小儿对乙酰氨基酚灌肠液质量标准研究

陈 滨 杨飞雪

黑龙江省哈尔滨市红十字中心医院药剂科（150076）

对乙酰氨基酚为苯胺类解热镇痛药[1]，具有良好的解热镇痛作用，临床用于发热头痛、风湿痛、神经痛等，其毒性低于非那西丁，且对NSAID过敏的哮喘患者和儿童也比较安全。对乙酰氨基酚的胃肠不良反应较少，近几年对其毒副作用的研究和新用途的研究在不断深入，穆兆英等[2]报道1例对乙酰氨基酚致胃出血病例；王士凡等[3]曾报道此药可引起血小板减少性紫癜，停药后患者恢复正常。此药物过量或长期服用可引起肝脏损害，严重者可致肝昏迷甚至死亡，所以使用时应注意[4]。市场上出现的解热镇痛药“小儿对乙酰氨基酚灌肠液”退热效果好，毒副作用小，避免口服所致的胃肠道不良反应，适合儿科患者使用，而该药的工艺简单清楚，含量测定准确，我们仿制的制剂所做的加速稳定性和长期稳定性试验结果都符合标准规定，仿制此药有理论依据和试验依据。高效液相色谱法对对乙酰氨基酚进行了定量分析，为该制剂质量标准的制定提供了方法和依据。一些对乙酰氨基酚高效液相色谱法的质量标准控制方法的参考，如下：

色谱条件一[5]：色谱柱：ZORBAX SB2C18（416mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇-水（10∶90）；流速：1.0mL/min；检测波长：249nm；进样量为20μL；理论板数按对乙酰氨基酚峰计算应不低于3000。

色谱条件二[6]：以Kromasil-C18柱（150mm×416mm，5μm），乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-三乙胺（10∶90∶0.12）为流动相，流速1.0mL/min，检测波长222nm。

色谱条件三[7]：色谱柱为C18柱（150mm×4.6mm，5µm），流动相为甲醇-水（73∶27），检测波长为264nm。

1 材料与仪器

1.1 药品

对照品：对乙酰氨基酚（C8H9NO2）（110754-200219）购于中国药品生物制检定所。供试品为黑龙江省医药工业研究所分析室制备（批号20061201）。

1.2 试剂

甲醇：色谱纯；醋酸溶液：分析纯；水为重蒸水，用前经0.45μm微孔滤膜滤过。

1.3 仪器

美国PE200-235高效液相色谱仪（三维紫外检测器、TC4色谱工作站）；色谱柱：YMC- C18色谱柱（150×4.6mm，5μm）；AS3120超声仪（Autoscience）；AEU-201电子分析天平（日本岛津）。

2 方法与结果

2.1 处方

对乙酰氨基酚100g，偏重亚硫酸钠1g，苯甲醇20mL，丙二醇适量，水适量，全量1000mL。

2.2 含量测定方法学考查

照高效液相色谱法（中国药典2005年版二部附录ⅤD）测定。

2.2.1 对照品来源及纯度

对乙酰氨基酚（C8H9NO2）（110754-200219）对照品购于中国药品生物制检定所。含量测定：取105℃干燥到恒重的对照品，进样测定，对乙酰氨基酚含量为98.83%。

2.2.2 色谱条件与系统适用性试验

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.75%醋酸溶液（25∶75）为流动相；检测波长为250nm。理论板数按对乙酰氨基酚计算应不低于1500，对乙酰氨基酚峰与对氨基酚峰的分离度应符合要求。

2.2.3 测定法

取本品适量，加流动相稀释制成每1mL中含0.15mg的溶液，作为供试品溶液；另取对乙酰氨基酚对照品适量，加流动相稀释制成每1mL中含0.15mg的溶液，作为对照品溶液，分别量取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。

2.2.4 线性考查试验

标准曲线：精密称取对照品6.0mg，加流动相制成每1mL含0.2mg的溶液，分别精密吸取2.0、4.0、6.0、8.0、10、12μL的对照品溶液，注入液相色谱中，记录测定峰面积，其结果见表1。

表1 标准曲线测定结果

以对照品浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，见图1。

图1 回归方程：Y=5E+06x-14470，相关系数：R=0.9999，对乙酰氨基酚（C8H9NO2）在0.4～2.4μg范围内线性良好

2.2.5 供试品稳定性试验

按拟定含量测定方法配制供试品，间隔时间进样，考察其含量有无变化，结果见表2。

表2 稳定性试验结果

试验表明，供试品溶液24h内含量无明显变化，在24h内稳定。

2.2.6 精密度试验

取配制好的样品溶液，连续5次等量注入同台液相色谱仪中进行测定，考察其精密度，结果见表3。

表3 精密度试验结果

由表3可见，其精密度良好。

2.2.7 加样回收试验

对乙酰氨基酚回收率试验：取已知对乙酰氨基酚含量的样品（0.0918mg/mL）分别加入已知含量的高、中、低三组对照品，按正文规定含量测定方法进行制备供试样，各进样10μL测定，计算回收率，其结果见表4

表4 回收率测定结果

2.2.8 本仿制药和市售药品含量对比测定结果

三批样品和市售药品含量对比测定数据，见表5。

表5 含量检查结果

3 结 论

3.1 本实验建立了一种小儿乙酰氨基酚灌肠液中对乙酰氨基酚的质量标准控制方法。

3.2 小儿乙酰氨基酚灌肠液和市售药品做质量对比试验，结果是小儿乙酰氨基酚灌肠液和市售药品含量均合格。

3.3 用高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚的含量，高效液相色谱法测定小儿对乙酰氨基酚灌肠液的方法考查了样品的稳定性，对照品的线性，测定仪器的精密度，可以保证本高效液相色谱法的准确。

4 讨 论

4.1 小儿对乙酰氨基酚灌肠液是仿制药物，主要成分是对乙酰氨基酚，本实验建立了高效液相色谱法对乙酰氨基酚的含量测定，并按注册管理法规定完成了市售药品做质量对比试验。在该药和市售药品质量对比试验中，严格按照注册管理法规定进行实验，现象显著，表明该药品质量上符合市售药品规定。

4.2 含量测定方法的建立

4.2.1 检测波长的选择

取对照品溶液，用紫外可见分光光度计在200～400nm波长范围内进行扫描，寻找最大吸收波长为250nm，所以选择测定波长为250nm。

4.2.2 流动相的选择

参照2005版药典一部和参考资料中的含量测定方法，用流动相为甲醇和0.75%冰醋酸水溶液（25∶75），方法重复性高，峰形及保留时间适宜。采用高效液相色谱法测定了对乙酰氨基酚的含量，结果显示含量达到标示量，本文探讨了对乙酰氨基酚在0.4～2.4μg的线性关系，结果是线性关系良好，以250nm 为测定波长，准确性和精密度好，操作简便，色谱峰分离优良，回收率高。

4.3 小儿对乙酰氨基酚灌肠液的前景

市场上出现的解热镇痛药“小儿对乙酰氨基酚灌肠液”反应很好，其退热效果好，毒副作用小，药物以分子形式分散，药液通过直肠黏膜吸收，起效快，维持疗效时间长，可避免口服所致的胃肠道不良反应；减轻了对肝脏的毒副作用，很适合儿科患者使用，而该药的工艺简单清楚，含量测定准确[8,9]。现今，我国扑热息痛制剂产品与国外产品相比，在质量、规格、品种及品牌等方面都有一定差距，价格也相差很多。我国企业应抓住OTC药将快速普及的机遇，努力开发附加值高的新剂型和“叫得响”的品牌产品，以满足不同层次的用药需求，提高经济效益。

[1] 郑虎.药物化学[M] .5版.北京：人民卫生出版社,2004.

[2] 穆兆英,王秋华.对乙酰氨基酚致胃出血1例[J] .小儿急救医学,2002,9(1)：64.

[3] 王士凡,王功立,孙定人,等.药物不良反应[M] .2版.北京：人民卫生出版社,1999.

[4] 金惠萍,李中东,焦正.对乙酰氨基酚的不良反应与合理应用[J] .药物不良反应杂志,2004,6(1)：27-31.

[5] 李嘉,邓治旭,张克力,等.感冒灵胶囊质量标准研究[J] .中国实验方剂学杂志,2006,12(5)：9-11.

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[7] 宋新康,廖富林.高效液相色谱法测定氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚含量[J] .中华临床医药杂志(北京),2004,5(22)：15-16.

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[9] Shayiq RM.Repeat exposure to incremental doses of acetam inophen procides protection against acetam inophen-induced lethality in mice：an explanation for high acetam inophen dosage in humans without hepatic injuey[J] .Hepatology,1999,29(2)：451-463.