微小活检组织的石蜡包埋及切片的制作方法

2010-02-03 07:40赵晓东舒红姜卫国杨向红
中国医科大学学报 2010年1期
关键词:伊红蜡块福尔马林

赵晓东,舒红,姜卫国,杨向红

(中国医科大学 附属盛京医院病理科,沈阳 110004)

微小活检组织的石蜡包埋及切片的制作方法

AMethod about Paraffin Embedding and Section of Biopsy Microsample

赵晓东,舒红,姜卫国,杨向红

(中国医科大学 附属盛京医院病理科,沈阳 110004)

介绍一种环保、简易、有效的微小组织的石蜡包埋方法。

微小组织;石蜡包埋;制片

微小组织的病理制作是病理技术工作中的一个难题,由于体积小,组织经脱水浸蜡等处理后,会变得更小、易丢失或不易找到;同时,由于脱水透明时间掌握不好,易使组织变脆,切出的片子裂隙多,不利于病理诊断。现将工作中摸索出的一种较好的微小组织蜡块及切片的制作方法报告如下:

1 材料与方法

1.1 取材

将临床送检的0.3c m以下的小标本,包括胃镜、肠镜、气管镜、膀胱镜、宫腔镜及各种穿刺的组织(已固定于10%的福尔马林溶液中),置于微孔包埋盒中,立即投入含有2‰伊红的0.9%的氯化钠溶液中,浸泡30m i n左右,使组织着红色。

1.2 蜡块制作

取出包埋盒,放到脱水筐中,置自动脱水机(美国,Th e rm o)中,设置程序为:10%福尔马林溶液中固定2h;分别在85%、90%、95%的乙醇中20m i n,100%乙醇2次各30m i n;二甲苯溶液3次各10m i n;浸蜡2次,分别为10m i n及30m i n。常规包埋,制成蜡块。

1.3 切片及染色

把蜡块放于切片机(德国,Le i c a)上,切片厚度为3μm,烘片后,用自动染色机(德国,MICROM)染色。

2 结果

制成的蜡块及切片见图1、图2。

3 讨论

一般情况下,所取的材料放入包埋盒后,或于空气中暂时放置,或直接投入福尔马林固定液中。如果在送检的小标本较多时,取材时间较长,先取的微小组织暴露在空气中容易干燥变硬,影响染色;如果直接投入福尔马林固定液中,由于其中乙醛的挥发等原因,久而久之,对取材的工作人员健康会造成伤害,对环境造成污染[1]。0.9%的氯化钠溶液是与人体组织等渗的溶液,不会对组织标本及工作人员造成任何损伤,所以我们采用此溶液作为取材时临时保存组织的液体,既维持了组织结构,又保持了组织的湿润,尤其有利于工作人员健康及环境的保护。

微小组织在技术员包埋过程中需仔细观看、查找、核对取材的块数,有时与凝固的石蜡碎屑无法区别。我们在0.9%氯化钠溶液中加入2‰的伊红,使组织着红色。由于适当的伊红染料在一系列处理过程中不脱色,所以使组织在包埋过程中易识别,大大提高了包埋速度和质量。伊红染料是切片染色的染料之一,所以组织上的红色不会影响切片的染色效果。

小组织的脱水、透明及浸蜡的时间要严格掌握,一旦处理不好,组织就会硬脆,切出的片子都是刀痕,无法进行病理诊断。我们确定了脱水、透明及浸蜡的时间,切片质量非常理想。

在日常切片过程中,经常由于无法确定小组织的边界,而使切片组织不全或蜡块切修过度,造成组织丢失。由于加入伊红,使红色组织在白色的蜡块中非常醒目,很容易掌握蜡块的切修深度,保证了切片的质量。

[1]张艺滨,吴传楠,杨慧敏,等.甲醛毒性作用的研究进展[J].吉林医药医院学报,2008,29(4):232-235.

(编辑 武玉欣,英文编辑 郑华川)

R361

B

0258-4646(2010)01-0076-01

赵晓东(1962-),男,技师,中专.

舒红,E-mail:shuhong0302@hotmail.com

2009-05-22

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