黄芪多糖对黄喉拟水龟生长性能、血清生化指标及肠道菌群结构的影响

摘要：【目的】探究饲料中添加不同水平的黄芪多糖对黄喉拟水龟（Mauremys mutica）生长性能、血清生化指标和肠道菌群结构的影响，以期为黄芪多糖在黄喉拟水龟饲料中的应用及黄喉拟水龟的健康养殖提供理论依据。【方法】将初始平均体重为128.36±1.80 g的黄喉拟水龟随机分为5组，分别投喂黄芪多糖含量为0（M0，对照组）、0.25%（M25）、0.50%（M50）、0.75%（M75）和1.00%（M100）的等氮等脂饲料，每组设3个重复，每重复10只龟，投喂60 d后测定其生长性能指标和血清生化指标，以高通量测序分析肠道菌群结构。【结果】生长性能分析结果显示，M25、M50和M75组的黄喉拟水龟的增重率和特定生长率显著高于MO组（Plt;0.05，下同），饲料系数显著低于MO组，其中M50组的增重率和特定生长率最高、饲料系数最低。M25、M50、M75和M100组黄喉拟水龟背甲长、背甲宽和背甲高的日增长与M0组比较均无显著差异（Pgt;0.05，下同）。血清生化指标检测结果显示，M25、M50和M75组的碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性显著高于M0组，M50、M75和M100组的过氧化氢酶活性显著高于MO组；M25、M50和M75组的丙二醛含量显著降低。肠道菌群分析结果显示，M25组群落丰富度指数（Sobs指数和ACE指数）显著高于M0组，群落多样性指数（Shannon指数和Simpson指数）与MO组无显著差异。M50、M75和M100组的Sobs指数、Chaol指数、ACE指数、Shannon指数和Simpson指数与M0组差异均不显著。在门分类水平上，各组丰度占比排名前3的菌群均为厚壁菌门、拟杆菌门和变形菌门，0.25%～1.00%的黄芪多糖对门分类水平的肠道菌群组成无显著影响。在属分类水平上，M50组的瘤胃球菌属1和M75组的汉氏盐单胞菌属相对丰度显著提高；添加0.25%和1.00%的黄芪多糖对属分类水平的肠道菌群组成均无显著影响。【结论】饲料中添加适量的黄芪多糖能有效地促进黄喉拟水龟生长、提高抗氧化能力并改善肠道菌群结构。综合分析，建议饲料中黄芪多糖添加量为0.50%。

关键词：黄芪多糖；黄喉拟水龟；生长性能；血清生化指标；肠道菌群结构

中图分类号：S966.5文献标志码：A文章编号：2095-1191（2024）02-0388-09

Effects of Astragalus polysaccharides on growth performance，serum biochemical indexes and intestinal flora structure of Mauremys mutica

WU Zhi-gang'，ZHANG Hong-yao¹，GAO Ming-zuo¹，YAN Zi-ke¹，TAN Wen-yu¹，HAN Shu-yu²，SHI Jin-gu²，HUANG De-sheng³，LIANG Jing-zhen¹*，HUANG Jun¹*

（'College of Animal Science and Technology，Guangxi University/GuangxiLaboratory of Aquatic Animal Disease Dia-gnosis/GuangxiUniversity Key Laboratory of Aquatic Healthy Breeding and Nutrition Regulation，Nanning，Guangxi

530004，China;²Guangxi Station of Aquaculture Technology Extension，Nanning，Guangxi 530022，China;³Hepu Station of Aquaculture Technology Extension，Beihai，Guangxi 536199，China）

Abstract：[Objective]To investigate the effectsof different levels of Astragalus polysaccharides on the growth perfor-mance，serum biochemical indexes and intestinal flora structure of Mauremysmutica，with aview to providing theoretical basis for the application of Astragalus polysaccharides in the diets of M.mutica and the healthy breeding of M.mutica.【Method]M.mutica with an initial average body weight of 128.36±1.80 g were randomly divided into five groups，and fed isonitrogenous and isofat diets containing 0（M0），0.25%（M25），0.50%（M50），0.75%（M75），and 1.00%（M100）Asragalus polysaccharides，with three replicates of 10M.mutica in each group.After feeding for 60 d，the growth perfor-mance indexes and serum biochemical indexes were measured，and the structure of intestinal flora was analyzed by high- throughput sequencing.[Result]The results of growth performance analysis showed that the weight gain rateand specific growth rate of M.mutica in the M25，M50 and M75 groups were significantly higher than those in the M0 group（Plt;0.05，thesame below），and the feed coefficients were significantly lowerthan those in the M0 group，among which the M50 group had the highest weight gain rate and specific growth rate，and the lowest feed coefficient，and the daily growth rates of the dorsal carapace length，dorsal carapace width and dorsal carapace height of M.mutica in the M25，M50，M75 and M100 groups had no significant difference from those of the M0 group（Pgt;0.05，the same below）.The results of serum biochemical indexes showed that the activities of alkaline phosphatase and superoxide dismutase in M25，M50 and M75 groups were significantly higher than that of M0 group，and the activities of catalase in M 50，M75 and M100 groups were significantly higher than that of M0 group;and the contents of malondialdehyde in M25，M50 and M75 groups were significantly lower.The results of intestinal flora analysis showed that the community richness indexes（Sobs index andACE index）were significantly higher in M25 group than in M0 group，and the community diversity in-dexes（Shannon index and Simpson index）were not significantly different from those of MO group.The differences of Sobs index，Chaol index，ACE index，Shannon index and Simpson index were not significantly different from those of M0 group in M50，M75 and M100 groups.Atthe phylum level，the top 3 groups in terms of relative abundance were Fir-micutes，Bacteroidetes and Proteobacteria，and 0.25%-1.00%of Astragalus polysaccharides did not significantly affect the composition of intestinal flora at the phylum level.At the genus level，the relative abundanceof Ruminococcus 1 in the M50 group and Halomonas in the M75 group increased significantly;the addition of 0.25%and 1.00%of Astragalus polysaccharide had no significant effect on the composition of intestinal flora at the genus level.【Conclusion]Addition of appropriate amount of Astragalus polysaccharide to feedcan effectively promote the growth of M.mutica，improve anti-oxidant capacity and improve the structure of intestinal flora.It is recommended to add 0.50%of Astragalus polysacha-ride to the feed.

Key words：Astragalus polysaccharide;Mauremysmutica;growth performance;serum biochemical indicators;in-testinal flora structure

Foundation items：National Natural Sciences Foundation of China（202100475）;Guangxi Natural Science Founda-tion（2018GXNSFAA138167）

0引言

【研究意义】黄喉拟水龟（Mauremysmutica）又名石龟、黄板龟等，隶属于爬行纲（Reptilia）龟鳖目（Chellonia）地龟科（Geoemydidae）拟水龟属（Mau-remys），主要分布于广西、广东及海南等地，具有较高的食用和药用价值（牟超盛等，2021），在我国水产养殖业中占有重要地位。但目前黄喉拟水龟的高密度养殖模式易导致病害肆虐，养殖户通常滥用或乱用抗生素，从而引起细菌耐药和食品安全问题（陈笑冰等，2022;魏华等，2023）。研究表明，许多中药提取物能通过增强动物免疫力来降低发病率，可作为潜在的免疫增强剂（谭晓晨等，2022;佟延南等，2022;吴俊等，2022）。黄芪多糖（Astragalus polysac-charides）通过黄芪酒精过滤和沉淀提取而得，其组成成分有葡萄糖、阿拉伯糖等，具有抗炎、调节免疫、抗氧化和改善肠道结构等生物学功能（向枭等，2011;Nejatian et al.，2013;王煜恒等，2018;张杰等，2022;向静，2023），毒副作用较低且不易产生耐药性（蔡岩，2017）。因此，研究黄芪多糖对黄喉拟水龟生长性能、血清生化指标及肠道菌群结构的影响，对提高黄喉拟水龟机体抗病力以确保其健康养殖和有效病害防控具有重要意义。【前人研究进展】目前已有较多关于黄芪多糖在水产养殖动物中应用的报道。

在齐口裂腹鱼（Schizothorax prenanti）饲料中添加黄芪多糖能明显促进其生长速度及免疫能力（向枭等，2011）;在草鱼（Ctenopharyngodon idellus）的饲料中添加一定水平的黄芪多糖可提高草鱼的免疫力和对嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）感染的抵抗力（刘春花等，2017）;在中华鳖（Pelodiscus sinensis）饲料中添加黄芪多糖能显著增强中华鳖抵抗嗜水气单胞菌的能力（杨移斌等，2018）;在杂交鳢（Channamaculata Q×C.argusd）饲料中添加一定量的黄芪多糖能促进其生长速度、消化能力及免疫力（王煜恒等，2018）;在淇河鲫（Carassius auratus）饲料中添加黄芪多糖可促进淇河鲫生长，增强其抗氧化能力和抵御细菌感染的抗病力（张杰等，2022）;在吉富罗非鱼（Oreochromis niloticus）饲料中添加适量的黄芪多糖可提高其生长性能、免疫力及对无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）的抵抗力（杨政高等，2023）;在黄鳝（Monopterus albus）饲料中添加黄芪多糖有利于增加黄鳝肠道菌群的多样性和丰富度，优化肠道菌群结构（向静，2023）;在长江鲟幼鱼（Acipenser dabryanus）饲料中添加适量的黄芪多糖对幼鱼抗应激能力和肠道消化酶功能等有强化作用（张建明等，2023）。【本研究切入点】黄芪多糖对多种水产养殖动物有促进生长、提高抵抗力和抗氧化能力及优化肠道菌群等作用，但关于黄芪多糖对黄喉拟水龟生长性能、血清生化指标及肠道菌群影响的研究尚未见报道。【拟解决的关键问题】通过在黄喉拟水龟饲料中添加不同水平的黄芪多糖，探究其对黄喉拟水龟生长性能、血清生化指标及肠道菌群的影响，以期为黄芪多糖在黄喉拟水龟饲料中的应用及黄喉拟水龟的健康养殖提供理论依据。

1材料与方法

1.1试验材料

试验所用黄喉拟水龟购于南宁市碧艳龟鳖经营部。黄芪多糖（产品标准编号Q/RJSK036-2019）购于河南省驻马店市确山县富博商贸有限公司，其有效含量不低于70%。基础饲料（产品标准编号Q/QX004-2023）购于广东省佛山市顺德区全兴水产饲料有限公司，其产品分析保证值为粗蛋白≥45.0%、粗脂肪≥3.0%、粗纤维≤3.0%、粗灰分≤16.0%、总磷≥0.8%、水分≤12.0%、赖氨酸≥2.0%。将基础饲料和黄芪多糖按比例进行称重和混合，加入适量的蒸馏水，再用直径2.5mm的挤压膨化机进行制粒，随后放入烘箱烘干后取出，制成黄芪多糖含量分别为0、0.25%、0.50%、0.75%和1.00%的等氮等脂沉性饲料，置于-20℃冰箱储存。

1.2试验方法

饲养试验在广西大学水产教学科研基地进行。养龟箱为塑料材质（长×宽×高为70 cm×45 cm×18 cm）。试验龟入箱前暂养7d，暂养结束后，将龟禁食24 h，选取健康无伤病、活力强、规格相近的黄喉拟水龟150只用于试验，其初始平均体重为128.36±1.80 g。将挑选好的150只黄喉拟水龟随机分5组，分别命名为M0、M25、M50、M75和M100组，按体重的3%进行饱食投喂，每2天投喂1次；其中M0组投喂不含黄芪多糖的基础饲料（对照组），M25、M50、M75和M1004个试验组分别投喂含0.25%、0.50%、0.75%和1.00%黄芪多糖的试验饲料。每组设3个重复，每重复10只龟，喂食1h后清理残饵及污物，观察黄喉拟水龟的生命状况，记录其死亡个数，养殖试验共60 d。养龟箱中水温保持在25～30℃。动物试验已由广西大学实验动物伦理委员会批准，批准号为GXU-2024-013。

1.3样品采集

试验结束后，将黄喉拟水龟禁食1d，同时对其称重并记录终末体重，用游标卡尺测量其背甲长、背甲宽和背甲高。每组随机挑选6只黄喉拟水龟进行低温麻醉后，用无菌注射器在颈动脉取血，将采集的血样置于4℃冰箱静置5h，然后进行离心收集血清，-80℃冰箱保存，用于血清生化指标分析；解剖后取肠道内容物，用磷酸盐缓冲液（PBS）洗涤后转移至2 mL冻存管，-80℃冰箱保存，用于肠道菌群分析。

1.4测定指标及方法

1.4.1生长性能指标测定测定试验龟的增重率（Weight gain ratio，WGR）、特定生长率（Specific growth ratio，GR）、成活率（Survival rate，SR）和饲料系数（Feed conversion ratio，FCR），计算公式如下：

WGR（%）=（试验龟终末体重-试验龟初始体重）/试验龟初始体重×100

SGR（%/d）=[In（试验龟终末体重）-In（试验龟初始体重）]/试验天数×100

SR（%）=试验终末龟只数/试验初始龟只数×100

FCR=摄食饲料重量/（试验龟终末体重-试验龟初始体重）

1.4.2血清生化指标测定丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、碱性磷酸酶（AKP）、酸性磷酸酶（ACP）、过氧化氢酶（CAT）活性测定试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。各指标测定均按试剂盒说明书进行操作。

1.4.3肠道菌群测定从-80℃冰箱取出黄喉拟水龟肠道内容物样品并置于冰上融化，按照DNA提取试剂盒提取肠道微生物总DNA。PCR扩增细菌16S rRNA序列V3和V4区，构建肠道菌群DNA文库。使用Qubit Fluorometer荧光定量仪（美国Thermo-Fisher公司）检测文库DNA质量浓度，使用Qseq100 DNA分析仪检测文库DNA长度分布，对文库DNA的摩尔浓度进行定量（KAPA文库定量试剂盒），作为文库混合标准。将文库进行混合和变性，利用Illumina NovaSeq 6000测序平台进行双末端测序，将得到的成对序列进行拼接，使用Cutadapt去除序列中的引物、低质量序列、含有N碱基的序列及长度小于100 bp的序列，最后得到有效数据（Clean data）。将相似度大于97%的序列聚为同一个操作分类单元（Operational taxonomic unit，OTU），通过Mothur的classify.seqs命令，将OTU序列相似度最高且可信度达80%以上的物种信息用于OTU注释。采用群落丰富度指数（Sobs指数、Chaol指数和ACE指数）和群落多样性指数（Shannon指数和Simpson指数）对肠道菌群进行Alpha多样性分析。使用R语言工具绘制Venn图和群落结构柱状图。

1.5统计分析

试验数据以Excel 2019和SPSS 26.0进行统计分析，采用单因素方差分析法（One-way ANOVA）进行数据分析，差异显著则以Duncan's法进行多重比较。

2结果与分析

2.1黄芪多糖对黄喉拟水龟生长性能的影响

由表1可知，随着黄芪多糖添加量的逐渐增加，试验龟的增重率和特定生长率均呈先升高后降低的变化趋势，饲料系数则先降低后升高。相比M0组，M25、M50和M75组的增重率和特定生长率显著提高（Plt;0.05，下同），饲料系数显著降低，其中M50组的增重率和特定生长率最高、饲料系数最低；M25和M75组的增重率、特定生长率及饲料系数差异均不显著（Pgt;0.05，下同）。M25、M50和M75组的成活率与M0组差异不显著，M100组的增重率、特定生长率、成活率和饲料系数与M0组均无显著差异。该结果表明在基础饲料中添加0.25%～0.75%的黄芪多糖可有效提高黄喉拟水龟的生长性能，其中当黄芪多糖添加量为0.50%时的促生长效果最明显。

由表2可知，M25、M50、M75和M100组黄喉拟水龟的背甲长、背甲宽和背甲高的日增长与M0组比较均无显著差异。该结果表明在基础饲料中添加黄芪多糖对黄喉拟水龟背甲长、背甲宽和背甲高的日增长无显著影响。

2.2黄芪多糖对黄喉拟水龟血清生化指标的影响

由表3可知，随着黄芪多糖添加量的逐渐增加，试验龟的AKP和SOD活性先升高后降低，MDA含量先降低后升高；相比M0组，M25、M50和M75组的AKP和SOD活性显著增加，其中M50组的AKP和SOD活性最高；M25、M50和M75组MDA含量显著降低；M50、M75和M100组CAT活性显著高于M0和M25组；M25、M50、M75和M 100组ACP活性与M0组差异均不显著。该结果表明在饲料中添加0.25%的黄芪多糖可显著增加黄喉拟水龟血清的AKP和SOD活性，降低MDA含量；添加0.50%和0.75%的黄芪多糖可显著增加AKP、SOD和CAT活性，降低MDA含量；添加1.00%的黄芪多糖可显著增加CAT活性。

2.3黄芪多糖对黄喉拟水龟肠道菌群结构的影响

2.3.1 OTUs数量比较OTUs数量对比韦恩图（图1）显示，5个组的肠道菌群微生物OTUs总数为10321种，共有种类为2822种，M0、M25、M50、M75和M100组的OTUs数量及其占比分别为5507种（53.36%）、6825种（66.13%）、6242种（60.48%）、6223种（60.29%）和6403种（62.04%）;特有OTUs数量及其占比分别为358种（3.47%）、714种（6.92%）、537种（5.20%）、520种（5.04%）和520种（5.04%）。

2.3.2 Alpha多样性分析Alpha多样性指数分析结果（表4）显示，5个组的覆盖度在96.41%～97.53%，表明测序量充足，可反映黄喉拟水龟肠道菌群的真实情况。M25组的Sobs指数和ACE指数显著高于M0组，Chaol指数、Shannon指数和Simpson指数与M0组差异均不显著。M50、M75和M100组的Sobs指数、Chaol指数、ACE指数、Shannon指数和Simpson指数与M0组差异均不显著。该结果表明，在饲料中添加0.25%的黄芪多糖可提高肠道菌群的群落丰富度。

2.3.3肠道菌群组成分析门分类水平的肠道菌群组成（图2）显示，5个组共检测出19个门，各组中相对丰度占比前3的细菌门均为厚壁菌门（Fir-micutes）、拟杆菌门（Bacteroidetes）和变形菌门（Pro-teobacteria），其丰度依次为M0组50.38%、41.84%和6.37%，M25组45.42%、44.78%和8.34%，M50组49.50%、38.65%和10.44%，M75组52.17%、33.84%和11.26%，M100组49.87%、38.81%和6.97%，各组中这3个细菌门丰度之和均超过95%。单因素方差分析结果表明，在饲料中添加0.25%～1.00%的黄芪多糖对门分类水平的肠道菌群组成无显著影响。

属分类水平的肠道菌群组成（图3）显示，5个组相对丰度排前15的菌属包括毛螺菌科未分类属（Lachnospiraceae unclassified）、拟杆菌属（Bacteroi-des）、瘤胃球菌科未分类属（Ruminococcaceae unclas-sified）、普雷沃氏菌科未分类属（Prevotellaceaeunclas-sified）、汉氏盐单胞菌属（Halomonas）、拟杆菌科未分类属（Bacteroidales unclassified）、Muribaculaceaege属、狭义梭菌属1（Clostridium sensu stricto 1）、瘤胃球菌属1（Ruminococcus 1）、Muribaculaceae科未分类属（Muribaculaceae unclassified）、梭菌目未分类属（Clostridiales unclassified）、罗姆布茨菌属（Rombout-sia）、瘤胃梭菌属6（Ruminiclostridium 6）、埃希氏菌-志贺氏菌属（Escherichia Shigella）、副拟杆菌属（Para-bacteroides）。单因素方差分析结果显示，M50组瘤胃球菌属1丰度（5.80%）显著高于M0组（0.45%），M75组汉氏盐单胞菌属丰度（9.89%）显著高于M0组（4.68%）。该结果表明，在饲料中添加0.50%的黄芪多糖可显著提高瘤胃球菌属1丰度；添加0.75%的黄芪多糖可显著提高汉氏盐单胞菌属丰度；添加0.25%和1.00%的黄芪多糖对属分类水平的肠道菌群组成无显著影响。

3讨论

3.1黄芪多糖对黄喉拟水龟生长性能的影响

中药对水产动物具有诱食性（张艳秋和詹勇，2005），黄芪常被用作促生长的水产饲料添加剂（李春静等，2019）。从黄芪根茎提取的黄芪多糖可增强水产动物将营养物质转化为蛋白质的能力，提高水产动物消化酶活性及抗微生物能力，从而促进水产动物生长（李宏全等，2008;张建明等，2023）。本研究中，随着黄芪多糖添加量的逐渐增加，试验龟的饲料系数先降低后升高，当黄芪多糖添加量为0.50%时饲料系数达最低，当添加量增至0.75%时饲料系数有所上升但仍显著低于M0组，饲料系数变化趋势与前人对银鲫（Carassius auratus gibelio）（王永玲和蔡春芳，2002）、齐口裂腹鱼（向枭等，2011）等的研究结果相似，该结果可能与黄芪多糖能促进黄喉拟水龟的进食、消化与吸收，进而提高饲料转化率有关（白钰迪，2023;张荣浩等，2023）。试验龟增重率和特定生长率随着黄芪多糖添加量的增加呈先升高后下降趋势，当黄芪多糖添加量为0.50%时，增重率和特定增长率均达最高；当添加量为0.75%时增重率与特定增长率虽有所下降但仍显著高于M0组，该变化趋势与前人对杂交鳢（王煜恒等，2018）、中华鳖（杨移斌等，2018）和淇河鲫（张杰等，2022）等的研究结果类似，推测黄芪多糖的生物活性物质可能通过促进黄喉拟水龟的蛋白质合成，增强营养物质转化为蛋白质的能力，从而加快黄喉拟水龟生长速度（李宏全等，2008;向静，2023）。当黄芪多糖添加量继续增加至1.00%时，黄喉拟水龟的生长性能反而出现回落，与M0组无显著差异，表明过高剂量的黄芪多糖并不能促进黄喉拟水龟的生长，其原因仍需进一步研究。本研究中，M25、M50、M75和M100组的背甲长、背甲宽和背甲高的日增长与M0组相比差异均不显著。已知龟背甲生长所需营养物质主要包括钙和磷等（王潜潜，2023），推测黄芪多糖的添加并无促进背甲对钙或磷等营养物质吸收的作用，因此不同浓度黄芪多糖组试验龟的背甲长、背甲宽和背甲高日增长差异不显著。本研究中，添加0.25%～0.75%的黄芪多糖能促进黄喉拟水龟的生长并改善饲料系数，当黄芪多糖添加量为0.50%时其促生长作用最佳。

3.2黄芪多糖对黄喉拟水龟血清生化指标的影响

黄芪多糖具有增强机体免疫功能、促进机体抗氧化等作用（李春静等，2019）。血清生化指标是判断动物机体内环境稳定及营养代谢是否正常的综合指标（薛小翠等，2023）。AKP参与磷酸基团的转移和代谢，在消除病原体、细胞吞噬等过程中发挥重要作用；ACP是溶酶体的重要特征性酶，与动物机体的免疫水平有关（杨振燕等，2023）。当机体长期处于恶劣环境时会产生大量活性氧自由基，SOD能将动物机体中过量的活性氧自由基转化为氧气和过氧化氢，而CAT能分解过氧化氢。大量自由基会攻击细胞膜导致脂质过氧化反应从而转化为MDA，造成动物机体损伤，因此MDA含量间接反映动物机体的受损伤程度（王海瑞等，2022）。本研究中，随着黄芪多糖添加量的逐渐增加，试验龟AKP和SOD活性先升高后降低，MDA含量先降低后升高，该变化趋势与前人对杂交鳢（王煜恒等，2018）和长江鲟幼鱼（张建明等，2023）的研究结果相似。本研究中，黄芪多糖对ACP活性影响不显著;相比M0组，M25、M50和M75组的AKP和SOD活性显著提高，M50、M75和M100组的CAT活性显著提高，M25、M50和M75组的MDA含量显著降低；当黄芪多糖添加量为0.50%时，试验龟的AKP、SOD和CAT活性均达最高值MDA含量达最低值，表明适量的黄芪多糖可增强黄喉拟水龟血清中AKP、SOD和CAT活性，并降低MDA含量，推测适量的黄芪多糖能提高黄喉拟水龟的抗病力和抗氧化能力，降低机体氧化应激水平。但黄芪多糖对黄喉拟水龟的抗病力和抗氧化能力的增强作用与其添加量之间并不呈正相关关系，当黄芪多糖添加量继续增加至1.00%时，试验龟的AKP和SOD活性显著下降、MDA含量显著增加，与M0组无显著差异，说明过高剂量的黄芪多糖并不能增强黄喉拟水龟的抗病力和抗氧化能力，具体原因有待深入研究。综上所述，添加0.25%～0.75%的黄芪多糖能提高黄喉拟水龟的抗氧化能力和抗病力、减轻机体过氧化损伤，当黄芪多糖添加量为0.50%时其促抗氧化能力和促抗病力作用最佳。

3.3黄芪多糖对黄喉拟水龟肠道菌群结构的影响

肠道菌群对机体吸收营养物质能力、免疫力和肠道健康等有重要影响（黄鑫玮等，2015）。Alpha多样性指数可反映肠道菌群的群落丰富度和多样性，Sobs指数、Chaol指数和ACE指数越大，说明肠道菌群的群落丰富度越高；Shannon指数越大、Simp-son指数越小，说明肠道菌群的群落多样性越高（彭祖想等，2023）。本研究结果表明，M25组的Sobs指数和ACE指数显著增加，而M50、M75和M100组群落丰富度指数增加不显著，究其原因可能是较高含量的黄芪多糖对肠道有害菌的生长有一定抑制作用（储德胜，2023），因而较高水平黄芪多糖添加组的群落丰富度比M25组显著下降。已有文献报道，厚壁菌门、变形菌门和拟杆菌门是鱼类肠道核心菌群，这3个门丰度之和通常占90%以上，在营养吸收和免疫反应中发挥重要作用（Rimoldi et al.，2018）。本研究中，各组相对丰度占比为前3的细菌门为厚壁菌门、拟杆菌门和变形菌门，3个门的相对丰度在组间差异不显著，其相对丰度之和均超过95%，说明黄喉拟水龟肠道核心菌群组成与鱼类基本相同，在饲料中添加黄芪多糖未改变黄喉拟水龟肠道核心菌群的组成和丰度。属分类水平的肠道菌群分析结果显示，黄芪多糖可分别显著提高瘤胃球菌属1和汉氏盐单胞菌属的相对丰度。瘤胃球菌属1可促进肠道丁酸和乙酸的产生和氨基酸代谢，从而减轻炎症反应、抑制肠道中有害细菌生长，增强免疫能力（李邈宇，2023）。本研究中，随着黄芪多糖添加量的增加，瘤胃球菌属1的相对丰度先升高后降低，M50组的相对丰度显著高于M0组，说明添加0.50%的黄芪多糖可刺激瘤胃球菌属1的增殖，有助于改善黄喉拟水龟的肠道菌群、增强机体抗病力和减少肠道炎症的发生。水产动物对饲料的消化吸收与肠道消化酶密切相关，饲料的营养成分含量会影响消化酶活性（秦骥等，2023）。汉氏盐单胞菌属能分泌多种消化酶，促进动物肠道消化（刘慧玲等，2012）。本研究中，随着黄芪多糖添加量的增加，汉氏盐单胞菌属相对丰度先升高后降低，M75组的相对丰度显著增加，与向静（2023）对黄鳝的研究结果相似，推测0.75%的黄芪多糖可通过促进汉氏盐单胞菌属的增殖，提高黄喉拟水龟肠道消化酶活性，从而提高肠道消化能力。依据肠道菌群分析结果，当黄芪多糖添加量为0.50%和0.75%时可改善黄喉拟水龟肠道菌群结构。

4结论

饲料中添加适量的黄芪多糖可提高黄喉拟水龟的增重率和特定生长率，降低饲料系数，提高黄喉拟水龟生长性能；增强黄喉拟水龟血清AKP、SOD和CAT活性，降低MDA含量，提高黄喉拟水龟的抗氧化能力和抗病力；改善黄喉拟水龟肠道菌群组成，对黄喉拟水龟的肠道健康具有积极作用。综合分析，建议饲料中黄芪多糖添加量为0.50%。

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（责任编辑 王晖）