气相色谱法测定醋酸氟轻松冰片乳膏中冰片含量

付萍萍，董秋香，张月寒

（河北省保定市药品检验所，河北 保定 071051）

醋酸氟轻松冰片乳膏（含醋酸氟轻松0.01%，冰片0.5%）为肾上腺皮质激素类药，有抗炎、抗过敏作用，国家标准中对冰片的含量未作规定[1]。为进一步控制本品质量，保证疗效，笔者建立了冰片的毛细管气相色谱测定法，报道如下。

1 仪器与试药

日本岛津GC-2010型气相色谱仪，Sartorius BP211D型分析天平。冰片对照品（中国药品生物制品检定所，批号为110743-200504）；醋酸氟轻松冰片乳膏（新乡华青药业有限公司，批号为070808；新乡市琦宁药业有限公司，批号为20071010，20070713；芜湖三益制药有限公司，批号分别为071201，071205）；水杨酸甲酯、乙醇（分析纯）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Dikma DM-5石英毛细管色谱柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm）；柱温：100℃保持 10 min，再以 20℃ /min升至 280℃，保持7 min；检测器：FID，温度320℃；进样口温度：230℃，分流比：10 ∶1；载气：氮气，线速率：25 cm/s；空气流速：300 mL/min；氢气流速：30 mL/min；尾吹气：氮气，流速：30 mL/min；进样量：1 μL。

2.2 溶液制备

称取水杨酸甲酯0.26018 g，置50 mL量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，得内标溶液。精密称取冰片对照品0.12505 g，置25 mL量瓶中，加乙醇适量，振摇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备溶液。精密量取对照品贮备溶液1 mL，置25 mL量瓶中，精密加入内标溶液1 mL，用乙醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。精密称取样品内容物约1 g，置25 mL量瓶中，加乙醇适量，振摇使溶解，精密加入内标溶液1 mL，加乙醇稀释至刻度，滤过，滤液经0.45 μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。按处方比例，依照醋酸氟轻松冰片乳膏的制备工艺制得不含冰片的乳膏，同法操作即得阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

系统适用性试验：精密吸取2.2项下3种溶液，按2.1项下色谱条件进样。结果表明，供试品中其他成分和异龙脑峰、龙脑峰与水杨酸甲酯峰均能完全分离，异龙脑峰与龙脑峰理论塔板数均不低于40000，相邻峰之间的分离度均大于2.0。色谱见图1。

图1 气相色谱图

线性关系考察：分别精密量取对照品贮备溶液0.25，0.50，1.00，2.00，3.00，5.00 mL，置 25 mL 量瓶中，各精密加入内标溶液1 mL，用乙醇稀释至刻度，摇匀，按2.1项下色谱条件测定。以冰片的进样量（X）对冰片的异龙脑和龙脑的总峰面积之和与内标水杨酸甲酯的峰面积比值（Y）进行线性回归，回归方程为 Y=7.5494 X-0.06327，r=0.99996（n=6）。结果表明冰片进样量线性范围是 0.05002 ～1.0004 μg。

精密度试验：取同一对照品溶液重复进样。结果冰片的异龙脑和龙脑的总峰面积之和与内标水杨酸甲酯的峰面积比值的 RSD为0.5%（n=6），表明方法的精密度较好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于 0，1，2，4，8，12 h 时依法进样。结果冰片的异龙脑和龙脑的总峰面积之和与内标水杨酸甲酯的峰面积比值基本不变，RSD为0.7%（n=6），表明供试品溶液至少在12 h内稳定。

重现性试验：精密称取同一批供试品（批号为071205）内容物约1 g，依法测定。结果平均含量为0.50%，RSD为1.0%（n=5），说明方法的重现性较好。

回收率试验：取已知含量的供试品（批号为071205）内容物约1 g，置25 mL量瓶中，加乙醇适量，振摇使溶解，分成3组，每组分别精密加入对照品贮备溶液0.8，1.0，1.2 mL，各精密加入内标溶液1 mL，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，测定。结果见表1。

表1 冰片加样回收试验结果（n=9）

检测限确定：将2.2项下对照品贮备溶液用乙醇稀释，分别制成每1 mL含冰片10，2，1μg的对照品溶液，进样测定，按3倍信噪比计算检测限。结果冰片的最低检出量为1 ng。

2.4 样品含量测定

取按2.2项下的对照品溶液与供试品溶液，进样测定。结果5批供试品分别含冰片0.39%，0.39%，0.28%，0.50%，0.48%。

3 讨论

曾选用极性较强的DM-1701色谱柱[2]，结果供试品中的其他成分不能与异龙脑成功分离，改用极性较弱的DM-5色谱柱后，各组分分离效果得以改善。曾于柱温100℃恒温条件下测定[3]，结果异龙脑、龙脑及水杨酸甲酯峰在10 min内即可流出，但供试品中的其他成分峰未完全流出，影响下一次进样分析，故在异龙脑、龙脑及水杨酸甲酯峰流出后，采用程序升温，这样可使杂质峰完全流出。该法简便、准确、重现性好。

冰片为龙脑与异龙脑的混合物，现行质量标准[3]中冰片的含量测定方法为以龙脑为对照品，以含龙脑的量控制冰片的质量。本试验以冰片为对照品，以测得龙脑与异龙脑的总量作为醋酸氟轻松冰片乳膏中含冰片的量。3个厂家5个批号的样品测定，结果显示，仅1个厂家按处方量添加了冰片，说明在质量标准中增加冰片含量的测定势在必行。

[1]WS-1001-（HD-0295）-2002，国家药品标准·化学药品地方标准上升国家标准（第三册）[S].

[2]丁 野，张嘉乐，梁建宁.毛细管气相色谱法测定解毒烧伤膏中冰片的含量[J]. 中国现代应用药学杂志，2005，22（6）：496.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：化学工业出版社，2005：98.