家兔胆囊炎模型腹部循胆经高温反应与NE、5-HT、E含量变化的观察*

2010-09-12 03:33:08罗明富马惠敏王淑友
中国中医基础医学杂志 2010年10期
关键词:胆经体表造模

罗明富,郭 莹,张 栋,马惠敏,王淑友

(中国中医科学院 针灸研究所,北京 100700)

研究证明,循经高温现象(红外辐射轨迹)是经络生物物理特性的一个显著特征,是反映经穴生理或病理现象较客观的指标之一[1]。已有实验证明,兔胆囊炎模型可在腹部沿胆经出现高温反应现象。去甲肾上腺素(NE)、E(肾上腺素)和5-羟色胺(5-HT)对组织物质能量代谢有调控作用。目前,对NE、5-HT、E在循胆经高温反应组织内的变化还缺乏了解。故本实验以兔胆囊炎模型为基础,观察NE、E、5-HT与循胆经高温反应的相关性。

1 材料与方法

1.1 动物与分组

清洁级日本大耳白家兔14只,体重1.5kg~2.5kg,雌雄各半,由中国医学科学院实验动物中心提供。饲养1周后,随机分为对照组6只,胆囊炎模型组(简称模型组)8只。

1.2 主要仪器与试剂

AGA-782型红外热像仪系统(AGA公司产),AH-2型高级显微镜(OLYMPUS),酶联免疫试剂盒(北京华英生物技术研究所),STAT FAX 2100全自动酶标仪。

1.3 模型制作

按照张栋等报道的胆囊炎模型制作方法造模[2],术后家兔自由饮食。对照组除不做手术外,其他处理均与模型组相同。

1.4 红外热像观测方法

造模后,饲养动物 11d,期间分 3d、7d、11d 3个时段沿胆经腹段,采用红外热像仪系统做体表热像图观察和记录,并用标记笔标记出高温线的具体位置。

1.5 检测指标

红外热像观察结束后麻醉动物,在左右腹侧沿胆经的位置,迅速切取模型组的循经高温反应部位和对照组相应部位的皮下组织(0.5g/只)进行匀浆,12000 rpm离心5 min离心处理后取上清液,采用酶联免疫技术对上清液内的 NE、E、5-HT进行检测。

1.6 统计学分析

用SPPS 11.5统计软件分析,数据采用均数±标准差(±s)表示,组间采用单因素方差分析,以t检验对实验数据进行显著性分析。

2 结果

2.1 红外热像检测

体表红外热像检测结果显示模型组在造模后的第3、7、11天,约70%的动物在左右腹侧沿胆经的位置出现长短不一的循经温度变化带或区,与对照组或造模前比较循经高温反应一般随天数的增加而增加,特别在第7天和11天后,循经高温反应则逐渐明显。这些循经高温反应的带或区,其走行与胆经相近,出现率右侧腹部(患部)多于左腹部侧(对侧),而对照组相应部位的温度变化则不明显(图1A~D)。结果显示模型组的循经高温反应均比造模前或对照组的循经温度升高约0.5℃ ~1.4℃。

2.2 胆囊炎模型两侧腹部循胆经组织内NE、E和5-HT的检测

表1显示,取胆囊炎模型两侧腹部循胆经发生高温反应部位的组织和对照组相应部位组织进行匀桨和离心等处理,采用酶免疫法对各样品 NE、E和5-HT含量进行检测和统计学处理。结果如下:与对照组比较,模型组两侧腹部循胆经发生高温反应部位的组织内 NE、5-HT含量升高,差异有显著性意义(P<0.05)。同体的对侧(左侧)与患侧(右侧)比较,NE和5-HT含量变化均没有显著性差异性,2组E含量没有显著性差异(P>0.05)。

表1 2组腹部循胆经组织内NE、5-HT、E含量的变化(ng/L)±s)

表1 2组腹部循胆经组织内NE、5-HT、E含量的变化(ng/L)±s)

注:与对照组比较:*P<0.05;与对照组比较:#P>0.05,E含量的变化(μg/L)

组 别 n NE 患侧对侧5-HT E NE 5-HT E对照组 6 26.61±1.5 37.98±2.09 2.01±0.19 27.19±1.3238.92± 2.12 1.95±0.14模型组 8 34.59±8.18* 47.26±7.39* 2.08±0.32# 32.51±5.72* 49.70±12.15* 2.03±0.48#

结果表明,NE和5-HT与胆囊炎引起的腹部循胆经高温反应有一定相关性。

图1 (A)造模前,左右腹侧沿胆经的热像图温度约35.8℃;(B~D)分别为造模后第3、7、11天,循胆经的热像图温度依次为 35.3℃、36℃、37.2℃

3 讨论

循经感传是经络的主要功能之一,也是临床判断针灸疗效的重要标准。现代红外技术证明,脏腑发生病变可在体表出现循经高温反应,为经络研究提供客观指标。本实验观察到,在模型组右侧和左侧腹部循胆经高温反应组织内NE含量明显高于对照组,表明循经高温反应组织内NE释放增多。NE可作用于脂肪细胞 β3受体,通过UCP使细胞产热增加,进而使组织温度增加影响局部组织的温度变化或循经感传。5-HT又称血清素,它既是神经递质又是炎症介质,参与免疫调节过程。5-HT其相应的受体可分为7种类型和至少14种亚型,除5-HT3受体为配体门控离子通道外,其余则为G蛋白偶联受体,可见5-HT从中枢到外周广泛分布,参与机体的许多生理或病理过程[3]。根据临床研究,5-HT使内皮细胞上的5-HT1受体启动,可通过释放内皮细胞舒张因子(EDRF)和前列腺素(PGS)使血管平滑肌收缩、毛细血管扩张、通透性增高,引起皮肤红斑水肿、发红发热、出血、疼痛及瘙痒等炎症反应。据实验研究报道,电针穴位所产生的气至病所效应与抑制上述炎性介质的释放有关[4]。众所周知,热反应是炎症的主要症状之一,实验性胆囊炎所引起的循经高温现象也是一种病理反应的结果,并与5-HT含量的增加呈正相关性,表明5-HT作为一种炎症介质可能参与了脏腑体表相关的病理反应过程。

当然,本研究的这些结果只是从NE和5-HT等因素对循经高温现象进行一些探索,对循经高温反应复杂机制的揭示还需做更深入的研究。

[1]胡翔龙,培清,许金森,等.人体体表循经红外辐射轨迹的热源及其形成机理的探讨[J].针刺研究,2002,27(6):258-260.

[2]张栋,付卫星,叶燕燕,等.实验性胆囊炎家兔体表循经高温线显示[J]. 上海针灸杂志,2001,20(1):42-43.

[3]周舒,娄艾琳.5-羟色胺的生理和病理生理[M].北京:人民卫生社,1998.1-49.

[4]李熳,施静,李玲俐,等.“气至病所”对相关皮瓣浸泡液内5-羟色胺、肾上腺素、去甲肾上腺素含量的影响[J].针刺研究,2001,26(4):292-298.

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