C-myc基因和 P16基因在结肠癌中的表达及其临床意义

陆 毅

(长春市人民医院普外科,吉林 长春 130051)

在恶性肿瘤的发生发展过程中,原癌基因的激活和(或)抑癌基因的失活起着重要作用,结肠癌的发生和演变过程同样伴随着多种分子事件的发生〔1〕。原癌基因 C-myc可以使细胞无限增殖,获得永生,并能促进细胞的分裂,与多种肿瘤发生发展有关〔2,3〕。而 P16基因作为一个重要的肿瘤抑制基因,直接参与细胞周期的调控,负调节细胞增殖及分裂。本研究检测 60例结肠癌患者的 C-myc基因和P16基因的表达情况,并探讨其临床意义。

1 材料与方法

1.1 研究对象 收集 2003年 3月至 2007年 9月我科行结肠癌根治术的结肠癌标本 60例,其中男 45例,女 15例,年龄35～86(平均 67)岁。全部病例均由组织学病理确诊,术前均未行放疗及化疗。原发灶组织学分级:中高度分化 45例,低分化 15例。肿瘤分期:Ⅰ期 5例,Ⅱ期 12例,Ⅲ期 25例,Ⅳ期 18例。转移情况:淋巴结转移 35例,无淋巴结转移 25例。选择 40例距肿瘤边缘 ＞5 cm、病理组织检查为正常的癌旁组织为对照组。

1.2 试剂与方法 C-myc基因及 P16基因单克隆抗体和免疫组化(SABC法)试剂盒均购自美国 California Biotech Inc公司。免疫组化方法按试剂盒说明书操作。PBS代替第一抗体作为阴性对照,已知肝癌组织作为阳性对照。

1.3 结果判定 细胞核和/或细胞质呈明显棕黄色反应即为阳性。阳性细胞计数:每个标本切片选取 5个高倍视野(400倍)作阳性细胞计数;以超过 10%细胞呈清晰棕褐色为阳性(+),超过 50%细胞呈清晰棕褐色为强阳性(⧺),低于10%表达或细胞无棕黄色染色为阴性(-)。

1.4 统计学处理 数据用率或百分比表示,采用SPSS11.5进行统计学处理,组间比较用χ2检验。

2 结 果

2.1 结肠癌组织中 C-myc基因和 P16基因的表达 C-myc基因在结肠癌组织中的表达 40例(66.7%),明显高于癌旁组织12例(30.0%)(P＜0.05);P16基因则在癌旁组织中表达 32例(80.0%)明显高于结肠癌组织 24例(40.0%)(P＜0.05)。

2.2 C-myc基因和P16基因表达与结肠癌临床特征的关系见表 1。C-myc、P16基因的表达与结肠癌浸润深度、淋巴结转移、肿瘤分期密切相关(P＜0.05);与年龄、性别、肿瘤大小、组织学类型和分化程度无关(P＞0.05)。

表1 C-myc基因和 P16基因表达与结肠癌临床特征的关系

3 讨 论

C-myc可以在多种肿瘤组织中存在,作为一种转录因子,是正常细胞生长和增殖所必需的。它影响基因表达的能力是其促进肿瘤发育的手段,同时它也可以通过影响DNA的复制而影响肿瘤的发生与发展。本研究显示 C-myc基因在结肠癌组织中高度表达,癌旁组织中的表达明显下降;C-myc基因的表达与结肠癌浸润深度、淋巴结转移、肿瘤分期密切相关,与年龄、性别、肿瘤大小、组织学类型和分化程度无关。这提示 C-myc基因的表达增强与结肠癌的发生发展有着密切关系,同时可以作为判断结肠癌有否转移的指标之一。

正常情况下抑癌基因产物可以抑制细胞增殖,促进细胞分化和抑制细胞迁移〔4,5〕。当人体收到大多数的环境致病因素如饮食、病毒、化学物质、射线等致癌因素的影响后,P16基因的抑癌作用减弱,则可引发肿瘤。本研究结果显示,P16基因在结肠癌组织中表达的阳性率明显低于癌旁组织,说明结肠癌与癌旁组织在 P16蛋白表达水平上存在差异。另外 P16阳性率与 TNM分期也存在一定的相关性,这与文献报道一致〔6〕。淋巴结转移组 P16阳性率明显低于无淋巴结转移组,提示P16异常在结肠癌转移过程中可能起着不可忽视的作用。本实验还发现癌组织浸润深度越深P16表达阳性率越低,说明 P16蛋白的表达与癌组织浸润深度可能有相关性。

结肠癌的恶性转化是由一系列细胞周期调控蛋白基因的遗传性改变引起的,联合检查C-myc与 P16基因表达对预测结肠癌淋巴结转移情况、评价预后具有指导价值。

1 Calvert PM,Frucht H.The genetics of colorectal cancer〔J〕.Ann Intern Med,2002;137(7):603-12.

2 Jonas JC,Laybutt DR,Steil GM,et al.High glucose stimulates early response gene c-myc expression in rat pancreatic beta cells〔J〕.J Biol Chem,2001;276(38):35375-81.

3 Fields WR,Desiderio JG,Putnam KP,et al.Quantification of changes in c-myc mRNA levels in normal human bronchial epithelial(NHBE)and lung adenocarcinoma(A549)cells following chemical treatment〔J〕.Toxicol Sci,2001;63(1):107-14.

4 Kamb A,Gruis NA,Weaver-Fdldhaus J,et al.A cell cycle regulator potentially involved in genesis of many tumor types〔J〕.Science,1994:264-436.

5 Nobefi T,Miura K,Wu DH,et al.Deletion of the cyclin dependent kinase inhibitor gene in multiple human cancers〔J〕.Nature,1994;368:763.

6 Andres A,Maria J.Double versus single renal allografts from aged donors〔J〕.Transplatation,2000;69:2060.