孕足月产程发动前后NF-κ B蛋白在平滑绒毛膜的表达及其意义

赵文举,张丹妮,李海梅

(中国人民解放军第二零八医院,吉林长春130062)

胎盘具有代谢、防御、内分泌及免疫等功能,是维持胎儿在宫内营养、发育的重要器官。除胎盘外,整个宫腔大部分为平滑绒毛膜与蜕膜组成的母胎界面,所以,母体-胎儿交换系统除胎盘外,还包括母体蜕膜和平滑绒毛膜之间的旁分泌系统,但作为与胎盘发生同源的平滑绒毛膜,目前了解较少。本文探讨NF-KB蛋白在孕足月产程发动前后在平滑绒毛膜表达的意义。

1 资料与方法

1.1研究对象选择2008年6至11月在解放军二零八医院产科住院的80例剖宫产分娩产妇,均为足月孕妇(孕周为37-41周)。其中,产程未发动组和发动组各40例(选取宫口扩大至4 cm-9 cm产妇),均因骨盆狭窄、瘢痕子宫、臀位、高龄初产、社会因素、产程进展延迟或停滞等指征行剖宫产,无内科合并症及产科并发症,无感染征象。诊断标准按《妇产科学》第6版。两组均为初产妇,平均年龄、孕周比较差异无统计学意义。

1.2标本采集两组均于胎盘、胎膜娩出后在远离胎盘部位,自胎膜靠近子宫侧剥取一层膜,即平滑绒毛膜。用10%福尔马林固定24 h,将标本低温石蜡包埋,4 μ m层厚连续切片,分别进行常规HE染色及免疫组化染色。

1.3NF-κB蛋白检测

采用SABC法检测平滑绒毛膜组织中NF-κ B p50和p65蛋白的表达。试剂采用兔抗人NF-κ B p50和p65多克隆抗体、SABC免疫组织化学试剂盒及DAB显色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)。其他试剂为国产分析纯。

1.4结果判断采用双盲法观察免疫组化结果。用已知的阳性片作为阳性对照,每组均用PBS代替一抗作阴性对照。以胞质或胞核中出现棕黄色颗粒为阳性。每例标本选取1张切片,每张切片高倍镜下(×400)选取5个视野。按每个视野阳性细胞所占百分比和染色程度评分。以胞质或胞核中出现棕黄色颗粒为判断标准,按FDA推荐的染色强度分级:①阴性(-):细胞无着色或阳性细胞数 ＜5%;②弱阳性(+):细胞轻度着色,呈淡黄色,阳性细胞数5%-25%:③阳性(++):细胞着色呈深黄色,阳性细胞数25%-50%:④强阳性(+++):细胞明显着色,呈棕黄色,阳性细胞数＞50%。结果判断在双盲下进行,每张切片由两名病理科医生分别计数。

1.5统计学方法使用SPSS11.5统计软件进行统计分析。免疫组化结果各组间比较采用秩和检验。P＜0.05为有统计学差异。

2 结果

见表1、2。

表1 产程发动前后平滑绒毛膜组织中胞浆和胞核 NF-κ B p50表达的比较

表2 产程发动前后平滑绒毛膜组织中胞浆和胞核 NF-κ B p65表达的比较

3 讨论

在本研究中,所有入选产妇均无临床可见的感染征象。取材标本来自剖宫产产妇,尽可能排除可能存在的感染因素对NF-κ B的影响。本研究观察到产程未发动组与产程发动组的平滑绒毛膜组织均有NF-κ B p50和p65蛋白表达,并且在产程发动组表达增加。提示,NF-κ B可能在产程发动中发挥一定作用。

NF-κ B是一种具有转录激活功能的蛋白质,是Rel家族成员。NF-κ B/Rel家族包括5个成员:Rel-A(p65)、RelB、C-Rel、pl05/p50 和 p100/p52,可以组合成各种纯合二聚体和杂合二聚体,从而调节不同靶基因的转录,诱生型NF-κ B主要是p50/p65异二聚体;它们广泛存在于多种类型的细胞中,可在炎症部位高度表达,提示其在免疫和炎症反应中起着关键作用。

前列腺素(PGs)在人类分娩中发挥重要作用并在临床上用来诱发分娩[1]。NF-κ B与COX2基因启动子相应位点结合,调控COX2的转录表达,进而增加PGs合成[2]。

NF-κ B作为一种重要的核转录因子,调控炎症细胞因子、COX2及缩宫素受体等表达,炎症细胞因子可以激活NF-κ B,使其作用级联放大。因此,推论炎症反应可能与分娩发动存在一定关联,而NF-κ B则通过平滑绒毛膜与蜕膜的母胎界面起到重要的中介作用。

[1]Allport VC,Pieber D,Slater DM,et al.Human labour is associated with nuclear factor-kappaB activity whichmediates cyclooxygenase-2 expression andis involved with the ‘functional progesterone withdrawal’[J].Mol Hum Reprod,2001,7:581.

[2]TerzidouV,Lee YS,Thornton S,et al.Identification of the response region on the oxytocin receptor(OTR)promoter which is important for the synergistic transactivation of OTR by C/EBPbeta and NF-kappaB transcription factors[J].J Soc Gynecol Investig,2003,10:190.

[3]Olson DM.The role of prostaglandins in the initiation of parturition[J].Clin ObstetrGynaecol,2003,17:717.