处测OD值〔9-11〕。
2.4 统计方法 所有结果均采用SPSS11.5软件进行方差分析,结果用x±s表示。
3.1 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响 低剂量玉簪提取物对二甲苯所致小鼠耳肿胀几乎没有抑制作用,抑制率仅为4.5%;中、高剂量组则具有显著的抑制作用,抑制率分别达到34.4%及52.0%,与空白对照组比较,有统计学意义,且具有剂量依赖性。见表1。3.2 对毛细血管通透性的影响 玉簪提取物高剂量组具有显著的抑制冰醋酸致小鼠毛细血管扩张作用,抑制作用为54.6%,中、低剂量组抑制作用较小,分别为31.3%、6.0%,但抑制作用具有剂量依赖性。见表2。
表1 受试物对小鼠耳肿胀度的影响(±s,n=10)
表1 受试物对小鼠耳肿胀度的影响(±s,n=10)
注:**与N.S组比较,P<0.01;*与N.S组比较,P<0.05。
组别N.S玉簪提取物阿司匹林氢化可的松剂量(g/kg)—6.6 13.2 26.4 0.2 0.05肿胀(mg/20 g)8.93±1.51 3.98±0.76 2.63±0.53*8.53±2.23**5.86±1.89**4.29±1.32**抑制率/%—4.5 34.4 52.0 55.1 70.5
表2 受试物对小鼠腹腔膜通透性影响
炎症是机体组织对局部损伤的反应。在炎症的早期,炎症介质刺激血管,使血管扩张,血管内皮间隙扩大,血管壁通透性增加,血浆内的液体、蛋白质和白细胞等渗出到组织间隙,随着渗出的增加,造成组织肿胀〔9〕。因此,炎性渗出、组织肿胀是炎症早期的重要指标。
二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验和醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验是研究药物抗炎作用的常用实验方法,二甲苯可引起耳廓急性炎症水肿,醋酸可引起小鼠腹腔毛细血管通透性增加〔11〕。经两种炎症模型的药效学研究表明,玉簪提取物能明显减轻二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀,显著抑制冰醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性增高,说明玉簪提取物对炎症早期血管通透性增高和水肿有明显的抑制作用。这些研究为玉簪清热解毒的功效提供了药理学依据,其抗炎机制有待进一步研究。
感谢甘平、陆丽、胡艳芬、郝芳芳、普小菲、梁程和邓里高在实验中给予的协助!
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(责任编辑 蒋 康)
An Experimental Study of the Anti-inflammatory Effects of Hosta plantaginea(Lam.)Ascher
LU Xiaoman,PENG Fang,YANG Yongshou,LIU Guangming,XIAO Peiyun*
(College of Pharmacy,Dali University,Dali,Yunnan 671000,China)
Objective:To observe anti-inflammatory effects of extracts fromHostaplantaginea(Lam.) Ascher.Methods:Using the test of Kunmingmouse ear swelling induced by dimethylbenzene and the test of capillary permeability induced by acetic acid,antiinflammatory effects of the extracts fromHostaplantagineawere evaluated.Results:Ear swelling and capillary permeability induced respectively by dimethylbenzene and acetic acid were inhibited by the effects of extracts fromHostaplantaginea.With doses of 6.6,13.2,and 26.4 g/kg,ear swelling inhibition ratios were respectively 4.5%,34.4%and 52.0%,and capillary permeability inhibition ratioswere 6.0%,31.3%and 54.6%.ConclusionExtracts fromHostaplantagineahad significantanti-inflammatory effects.
extracts fromHostaplantaginea;ear swelling;capillary permeability;anti-inflammatory effects
Q949.71+8.23
A
1672-2345(2010)12-0015-03
云南省教育厅基金资助项目(5Y0361C)
2010-03-02
吕小满,主要从事肿瘤药理研究.
*通信作者:肖培云,副教授,电话:15808729786.