维药榅桲提取物对大鼠实验性血栓形成的影响

乌兰巴依尔， 周文婷， 杨永新， 王雪飞， 阿不来提·阿布力孜， 依巴代提·吐呼提， 艾尼瓦尔·吾买尔*

(1.新疆巴州卫生学校，新疆库尔勒841000;2.新疆医科大学，新疆乌鲁木齐830054)

榅桲(Cydonia oblanga Miller，COM)在我国有着悠久历史，是蔷薇科(Rsaceae)榅桲属(Cydonia)的果树［1］，是维吾尔医应用历史悠久的常用药材之一。维文名为比叶(Biye)，别名为蛮檀，英文名Quince。据《新疆维吾尔药志》及《维吾尔常用药材学》记载，榅桲Cydonia oblanga Miller除了降血压、调血脂等作用外，还有补血、补脑、补肾、止咳、止泻、利尿、治胃病、肝病、头晕、心慌、治疗月经不调、心脏病等功效，其温中解暑、消食除胀，治疗中暑吐泻，消化不良、关节疼痛等疾病［2］。

本课题组前期通过对榲挬提取物的药理实验研究，发现COM具有强大的抗凝血和纤溶作用。本实验进一步研究榲挬提取物的抗动、静脉血栓作用和对大鼠血浆中6-酮-前列腺素 F1a(6-keto-PGF1a)，TXB2的影响。

1 仪器、材料、动物

1.1 药品与试剂 榅桲提取物(新疆医科大学药学院药理教研室提供)，阿司匹林(Sigma，No 2000641)，银杏叶片(天津天士力制药有限公司，批号259)，6-keto-PGF1a放免试剂盒(北京普尔伟生物科技有限公司，批号S 10950216)，TXB2放免试剂盒(北京普尔伟生物科技有限公司，批号 S 10950213)。

1.2 仪器 BL1500电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)，KH-120M型台式高速离心机(上海安亭科技仪器厂)，秒表(上海秒表厂)，分析天平(梅特勒-托利多仪器厂)，SK8210HP超声仪(上海科导仪器厂)，自动放免仪(中国科大中佳公司)。

1.3 动物 Wistar大鼠，♂性，49只，体重300～350 g，清洁级，均由新疆医科大学实验动物中心提供，动物合格证字号(SYXK2003-0001)。

2 试验方法

2.1 榅桲水提取物对大鼠颈动脉栓塞的影响［3-5］Wistar大鼠，♂性，49 只，体重300 ～350 g，随机分为7个组:生理盐水组(假手术组)，模型组，榅桲提取物小、中、大剂量(20、40、80 mg/kg)组，阿司匹林组(5 mg/kg)和银杏叶片组(20 mg/kg)，连续灌胃给药14 d，在末次给药1 h后，后腹腔注射3%巴比妥0.5 mL/100 g，将麻醉大鼠，在无菌条件下，将大鼠仰卧位固定于解剖架上，颈部剪毛，常规碘酒酒精消毒，铺巾后沿颈前正中线做长约3 cm切口，分离其左颈总动脉2 cm，其下置小片塑料薄膜(3 cm×1.5 cm)用于保护血管周围组织，将血管测温仪置于已分离的颈动脉远心端，记录其温度后将吸有40%FeCl3溶液的小滤纸片(1 cm×1 cm)敷于左颈动脉上［6-9］。

假手术组用吸有生理盐水的小滤纸片敷于左颈动脉上。记录从敷上滤纸片开始颈总动脉表面温度突降所需时间，即颈总动脉血栓形成时间，即为堵塞时间(occluson time，OT)。用滤纸吸取残血，称血栓重量及计算血栓抑制率。

表1 榅桲提取物对FeCl3致大鼠颈动脉栓塞形成的影响(±s，n=7)

表1 榅桲提取物对FeCl3致大鼠颈动脉栓塞形成的影响(±s，n=7)

与模型组比较，*P＜0.01。

/%生理盐水组组别 动物数/只 剂量/(mg/kg) OT/min 血栓重量/mg 抑制率7----模型组 7 - 8.71±1.20 15.15±0.59 -银杏叶片组 7 20 15.77±4.07* 7.14±1.23* 52.90*阿司匹林组 7 5 19.49±2.52* 6.40±1.53* 57.76*小剂量组 7 20 26.96±3.85* 9.93±1.72* 34.44*中剂量组 7 40 33.28±5.98* 6.96±1.62* 54.04*大剂量组 7 80 40.74±5.80* 5.37.±1.48* 64.52*

2.2 榅桲提取物对大鼠静脉栓塞的影响［6-10］Wistar大鼠，♂性，49只，体重300～350 g，动物分组，给药，麻醉方法同2.1项。在无菌条件下，将大鼠仰卧位固定于架上，腹部剪毛，常规碘酒酒精消毒，铺巾后沿腹部正中切开大鼠腹壁，分离下腔静脉，并于左肾静脉下方预置丝线，备结扎用。结扎下腔静脉关闭好腹腔，结扎后4 h重新打开腹腔，于结扎线下方2 cm处夹闭血管，同时结扎静脉侧枝，纵行剖开血管，观察有无血栓形成，若血栓形成，用滤纸吸取残血，称血栓重量及计算血栓抑制率。结果见表2。

表2 榅桲提取物对大鼠静脉栓塞的影响(±s，n=7)

表2 榅桲提取物对大鼠静脉栓塞的影响(±s，n=7)

与模型组比较，*P＜0.01。

抑制率/%生理盐水组组别 动物数/只剂量/(mg/kg)血栓重量/mg 7---模型组 7 - 19.35±9.51 -银杏叶片组 7 20 7.76±2.43* 59.88*阿司匹林组 7 5 6.53±1.77* 66.27*小剂量组 7 20 10.89±4.02* 43.74*中剂量组 7 40 7.46±2.20* 61.43*大剂量组 7 80 4.96±2.13* 74.35*

2.3 榅桲提取物对对大鼠TXB2和6-kato-PGF1a含量的影响［11-12］Wistar大鼠，♂性，49只，体重300～350 g，动物分组，给药，麻醉及手术方法同2.2项。在无菌条件下，造模90 min后，快速分离腹主动脉，取一次性1 mL注射器吸取消炎痛-EDTA.Na2液约1 mL备用，取一次性3 mL抽血管快速腹主动脉穿刺取血3 mL，即刻将消炎痛-EDTA.Na2液0.2 mL注入抽血管内，颠倒混匀，4℃离心3 500 r/min，15 min，分离血浆，-20℃保存。采用放射免疫法检测大鼠血浆中的6-酮-前列环素(6-keto-PGF1a)、血栓素B2(TXB2)含量。结果见表3。

表3 榅桲提取物对大鼠血浆中TXB2和6-kato-PGF1a含量的影响(±s，n=7)

表3 榅桲提取物对大鼠血浆中TXB2和6-kato-PGF1a含量的影响(±s，n=7)

与模型组比较，*P＜0.05。

组别 动物数/只剂量/(mg/kg)6-keto-PGF1a/(pg/mL)TXB2/(pg/mL)7 - 593.96±357.89 242.20±117.40模型组 7 - 267.22±255.05 717.32.±299.21银杏叶片组 7 20 498.80±30.98* 255.25±199.68*阿司匹林组 7 5 170.60±103.77 78.21±42.47*小剂量组 7 20 558.52±314.22 411.01±225.02中剂量组 7 40 334.77±156.02* 191.55±154.36*大剂量组 7 80 384.42±334.22* 91.59.±62.04生理盐水组*

3 结果

3.1 榅桲水提取物对大鼠颈总动脉栓塞的影响结果如表1显示，与模型组相比，榲桲提取物各剂量组均显著延长OT，显著减轻动脉血栓重量(P＜0.01)。榲桲提取物小、中、大剂量组的血栓抑制率为34.44%、54.04%、64.52%。表明榅桲提取物能延长OT，抑制动脉血栓形成。

3.2 榅桲提取物对大鼠静脉栓塞形成的影响 结果如表2显示，与模型组相比，榲桲提取物各剂量组显著减轻静脉血栓重量(P＜0.01)。榅桲提取物小、中、大剂量组静脉血栓抑制率分别为43.74%、61.43%、74.35%。表明榅桲提取物能显著抑制静脉血栓形成，且呈较好的量效关系。

3.3 榅桲提取物对大鼠血浆中TXB2和6-kato-PGF1a含量的影响［13，14］结果如表 3 显示，与生理盐水组相比，模型组6-keto-PGF1a含量显著降低(P＜0.05)，且TXB2含量显著升高(P＜0.05);与模型组相比，榲桲提取物小、中、大剂量组均明显降低TXB2含量，升高6-keto-PGF1a的含量(P＜0.05)。

4 讨论

FeCl3可损伤血管内皮损伤诱发血小板黏附和聚集，促进血栓形成。静脉结扎使局部血流瘀滞都能引起血管内皮细胞损伤，低氧，可激活凝血因子和凝血酶在局部达到凝血过程所需的浓度，启动内源性凝血系统，内皮细胞变性坏死，使血管内皮下的胶原暴露于血流，可激活内源性和外源性凝血途径使凝血酶、凝血因子活化，使凝血功能亢进。因血管内皮细胞损伤使PGI2合成减少，血浆TXA2合成增加，进一步促进血小板黏附和聚集，TXA2-PGI2间平衡失调，可引起血管收缩，血小板聚集，促进血栓形成。

榅桲提取物各剂量组与模型组比较，均显著延长了OT(P＜0.01);显著减轻动脉和静脉血栓重量(P＜0.01)。均明显降低TXB2含量(P＜0.05)，升高血浆中6-keto-PGF1a的含量(P＜0.05)。实验结果充分证明，榅桲提取物具有抗血栓作用，其作用可能是通过抑制TXA2合成酶，从而使TXA2生成减少，提高6-kato-PGF1a而产生PGI2的途径增强，从而维持TXA2-PGI2间平衡，促进血管扩张，抑制血小板聚集而抑制血栓形成。榅桲提取物抗动脉血栓作用与抑制血小板黏附和聚集有关;抗静脉血栓形成作用与抑制凝血酶、凝血因子有关。榅桲提取物具有较强的抗动、静血栓作用，在抗血栓方面有一定的开发利用价值。

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