乳腺癌中ASAH1蛋白的表达

齐 攀 ，金 艳 ，曹兴玥 ，张 冰

（1.河南省新乡市中心医院肿瘤外科，河南新乡 453000；2.新乡医学院组胚教研室，河南新乡 453003；3.河南省新乡市中心医院儿科，河南新乡 453000）

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，全世界每年有120万妇女患乳腺癌，50万妇女死于乳腺癌，其发病率以每年2%～8%的速度递增，严重危害妇女健康。为了对临床诊治乳腺癌患者提供实验依据，笔者采用免疫组织化学法检测ASAH1蛋白在乳腺癌中的表达，以评价其在乳腺癌诊治中的价值。

1 材料与方法

1.1 材料

选取新乡市中心医院病理科2003～2005年73例乳腺癌患者石蜡组织包块，均有完整的随访资料，患者年龄37～78岁，平均56岁；2例为导管内癌，6例为浸润性特殊癌，65例为浸润性非特殊癌。另选取25例正常乳腺组织及23例良性乳腺癌肿瘤（16例乳腺腺病，5例纤维瘤，1例叶状肿瘤）作为对照。

1.2 方法

应用免疫组织化学法对73例乳腺癌组织、23例乳腺良性肿瘤组织及25例正常对照标本ASAH1蛋白进行检测。

1.3 结果判定

胞浆中出现澄清的棕黄色颗粒为阳性，采用半定量积分法判断结果。

1.4 统计学方法

采用SPSS 11.0统计软件，应用χ2检验比较组间差异，以及ASAH1表达增强对5年生存率的影响。

2 结果

2.1 ASAH1在乳腺癌、乳腺良性肿瘤及正常组织中的表达情况

免疫组化结果显示，ASAH1蛋白阳性表达定位于细胞胞浆，表现为棕黄色颗粒沉淀，且呈弥漫性着色，其阳性表达率（表1）：乳腺癌中占72.6%，乳腺良性肿瘤中占53.3%，正常乳腺组织中占44.0%。ASAH1在乳腺癌及乳腺正常组织中表达具有差异性（P＜0.05）。 具体见图 1～3。

表1 ASAH1在乳腺癌、乳腺良性肿瘤及正常乳腺组织中的表达（例）Tab.1 Expression of ASAH1 in breast cancer,benign breast tumor and normal breast tissues(case)

图1 ASAH1蛋白在正常组织内的表达（400×）Fig.1 ASAH1 protein expression in normal tissues(400×)

图2 ASAH1蛋白在乳腺良性肿瘤细胞内的表达（400×）Fig.2 ASAH1 protein expression in benign breast tumor cells(400×)

图3 ASAH1蛋白在乳腺癌细胞内的表达（400×）Fig.3 ASAH1 protein expression in breast cancer cells(400×)

2.2 ASAH1表达与乳腺癌临床病理特征的关系

见表2。在乳腺癌中ASAH1蛋白的表达与肿瘤大小具有相关性，肿瘤体积越大，ASAH1表达越强。

2.3 ASAH1蛋白表达与乳腺癌患者5年生存率关系

乳腺癌中ASAH1蛋白阳性表达与阴性表达，其5年生存率具有差异性，即表达越强，生存率越高。见表3。

3 讨论

鞘脂类不仅作为细胞膜的主要结构，还具有调节细胞生长、衰老、凋亡、远处复发、耐药性和血管生成等功能[1-3]。在正常细胞，凋亡与抗凋亡存在着鞘脂平衡，神经酰胺、鞘氨醇-1-磷酸（sphingosine-1-phosphate，S1P）以及调节二者代谢的酶发挥着关键作用[4-5]。由表1可知，乳腺癌组织中ASAH1阳性率为72.6%，乳腺良性肿瘤阳性率为53.3%，正常组织中阳性率为44.0%，表达具有差异性（P＜0.05），提示ASAH1蛋白在乳腺癌表达上调，可能参与乳腺癌的发生。

ASAH1蛋白表达与乳腺肿瘤大小成正相关，肿瘤越大，ASAH1表达越强。肿瘤体积大表明肿瘤生长旺盛，癌细胞增生活跃，细胞凋亡受到抑制，ASAH1蛋白表达与肿瘤大小成正相关，提示预后不良[6]。用柔红霉素处理过的肝癌细胞，ASAH1被激活，细胞内神经酰胺减少，S1P增加，与用ASAH1抑制剂处理过的细胞相比，细胞的存活率增加[7]。ASAH1过表达在癌细胞中亦可抵抗普通化疗药物的细胞毒作用。转染ASAH1的前列腺癌细胞对顺铂、多柔比星、吉西他滨及人工神经酰胺降低了敏感性[8-9]。以上证据支持ASAH1的抑制凋亡促进增殖作用，且提示这与ASAH1表达增强后神经酰胺减少有关。

表2 ASAH1表达与乳腺癌临床病理特征的关系Tab.2 The relationship between expression of ASAH1 and the clinicopathological characteristics of breast cancer

表3 ASAH1与5年生存率的关系（例）Tab.3 The relationship between expression of ASAH1 and 5-year survival rate(case)

乳腺癌术后随访在于及早发现肿瘤复发或转移，以便及时治疗。本研究表明ASAH1表达与否与5年生存率比较，差异有统计学意义，AHAS1蛋白表达提示生存率低。在肿瘤细胞中ASAH1的增加及激活可通过衰减神经酰胺信号及增强S1P信号促进细胞增殖和存活，ASAH1过表达的结果是增加了肿瘤细胞对死亡的抵抗力[10-11]。

总之，ASAH1可以作为一个可靠的肿瘤标志物，在乳腺癌预后评估中具有很大价值。

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