何国坚 李程 刘雄伟
临床上,诊断肾脏及尿道疾病的主要方法之一是对尿中有形成分的检测,能为临床提供诊断及预后的依据。血尿是泌尿系统疾病常见的临床症状之一,因此,明确血尿的来源和性质对临床诊断和治疗有重要意义[1]。UF-1000i作为目前较为先进的尿有形成分分析系统,用红色半导体激光束照射经过核酸染色后在鞘流贯流分析池中形成的鞘流标本,并通过对从各粒子产生的前方散射光、侧向散射光以及侧向荧光信号转换的光电信号进行分析,从而对各个粒子进行识别。同时还可以提供如:70%红细胞前向散射光(RBCP70FSC),红细胞前向散射光分布宽度(RBC-FCS-DW),大红细胞(Large-RBC),小红细胞(Small-RBC)等红细胞信息(RBC-Info)。为探讨UF-1000i对明确血尿来源和性质的准确性,收集2009年我院收治的住院及门诊患者的尿样标本,对其中检测有红细胞的240例进行分析。应用UF-1000i检测该标本,并以显微镜检测结果为标准[2],计算UF-1000i符合率,同时比较肾源性血尿与非肾源性血尿的红细胞差异,为临床诊断及鉴别诊断肾脏疾病提供客观依据。先将结果报告如下。
1.1 一般资料 选取2009年我院住院及门诊患者的血尿标本240例,标本的确定符合血尿的诊断标准。其中男124例,女116例,年龄14~68岁,平均42.6岁。根据病史、血、尿生化检查,B超、CT等影像学检查,膀胱镜及必要的免疫学检查,确诊为肾小球疾病患者156例,非肾小球疾病84例。所有患者均用一次性清洁尿杯留取新鲜晨尿或随机尿(女性患者避开月经期),分别经UF-1000 i尿沉渣分析仪和显微镜进行检测。
1.2 仪器与试剂
1.2.1 日本SYSMEX公司生产的 UF-1000 i尿沉渣分析仪,其使用试剂全部为原装配套试剂及质控品。批号如下:UFII SHEATH(鞘液)G0005;UFII SEARCH-SED(染色液)A9004;UFII PACK-SED(稀释液)A9006;UFII SEARCH--SED(染色液)A9006;UFII PACK-BAC(稀释液)A9003。质控品YS9016。
1.2.2 日本奥林巴斯光学显微镜,离心机、离心管等。
1.3 检测方法
1.3.1 UF-1000i检测取患者尿液10 ml于专用测定管内。应用UF-1000i检测,严格按照使用说明进行操作。检测前,UF-1000i各项参数均应经校准,每天用质控品做室内质量控质,仪器性能符合要求。
1.3.2 显微镜检测方法 严格按照《全国临床检验操作规程》[3]进行操作。吸取10 ml尿液置于离心管中,用离心机以1300 r/min,离心5 min,弃去上层清液,取0.2 ml尿沉渣充分摇匀滴入定量计数板中。滴入计数板1 min后,计数10个大方格内红细胞数目及畸形红细胞数目,计算畸形率,检测应在2 h内完成。所有标本均由一人完成其显微镜下检测,尽量避免由于观察者主观差异带来的变异性。
1.4 判断标准
1.4.1 UF-1000 i检测结果 ①非肾小球性血尿:Rbc Fsc-P70≥100且 Fsc-P70-DW≤50 ch,提示可能为均一性RBC;②肾小球性血尿:Rbc Fsc-P70≤70 ch,提示可能为非均一性RBC,即为多形性红细胞;③混合性红细胞:Rbc Fsc-P70≥100且 Fsc-P70-DW≥50 ch。
1.4.2 显微镜检测的判断标准 尿中红细胞>8000/ml即诊断为血尿。①肾小球性血尿:畸形红细胞>80%;②非肾小球性血尿:畸形红细胞<20%;③混合性血尿:畸形红细胞介于上述两者之间。
1.5 统计学方法 数 据处理应用SPSS 12.0统计软件进行,实验数据以均数±标准差(±s)表示,两样本的比较应用t检验及χ2检验。
应用UF-1000 i尿沉渣分析仪和显微镜进行检测,检测结果见表1。
表1 两种检测方法对红细胞的检测结果及符合情况(例,%)
以显微镜检测结果为标准,由表1可知,UF-1000 i尿沉渣分析仪提示红细胞信息与显微镜检查的符合率,非肾源性血尿、肾源性血尿、混合性血尿分别为 91.0%、90.5%、81.3%。
尿液检查是诊断及鉴别诊断泌尿系统疾病的必要检查之一。而肾脏及泌尿系统疾病常常出现血尿这一临床表现。因此,明确血尿的来源对疾病的诊断及鉴别诊断均有重要意义。一方面,红细胞通过病变的肾小球滤膜时,受到物理机械损伤引起尿液红细胞形态改变;另一方面,红细胞在肾小管中由于受到不同的pH值环境、渗透压、尿激酶、尿素等化学因素的影响,也可以导致形态的改变[4]。因此,通过对尿液中红细胞形态及数量的检测可以初步判断血尿的来源。传统的应用显微镜检测的方法准确性较高,但进行计数前需要对标本进行离心,在离心的过程中可能会导致红细胞的变形和破坏[5],计数结果容易受到观察者主观的影响且检测速度较慢,难以满足临床需要。
UF-1000i尿沉渣分析仪是目前检测、分析尿液有形成分的较为先进的系统,对尿中有形成分直接进行荧光染色。其应用流式细胞计数原理和电阻抗原理,利用尿液中各种有形成分的荧光强度和荧光脉冲宽度、前向散射光强度和前向散射光脉冲宽度以及电阻抗大小的不同来区别尿液中各种有形成分。但当红细胞在尿液中大量出现时,要注意草酸钙等结晶、酵母样细胞、白色念珠菌、其他细菌的数量以及白细胞的数量,这些都会使沉渣分析仪出现假阳性结果。本实验结果表明,UF-1000i尿沉渣分析仪提示红细胞信息与显微镜检查的符合率,非肾源性血尿、肾源性血尿、混合性血尿分别为91.0%、90.5%、81.3%,在一定程度上可以替代显微镜镜检。且该方法检测时尿液无须离心,无主观因素干扰,结果客观,操作简单,快速,具有一定的可重复性,值得在临床上推广应用。
[1]Nguyen GK.Urine cytology in renal glomerular disease and value of G1 cell in the diagnosis of glomerular bleeding.Diagn Cytopathol,2003,29(2):67-73.
[2]范秀玲,刘大伟.普通光镜观察尿红细胞形态鉴别血尿来源.实用医技杂志,2005,12(10):2755.
[3]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程.东南大学出版社,2006:293.
[4]Fischereder M.Hematuria and nephritic sediment.MMW Fortschr Med,2004,146(43):35-36,38.
[5]牟君成,童瑞强.尿隐血试验与镜检红细胞的比较.第四军医大学学报,2000,21(6):140.