关节止痛膏中水杨酸甲酯、薄荷脑、樟脑含量测定的方法验证

刘昶

【摘要】通过对《中国药典》2015年版一部“关节止痛膏”【含量测定】方法进行系统适用性试验、精密度试验、检出限、定量限、重复性试验、准确度试验的验证，确保检验方法对被检物质有足够的专属性和灵敏度，以及准确度和重現性，并确定水杨酸甲酯、薄荷脑、樟脑的线性范围、定量限。

【关键词】水杨酸甲酯；薄荷脑；樟脑；关节止痛膏；方法验证

1 试验方法

1.1色谱条件与系统适应性

以聚乙二醇20000为固定相的毛细管柱（30m*0.32mm*0.25um），柱温为140℃，理论板数按萘峰计算不低于5000。

1.2校正因子测定

取萘适量，加乙酸乙酯制成每1ml含10mg的溶液，作为内标溶液。另分别取樟脑对照品、薄荷脑对照品、水杨酸甲酯对照品各约10mg，置同一10ml容量瓶中，精密加入内标溶液1ml，用乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，吸取1ul注入气相色谱仪，计算校正因子。

1.3测定法

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1uL，注入气相色谱仪，测定。

1.4检测限的确定

取一定浓度的对照品溶液，精密量取1ul注入气相色谱仪，按上述色谱条件进行测定，满足信噪比3：1为最低检测限的要求。此时，樟脑、薄荷脑、水杨酸甲酯的浓度分别为2.5×10-4mg/ml、3.1×10-4mg/ml、6.3×10-4mg/ml，对应的膏体浓度分别为0.0059mg/100cm2、0.0074mg/100cm2、0.015mg/100cm2。

1.5定量限的确定

取一定浓度的对照品溶液，精密量取1ul注入气相色谱仪，按上述色谱条件进行测定，满足信噪比10：1为定量限的要求。此时，樟脑、薄荷脑、水杨酸甲酯的浓度分别为8.3×10-4mg/ml、1.0×10-3mg/ml、2.1×10-3mg/ml，对应的膏体浓度分别为0.020mg/100cm2、0.025mg/100cm2、0.050mg/100cm2。

1.6重复性试验

取1批关节止痛膏，取供试品6份，依法测定。6次测定结果樟脑、薄荷脑、水杨酸甲酯含量相对标准偏差分别为0.71%，0.16%，0.07%，该方法重复性良好。

1.7加样回收率试验（准确度试验）

采取全程加样法。取6份已知含量的关节止痛膏105cm2，分别按照100%浓度精密添加水杨酸甲酯、薄荷脑、樟脑对照品混合溶液3ml，按含量测定方法测定。以下式计算回收率。

回收率=XX测得值-样品中XX的量XX对照品加入量×100%

樟脑、薄荷脑、水杨酸甲酯平均回收率分别为102.8%、99.2%、103.5%，该方法准确度满足要求。

2 结论

该方法中水杨酸甲酯、薄荷脑、樟脑的最低检测限分别为0.015mg/100cm2、0.0074mg/100cm2、0.0059mg/100cm2；水杨酸甲酯、薄荷脑、樟脑的定量限为0.050mg/100cm2、0.025mg/100cm2、0.020mg/100cm2；水杨酸甲酯的线性浓度范围为0.060-2.42mg/ml，薄荷脑的线性浓度范围为0.022-0.89mg/ml，樟脑的线性浓度范围为0.12-4.96mg/ml。endprint