血液复检规则在血细胞计数和分类中的应用

李卓范

(青岛市浮新医院,山东 青岛 266000)

血液复检规则在血细胞计数和分类中的应用

李卓范

(青岛市浮新医院,山东 青岛 266000)

目的观察复检的符合率,以验证复检规则的适用性。方法对所检测的3600例血液标本中按照复检规则需要复检的标本采用不同的措施进行复检,计算复检的符合率。同时对200例阴性标本涂片镜检,计算其假阴性率。结果观察一般性状的符合率为100%,需重复检测的标本符合率为90%,结果数量异常的标本符合率为85%,有异常细胞提示的标本符合率为75%,需镜检分类的标本77%。复检总符合率为81.7%,假阳性率为18.3%。假阴性率为3.5%。结论该科室制定的复检标准是可行的。

血细胞计数;分类;复检

全自动血细胞分析仪的应用使临床实验室过分依赖现代化仪器而忽视了血细胞形态的镜检。有的实验室虽已开展血细胞检查的复检工作,但目前国内还没有一个可参照的镜检标本的筛选标准。因此每个实验室应建立适合本科室的血液检查复检标准。现对我科制定的复检标准的应用报道如下。

1 临床资料

1.1 标本来源 随机选取两周期间的标本,标本均来自门诊和病房患者(包括部分血液病患者)。标本为乙二胺四乙酸二钾(EDTAK2)抗凝全血,共3600例。

1.2 仪器与试剂 全部标本用Sysmex HST302N流水线(XE2100自动血液分析仪2台,SP1000推片镜检机1台)检测,并根据我科分类复检标准进行复检。需要推片染色镜检的标本由SP1000推片机推片,应用显微镜进行镜检,试剂为Sysmex公司提供的相关配套试剂。

1.3 方法 所有标本均按标准操作流程进行全血细胞分析检测(共进行全血细胞分析3600例),按照我室制定的复检标准进行复检。需镜检的标本在SP-1000i上推片并由本科工作超过10年有中级以上技术职称的技术人员进行镜检和复查,对复检结果进行分析总结。阳性标准[1]。XE-2100自动血细胞计数与白细胞分类涂片复检规则:WBC、RBC、Hb、PLT超过检测线性:WBC＞100×109/L、RBC＞8.0×1012/L、Hb＞250 g/L、PLT ＞1000×109/L,稀释标本后重新测定。WBC、RBC、Hb、PLT无结果或结果不全者,检查标本是否有凝块,重测标本。WBC＜3.0×109/L或＞20.0×109/L,涂片镜检。PLT＜80×109/L或＞1000×109/L,涂片镜检。Hb＜70 g/L,或＞200 g/L,确认标本是否符合要求,重标本,涂片镜检。MCV＜75 fl,或＞105 fl(成人),涂片镜检。MCHC＞380 g/L检查标是否有脂血、溶血、RBC聚集,涂片检查有无球形红细胞。MCHC＜300 g/L,且MCV＞80 fl可能因血液输液污染或其他标本原因。RDW首次结果＞22%,涂片镜检。DC无结果或结果不全涂片镜检。Neu#＜1.0×109/L或＞20.0×109/L,涂片镜检。Lym#＞5.0×109/L,涂片镜检。Mono＞1.5×109/L,涂片镜检。Eos#＞2.0×109/L,涂片镜检。Baso#＞0.5×109/L,涂片镜检。WBC IP Message白细胞异常散点图,涂片镜检。WBC IP Message未成熟粒细胞,涂片镜检。WBC IP Message核左移,涂片镜检。WBC IP Message异形淋巴细胞、异常淋巴细胞或原始细胞,涂片镜检。WBC IP Message原始细胞,涂片镜检。WBC IP Message有核红细胞,涂片镜检。CBC+DC新生儿标本,涂片镜检。CBC+DC血液病标本,涂片镜检。采取不同复检措施的标本数量及比例(n=3600):不需复查的标本2500例,占69.4%;需观察一般性状的标本200例,占5.5%;需评估计数结果、需观察细胞形态的标本576例,占16.0%;需镜检分类的标本324例,占9.0%。

总结以上复检措施,对于所检测的标本,一部分为“正常”结果,不需复检,经审核可以发放。需要复核的结果有以下4种:1)需要观察标本的性状,根据标本的量和稀薄程度评估结果的准确性。2)仪器复检。3)需显微镜下观察细胞的数量来验证检验结果可靠程度,如可根据WBC、PLT与红细胞的比例估计二者的数量,在血涂片白细胞分类区域油镜下1个血小板相当于10×109/L个血小板,在验证细胞数量的同时注意观察细胞形态是否正常。4)观察细胞(WBC、RBC和PLT)形态并进行分类计数,观察出现的寄生虫等。

2 结果

2.1 我们对3600例标本结果按照复检规则进行审核,结果显示阴性不需复检的标本有2500例,占69.4%。例如有轻微贫血或红细胞参数增高、但未触动复检规则的标本,需观察标本的一般性状如标本的稀薄程度和颜色,以排除标本量不足的可能性。这类标本有200例,占5.5%。需镜下验证细胞数量的标本及需观察细胞形态的标本共有576例,占16%。需镜检分类的标本有324例,占9%。

2.2 不同的复检措施结果与仪器结果的符合率 需观察标本状态的标本的符合,是指RBC、HGB数量减低的标本或标本凝固等;需仪器复检的标本符合指PLT结果低于60×109/L,HGB低于70 g/L等;需显微镜观察评估细胞数量或形态的标本符合是指细胞数量增高或减低,PLT聚集或卫星现象,以及红细胞出现各种异常形态,尤其是红细胞直方图出现双峰时红细胞形态;需镜检分类计数的标本符合是指发现异形淋巴细胞、NRBC、某种WBC分类百分比异常以及WBC不分类的情况。

显微镜评估细胞及镜检分类计数结果的符合率:需观察标本性状的标本符合率100%;需重复检测的标本符合率90%;结果数量异常的标本及有异常细胞提示的标本符合率80%;需镜检分类的标本符合率77%。

2.3 200例仪器显示阴性标本经涂片镜检,假阴性率为3.5%。主要是有些标本出现血小板聚集或巨大血小板而仪器无提示,血涂片中出现少量的幼稚粒细胞而仪器把它们划为单核细胞。

3 讨论

我们在XE-2100血细胞分析仪复检标准制定协作组制定的“Sysmex XE-2100自动血细胞分析仪和白细胞分类的复检规则探讨”[1]所报导的复检规则基础上,结合实验室的实际情况制定了自己的筛选规则,对门诊和病房标本进行筛检。

我们对连续两周所检测的3600例标本结果按照复检规则进行审核,结果显示阴性不需复检的标本有2500例,占69.4%。需要通过不同的方式进行复核的有1100例,其中需要观察标本性状的符合率为100%;重复检测的标本重测后符合率为90%;需镜下验证细胞数量及细胞形态的标本符合率为80%;需镜下分类的标本,符合率较低,为77%。由于分析前质量控制做得比较好,在检测中未发现有标本不合格的情况。对出现冷凝集的标本,按照本科有关操作手册进行处理并检测。影响标本重测符合率的因素为小红细胞或大血小板大量出现,影响了血小板的计数,而Sysmex 2100自动血液分析仪提供了光学法通道检测PLT数量,通过荧光染料染色,利用PLT和RBC不同的荧光强度对其进行有效的区分,对血小板进行准确计数。

仪器的提示来自结果异常数值、血细胞异常直方图和异常散点图、仪器的IP信息。触及复检规则的结果应进行复检,否则会造成异常标本漏报。仪器法检验结果无法将患者外周血形态异常的特征表达出来,仅将仪器的计数、分类结果报告临床,漏掉了重要的诊断信息。根据检验结果数值的提示以及仪器的IP信息、直方图和散点图提供的信息,采取不同的措施对标本进行复检,使我们的检测结果能真正反映标本的实际情况,为临床提供有价值的诊断信息。结合实验使用的仪器以及工作人员的素质及人员配置制定出适合自己实验室的复检规则尤为重要。如果制定的规则过于严格,务必会增加复片率,降低工作效率;如果复检规则制定的太宽,就有可能造成一些阳性标本漏检、漏报的现象。得益于仪器精密度的提高,目前全自动血液分析仪在计数方面已经相当准确,对正常标本WBC分类计数的符合率接近 100%。因而在WBC数量太多或太少的情况下进行推片镜检,可先浏览全片,如未发现异常细胞,可仅估计WBC计数是否准确,不需要专门进行分类计数,可提高工作效率且不降低准确性[2-3]。

经分析镜检(包括计数验证、形态观察和白细胞分类)总符合率为78.9%,假阳性率为21.1%。假阳性率的高低与仪器IP信息提示敏感性设置有关,敏感性过高会提高复片率,同时也增加了我们的工作量;敏感性设置过低,会增加假阴性。我们实验室镜检的假阴性率为3.5%。假阴性率在要求范围内[4]。

自动化仪器的应用是细胞学检验的一场革命。不但提高了计数的精确性、准确性,易于标准化、规范化,且提供了许多有用的形态学指标。更主要的是,通过高科技“筛选”的手段,可将符合“筛选”的标本视为正常,免去镜检,而节省出更多的时间用于有病理意义标本的显微镜下检查,提高形态学分析的质量。每个临检科应建立适合本科室的筛选标准,以提高血细胞分析的准确性。

[1] XE-2100血细胞分析复检标准制定协作组.自动血细胞分析和白细胞分类的复检规则探讨[J].中华检验医学杂志,2008,31(7):752-757.

[2] 孙芾,王厚芳,林宏,等.显微镜白细胞分类标准的制定和应用[J].中华临床医学杂志,2004,5(9):25226.

[3] 朱晓辉,何菊英,朱忠勇.应用血液分析仪后复查血片的内容、方法及程序[J].中华检验医学杂志,2003,26(12):7852787.

[4] 丛玉隆.ISO15189认可现场评审引发的对细胞形态学检验问题的思考[J].中华检验医学杂志,2008,31(7):725-728.

R446.11+1;446.11+3

A

1008-4118(2010)01-0022-03

10.3969/j.issn.1008-4118.2010.01.20

2009-12-02