HPLC-MS/MS法检出中药保健品中非法添加的硝苯地平

曲伟

(北京联合大学 北京 100012)

近年来,许多中成药非法添加西药成分,降糖中药中常添加格列本脲和苯乙双胍,降压中药中常添加氢氯噻嗪、硝苯地平等。本实验以市售具有降压作用的保健品口服液LYS为研究对象,采用HPLC-MS/MS法,以中药中常添加的具有降压作用西药为目标进行检测,快速、准确地检出此保健品口服液中含有西药成分硝苯地平。

1 仪器与试药

Waters液质联用仪;旋转蒸发仪;硝苯地平对照品;LYS;甲醇为色谱纯。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备

取硝苯地平对照品9.2mg置于100m L容量瓶中,加丙酮至刻度制成浓度为0.092mg·m L-1的对照品溶液。

2.2 供试品溶液的制备

取供试品,40℃减压蒸至小体积,置于研钵中,加丙酮30m L小心研磨5m in,收集丙酮溶液,重复3次,合并丙酮溶液,备用。

2.3 色谱条件和质谱条件

色谱柱:WatersSunfireC18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇-水(70:30);流速:0.8m L·m in-1;柱温:30℃。电喷雾离子源(ESI),毛细管温度250℃,源电压4.5kV,毛细管电压20V,正负离子检测,扫描方式采用全扫描一级质谱,质量数范围100～1000。测得硝苯地平对照品稀释液见图1。

2.4 线性关系考察

精密吸取浓度为0.092mg·m L-1的硝苯地平对照品溶液1、4、8、12、16、20m L,分别置于50m L容量瓶中,以丙酮稀释至刻度,分别进样20μL,依次进样,测定,以峰面积(y)对浓度(x)计算回归方程为：y=7×106x+1529.2,r=0.9999,表明进样20μL,待测样品中硝苯地平浓度在0.00184～0.0368mg·m L-1范围内呈良好线性关系。

2.5 精密度实验

精密吸取2.1制得得对照品溶液10m L,置于50m L容量瓶中,以丙酮稀释至刻度,分别进样20μL,进样6次,测得峰面积的均值为303899,RSD为0.7%(n=6)。

2.6 稳定性试验

取按照“2.1”、“2.5”项下方法制备的同一份待测溶液,分别于0、1、2、4、6h进样20μL测定,测得峰面积均值为301640 (RSD=0.9%),说明样品在6h内稳定。

2.7 供试品中硝苯地平的测定

2.2制得的供试品按照2.5项下方法制成待测液,以0.45μm孔径滤膜过滤,进样20μL,色谱图见图2。

2.8 样品测定结果

供试品中检出含有西药硝苯地平,每支含量为13.76mg。

3 讨论

本文作者利用HPLC-MS/MS,运用母离子扫描的方式对一例保健品中可能添加的西药进行了检测,包括氢氯噻嗪、吲哒帕胺、硝苯地平、尼群地平、尼莫地平、非洛地平等。结果检出其中添加了硝苯地平,并且进行了方法学验证。本文建立的色谱质谱联用检测方法,样品预处理简单,测量结果准确,为中药中违法添加的硝苯地平检测提供了参考。

[1]赵郑成,向智敏.液相色谱一质谱联用法检出降糖胶囊中的格列本脲和苯乙双胍[J].药学实践杂志,2007,25(6)：388～390.

[2]邬晓鸥,肖丽和.高效液相色谱法检测降糖中药制剂中违法添加的格列吡嗪[J].中国药师,2006,9(1)：46～47.

图1 硝苯地平HPLC-MS/MS [M+Na]+369.3离子流图

图2 保健品LYS 的HPLC-MS/MS [M+Na]+369.3离子流图