冠心宁片中隐丹参酮和丹参酮ⅡA的含量测定

卞艳晶，马 涛，王 建

（山东省济宁市药品检验所，山东 济宁 272025）

冠心宁片是由丹参、三七等制成的复方制剂，具有活血化瘀、行气止痛之功效，用于治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病、心绞痛和冠状动脉供血不足等症，丹参是方中主药。为进一步提高制剂质量，确保临床疗效，笔者建立了可同时测定丹参中两种主要有效成分含量的方法，报道如下。

1 仪器与试药

Agilent 1100型高效液相色谱仪（美国安捷伦科技公司）。隐丹参酮对照品（批号为852-993），丹参酮ⅡA对照品（批号为110766-200416），均由中国药品生物制品检定所提供；冠心宁片（济宁市脉管炎医院）；甲醇（色谱纯，天津市科密欧化学试剂开发中心），其他试剂（分析纯）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Thermo BDS Hypesil C18柱（250 mm ×4.6 mm，5"m）；流动相：甲醇 -水（78 ∶22）；流速：1.0 mL/min；检测波长：270 nm；柱温：20 ℃；进样体积：10"L。

2.2 溶液制备

按制剂的处方工艺制备不含丹参的样品，并按供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。分别精密称取经减压干燥24 h后的隐丹参酮对照品12.4 mg、丹参酮ⅡA对照品12.0 mg，置50 mL棕色量瓶中，加甲醇5 mL使溶解，加甲醇至刻度，摇匀后作为对照品储贮备液，精密吸取3 mL，置25 mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀后作为对照品溶液。取样品20片，精密称定质量，研细，取样品约1.0 g，精密称定，置磨口锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，称定质量，加热回流1 h，放冷后密塞，称定质量，用甲醇补足减损的质量，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。

2.3 方法学考察

专属性考察：2.2项下3种溶液，按上述色谱条件测定。结果阴性对照品对隐丹参酮和丹参酮ⅡA的含量测定无干扰（图1）。

线性关系考察：取隐丹参酮、丹参酮ⅡA混合对照品溶液，分别进样 4.0，8.0，12.0，16.0，20.0，24.0"L，测定峰面积。以进样量为横坐标 （X）、峰面积值为纵坐标（Y）绘制标准曲线，并进行线性回归。结果隐丹参酮回归方程为Y=5590.8 X+4.60，r=1.0000（n=6）；线性范围为 0.119～0.714"g；丹参酮ⅡA回归方程为Y=5122.2 X+6.54，r=1.0000（n=6），线性范围为 0.115～0.691"g。

精密度试验：精密吸取对照品溶液10"L，连续进样5次。结果隐丹参酮、丹参酮ⅡA的平均峰面积分别为1671.31（RSD=0.11%）和2510.38（RSD=0.26%），表明精密度符合要求。

稳定性试验：取同一样品，照2.2项下方法制备供试品溶液，分别在0，2，4，6，8 h时测定。结果隐丹参酮、丹参酮ⅡA的平均含量分别为 1.60 mg/g（RSD=0.46% ）和 2.63 mg/g（RSD=1.39% ），表明供试品溶液在8 h内稳定。

重现性试验：取同一批样品5份，按2.2项下上述方法制备供试品溶液并测定含量。结果隐丹参酮、丹参酮ⅡA含量分别为1.600% （RSD=1.18% ）和 2.639% （RSD=1.00% ），表明方法重现性好。

图1 高效液相色谱图

加样回收试验：取已知含量的样品5份，每份约0.5 g，精密称定，置具塞三角瓶中，精密加入隐丹参酮对照品0.82 mg、丹参酮ⅡA对照品1.40 mg，按2.2项供试品溶液制备方法制备溶液并依法测定，结果见表1。

表1 加样回收试验结果

2.4 样品含量测定

取不同批号的样品约1.0 g，精密称定，按2.2项方法制备供试品溶液，分别测定并计算含量。结果见表2。

表2 样品含量测定结果（mg/粒）

3 讨论

采用2005年版《中国药典（一部）》中丹参酮ⅡA的测定波长测定，隐丹参酮、丹参酮ⅡA的色谱分离度和灵敏度能满足检测要求，故选择270 nm为检测波长。

丹参脂溶性成分是丹参的主要有效成分之一，具有较强的生理活性[1]，其中丹参酮ⅡA、隐丹参酮含量较高，故以隐丹参酮和丹参酮ⅡA为指标，控制活血脉动胶囊中丹参的质量。

山东产丹参的丹参脂溶性成分的含量较其他地区高，不同产区的丹参含量存在差异，为确保产品质量的稳定，建立了上述简便、快捷的含量测定方法。

[1]代云桃，秦雪梅，郭小青，等.不同产地不同品种丹参药材内在质量评价[J]. 山西医科大学学报，2006，37（7）：717-719.