银耳多糖的纯化及其生物活性

摘 " "要： 为了得到纯度更高的银耳多糖（TFPS），采用AB-8大孔树脂吸附法、酶法、三氯乙酸（TCA）法、D-葡萄糖？啄-内脂（GDL）法和聚酰胺法对粗制银耳多糖（CTFPS）进行纯化即脱蛋白处理。以多糖损失率和蛋白质脱除率为依据选取脱蛋白效果最佳的方法，并通过单因素实验优化银耳多糖脱蛋白工艺条件。利用红外和 SEM 对脱蛋白前后的银耳多糖进行结构分析，并结合抗氧化活性和吸湿保湿性能测试，对脱蛋白前后的银耳多糖进行生物活性对比。结果表明：AB-8 大孔树脂吸附法的脱蛋白效果最佳，最优工艺条件为CTFPS水溶液质量浓度 5 mg/mL、AB-8 大孔树脂用量 100 mg/mL、吸附时间 5 h、吸附温度 20 ℃；在此条件下，蛋白质脱除率为 82.47%，多糖损失率为 18.24%，且银耳多糖脱蛋白纯化后的抗氧化活性和吸湿保湿性能均优于未脱蛋白银耳多糖。

关键词： 银耳多糖（TFPS）；脱蛋白；结构分析；抗氧化活性

中图分类号： TS201.2 " " " " " " 文献标志码： A " " " " " " " "文章编号： "１51１－０２４Ｘ（２０24）０2－００60－08

Purification and biological activity of Tremella fuciformis polysaccharides

HOU Yanhui1，2， LI Xige1，2， ZHANG Fengyi1，2， JIANG Chaoxian1，2， ZHANG Jiawei1，2

（1. School of Material Science and Engineering， Tiangong University， Tianjin 300387， China； 2. State Key Laboratory of Separation Membranes and Membrane Processes， Tiangong University， Tianjin 300387， China）

Abstract： In order to obtain a purer Tremella fuciformis polysaccharide （TFPS）， the crude Tremella fuciformis polysaccharide （CTFPS） is purified with AB-8 macroporous resin method， enzymatic method， trichloroacetic acid （TCA） method， and glucono-delta-lactone（GDL） method， respectively. Based on the loss rate of polysaccharide and re-moval rate of protein， the method with the best deproteinization effect was selected from five different deproteinization methods， and the process conditions for deproteinization of TFPS were optimized through single factor experiments. The structure of TFPS before and after deproteinization was analyzed using IR and SEM. Meanwhile， the bioactivity of TFPS before and after deproteinization was compared through the antioxidant activity and moisture absorption and moisturizing property tests. The results showed that adsorption method with AB-8 macroporous resin was the best for protein removal， and the optimal process conditions were aqueous concentration of CTFPS of 5 mg/mL， dosage of AB-8 macroporous resin of 100 mg/mL， adsorption time of 5 h， and adsorption temperature of 20 ℃. Under these conditions， the removal rate of protein was 82.47% and the loss rate of polysaccharide was 18.24%. Moreover， the antioxidant activity， moisture-absorbing and moisturizing properties of TFPS after deproteinization were stronger than those without deproteinization.

Key words： Tremella fuciformis polysaccharide（TFPS）； deproteinization； structural analysis； antioxidant activity

银耳是担子菌门真菌的子实体，既是一种具有经济价值的食用菌，又是中医学中久负盛名的良药[1]。银耳子实体中的主要活性成分是银耳多糖 （Tremella fuciformis polysaccharide，TFPS）[2- 3]。相关研究表明，银耳多糖具有抗肿瘤、抗氧化、保湿、降血脂和抗炎抑菌等功能，可应用在药品、化妆品和食品等多个领域[4-8]。常用的 TFPS提取方法是水提醇沉法[9]。

水提醇沉法制得的粗制银耳多糖 （CTFPS） 中含有很多的杂质，包括色素、蛋白质和少量的无机盐，而蛋白质的存在可能会影响多糖的生物活性。因此，为了得到更高纯度的银耳多糖，需要对 CTFPS 进行纯化处理，即脱蛋白处理。常见的蛋白质脱除方法有 Sevage 法、酶法、盐酸法、盐析法、聚酰胺法、大孔树脂吸附法和三氯乙酸 （TCA） 法等[10-11]。其中，盐酸法和 TCA 法蛋白质脱除的效率最高[12]，但是多糖的保留率也低；而 Sevage 法不适用于食品工业加工。

蛋白质脱除方法的不同会导致多糖的糖含量、得率和活性的不同。目前，大多数学者都聚焦于银耳多糖的提取优化，并对 CTFPS 进行抗氧化测试及药理学研究，对有关脱除蛋白前后对银耳多糖活性的研究较少。本研究对 CTFPS 进行不同的脱蛋白处理，以多糖损失率和蛋白质脱除率为指标找出最佳脱蛋白方法，对该方法进行工艺优化，并比较银耳多糖脱蛋白前后的抗氧化活性和吸湿保湿性能。

1 实验部分

1.1 实验材料与仪器

材料：银耳子实体，市售福建古田银耳；无水乙醇，山东博城化学有限公司产品；1，1-二苯基-2-三硝基苯肼 （DPPH），上海麦克林生化科技有限公司产品；苯酚，天津市永大化学试剂有限公司产品；硫酸、氢氧化钠，天津市风船化学试剂科技有限公司产品；刚果红、TCA、考马斯亮蓝 G250、牛血清白蛋白、D-葡萄糖酸δ-内酯 （GDL），上海阿拉丁生化科技股份有限公司产品。以上试剂均为分析纯。

仪器：HJ-3 型数显恒温磁力搅拌器，巩义市予华仪器有限责任公司产品；TU-1810 型紫外-可见分光光度计 （UV），上海美谱达仪器有限公司产品；Nicolet-iS50 型傅里叶红外光谱仪（FI-IR），德国 ThermoFisher 公司产品；SU3500 型扫描电子显微（SEM），日本 Hitachi 公司产品。

1.2 CTFPS 提取工艺

取 3 g 银耳子实体粉碎，过 200 目筛，以质量浓度 1/60 g/mL，湿法均质打浆 4 min，在 90 ℃ 下水提 7 h，之后用 200 目滤袋抽滤 20 min，滤渣后再次水提 2 h，合并两次滤液。滤液浓缩后，以 4 倍体积的 95%（体积分数）乙醇沉淀 12 h。将醇沉溶液在 8 000 r/min 下离心 3 min，去除上清液，沉淀复溶于 10 mL 水中，冻干 12 h 后得到 CTFPS 粉末。

1.3 CTFPS 脱蛋白工艺

配制质量浓度 5 mg/mL 的 CTFPS 水溶液，采用不同工艺进行蛋白质脱除。

（1） AB-8大孔树脂吸附法（AB-8吸附法）[13]。AB-8 大孔树脂在使用前需要进行预处理，除去合成过程中的部分杂质和致孔剂。预处理过程为：先用乙醇浸泡 6 h，抽滤后洗至无醇味，用 1 mol/L 的 HCl 溶液浸泡 2 h，抽滤后用 1 mol/L 的 NaOH 溶液浸泡 2 h，抽滤后用蒸馏水洗至 pH 中性，用蒸馏水浸泡保存至 4 ℃ 冰箱中备用。将预处理后的 AB-8 大孔树脂进行抽滤，称取 2 g 湿重的大孔树脂加入 20 mL CTFPS 水溶液中，封口，于 30 ℃ 水浴锅中静态吸附 3 h，抽滤后冻干得到脱蛋白银耳多糖。探究 CTFPS 水溶液质量浓度、AB-8 大孔树脂用量、吸附时间、吸附温度对蛋白质脱除率的影响，平行试验3组，取其平均值，以获得 AB-8 吸附法脱蛋白得到纯化多糖 TFPS的优化工艺。

（2） 酶法[14]。取 CTFPS 水溶液 20 mL，加入 20 mg/mL 木瓜蛋白酶（活力值为6 万 U/g）， 50 ℃ 水浴锅中酶解 1 h 后，升高温度至 90 ℃ 灭酶 10 min，冷却至室温。在 8 000 r/min 下离心5 min，除去沉淀后冻干得到脱蛋白银耳多糖。

（3） TCA法[15]。取 CTFPS 水溶液 20 mL，用质量分数为10%的 TCA溶液将其 pH 值调至 3.0，于4 ℃ 下放置 12 h，抽滤除去沉淀后冻干得到脱蛋白银耳多糖。

（4） GDL法[16]。取 CTFPS 水溶液 20 mL，加入质量分数 为2%的 GDL 溶液，使 GDL 的最终质量分数达到 0.5%，45 ℃ 水浴锅中反应 2 h 后，在 8 000 r/min 下离心 5 min，除去沉淀后冻干得到脱蛋白银耳多糖。

（5） 聚酰胺法[17]。选用 60～100 目的聚酰胺粉，使用前进行预处理。预处理过程为：先用乙醇浸泡 6 h，抽滤后洗至无醇味，用 1 mol/L 的 HCl 溶液浸泡 2 h，抽滤后用 1 mol/L 的 NaOH 溶液浸泡 2 h，抽滤后用蒸馏水洗至 pH 中性，60 ℃ 烘箱中烘干备用。取 CTFPS 水溶液 20 mL，加入已处理好的聚酰胺 2 g，30 ℃ 水浴锅中静态吸附 3 h，抽滤后冻干得到脱蛋白银耳多糖。

1.4 性能测定与结构表征

1.4.1 不同工艺的脱蛋白效果分析

不同工艺的脱蛋白效果通过多糖损失率和蛋白质脱除率来评价。

（1） 多糖损失率的测定：银耳多糖的总糖含量按照苯酚-硫酸法进行测试[18]。以无水葡萄糖为标准品，标准曲线为： Y=9.495 2X+ 0.009 9，R2 = 0.992，适用范围为 0～0.1 mg/mL。按照式 （1） 计算多糖损失率：

式中：W1 为多糖损失率（%）；ρ1 为脱蛋白前溶液中的多糖含量；ρ2 为脱蛋白后溶液中的多糖含量。

（2） 蛋白质脱除率的测定：银耳多糖的蛋白质含量按照考马斯亮蓝法进行测试[19]。以牛血清白蛋白为标准品，标准曲线为：Y = 0.514 6X + 0.012 8，R2 = 0.997，适用范围为0.1～0.9 mg/mL。按照式（2）计算蛋白脱除率：

式中：W2 "为蛋白质脱除率 （%）；ρ3 为脱蛋白前溶液中的蛋白质含量；ρ4 为脱蛋白后溶液中的蛋白质含量。

1.4.2 样品的结构表征

（1） FT-IR 测试[20]：取5 mg 多糖样品，用100 mg KBr 压片，使用红外光谱仪通过红外检查 CTFPS 和 TFPS 的官能团，波长范围为4 000～600 cm-1。

（2） SEM 测试[21]：使用导电胶将 CTFPS 和 TFPS 连接到样品台上，然后喷涂薄金层。将喷金样品置于SEM 中，在100 倍放大倍数下观察2个多糖样品的形态。

1.4.3 体外抗氧化性测定

将CTFPS 和 TFPS 样品分别配制为2 mg/mL 的溶液，并稀释为 0.1、0.2、0.5、1.0、1.5 mg/mL 的样品待测液。

（1） 还原力：参考文献[22]，取不同浓度的样品待测液1 mL，分别加入0.2 mol/L pH值为6.6 的磷酸盐缓冲液2.5 mL 及质量分数为 1%的铁氰化钾溶液2.5 mL，混匀；于50 ℃ 水浴锅中反应20 min 后，加入2.5 mL 质量分数为10% 的TCA 溶液，于 4 000 r/min 离心10 min；取上清液2.5 mL，加入2.5 mL 蒸馏水和0.5 mL 质量分数为0.1% 的FeCl3 溶液混匀，静置10 min；于700 nm波长处测定吸光度 Ax，以蒸馏水代替 FeCl3 溶液作为空白调零 A0。通过式 （3） 计算还原力 A1，该值越高说明样品的还原性越高：

A1 = Ax - A0（3）

（2） DPPH 自由基清除能力：参考文献[23]，取不同浓度的样品待测液3 mL，加入1 mL DPPH（0.1 mmol/mL）的无水乙醇溶液充分混匀震荡，室温下避光反应1 h，取上清液于517 nm 处测定吸光度，记为 As；用等体积的无水乙醇代替样品待测液测定吸光度，记为 Ab；用等体积的无水乙醇代替 DPPH 溶液测定吸光度，记为 Ac。通过式 （4） 计算DPPH清除活性 A2：

（3） 羟基自由基清除能力：参考文献[24]，取不同浓度的样品待测液1 mL，分别加入1 mL的9 mmol/L 水杨酸-乙醇溶液、9 mmol/L FeSO4 溶液、8.8 mmol/L H2O2 溶液混匀，在37 ℃ 下水浴锅中反应 1 h，冷却至室温后于510 nm 处测定吸光度 Ai；用蒸馏水代替多糖溶液，在相同条件下测定空白对照组吸光度 Ad；测本底吸光度 Aj。通过式（5）计算羟基自由基清除活性 A3：

1.4.4 吸湿保湿性能测定

以 CTFPS、TFPS 和丙三醇为样品，比较3组样品的吸湿保湿性能。

（1） 吸湿性能测定[25]：将饱和碳酸钠溶液、硫酸铵溶液分别置于2个干燥器中，在室温下预饱和 12 h ，形成相对湿度分别为43% 和81% 的环境。准确称取5种样品各0.1 g 于培养皿中，放置在干燥器中，于1、3、6、12、24、36、48 h取出称其质量，通过式（6） 计算吸湿率M1：

式中：ma 为特定时间总质量（g）；mb 为初始总质量 （g）；mc 为样品初始质量（g）。

（2） 保湿性能测定[5]：将干燥变色硅胶于室温下放置在干燥器中预干燥12 h，形成相对湿度为0 的环境。准确称取5种样品各0.1 g 于培养皿中，并分别加入0.5 g 水，之后将培养皿放置在干燥器中，于1、3、6、12、24、36、48 "h取出称其质量，通过式（7） 计算保湿率M2：

2 结果与分析

2.1 CTFPS 脱蛋白方法比较

选用不同方法对银耳粗多糖进行蛋白脱除，经过不同脱蛋白工艺得到的蛋白质脱除率和多糖损失率如图1所示。

由图1可以看出：TCA 法的蛋白质脱除效果最好，多糖的损失也最高，AB-8 吸附法对蛋白质脱除效果次之。按照蛋白质脱除效果对脱蛋白方法进行排序： TCA 法 gt; AB-8 吸附法 gt; GDL 法 gt;酶法 gt; 聚酰胺法，蛋白质脱除率分别为：87.85%、71.9%、58.88%、52.07%、42%。按照多糖损失率大小对脱蛋白方法进行排序：TCA 法gt; GDL 法gt;聚酰胺法gt;酶法gt; AB-8 吸附法。多糖损失率分别为：58.85%、54.56%、50%、36.73%、19.3%。综上所述，虽然AB-8 吸附法对蛋白质脱除效果比TCA法稍差，但是此方法多糖损失最少。综合来看，AB-8 吸附法对 CTFPS 脱蛋白效果最好，操作简单，且 AB-8 大孔吸附树脂再生处理简便，使用周期长，适合在工业生产中使用。

2.2 AB-8吸附法脱蛋白工艺优化

2.2.1 CTFPS 水溶液质量浓度的影响

选取CTFPS 水溶液质量浓度分别为 1、2、5、10 mg/mL，在固定 AB-8 大孔树脂用量100 mg/mL、吸附温度 30 ℃、吸附时间为 3 h 的条件下，考察 AB-8 吸附法的脱蛋白效果，结果如图 2 所示。

由图 2 可以看出，随着CTFPS 水溶液浓度的升高，蛋白质脱除率的趋势呈现先上升后下降，而多糖损失率随着浓度的升高而降低。在质量浓度为5 mg/mL时，蛋白质脱除率达到最高值72.97%，多糖损失率为15.42%。在CTFPS 水溶液为低浓度时，大孔树脂对多糖和蛋白质都有较强的吸附能力，这是由于浓度较低时多糖分子和蛋白质分子有较多的机会在大孔树脂内部接触。而CTFPS 水溶液质量浓度大于5 mg/mL 时，多糖和蛋白质的浓度均升高，二者的分子扩散运动受到限制，大孔树脂对二者的吸附能力也降低。故 CTFPS 水溶液最佳质量浓度为5 mg/mL。

2.2.2 AB-8 大孔树脂用量的影响

选取AB-8 大孔树脂用量分别为50、100、150、200、250 mg/mL，在固定CTFPS 水溶液质量浓度为5 mg/mL、吸附温度为30 ℃、吸附时间为 3 h 的条件下，考察 AB-8 吸附法的脱蛋白效果，结果如图 3 所示。

由图3可以明显看出，随着 AB-8 大孔树脂用量的增加，蛋白质脱除率先上升后平缓，而多糖损失率呈现上升趋势。在AB-8 大孔树脂用量达到100 mg/mL时，蛋白质脱除率达到最大值80.26%，多糖损失率为14.79%。这可能是由于在AB-8 大孔树脂用量达到100 mg/mL 时，树脂的吸附与解析达到平衡，随着大孔树脂用量的增加，多糖分子和蛋白质分子有较多的机会在大孔树脂内部接触，大孔树脂对多糖的吸附能力增加，多糖的损失率增大，而蛋白质脱除率反而减小。故AB-8 大孔树脂最佳用量为100 mg/mL。

2.2.3 吸附时间对蛋白质吸附效果的影响

选取吸附时间分别为2、3、4、5、6 h，在固定CTFPS 水溶液质量浓度5 mg/mL、AB-8 大孔树脂用量100 mg/mL、吸附温度20 ℃ 的条件下，考察AB-8 吸附法的脱蛋白效果，结果如图 4 所示。

由图4 可以看出，随着吸附时间的增加，蛋白质脱除率呈现逐渐上升的趋势，而多糖损失率的变化较为平缓。吸附时间达到5 h 时，蛋白质脱除率达到最高值82.47%，多糖损失率为18.24%。随着吸附时间的增加，多糖分子和蛋白质分子有较多的机会在大孔树脂内部接触，在吸附时间为5 h 时，吸附与解析达到平衡，在吸附时间大于5 h 时，蛋白质脱除率不再增加。故最佳吸附时间为5 h。

2.2.4 反应温度对蛋白质吸附效果的影响

选取吸附温度分别为20、30、40、50 ℃，在固定 CTFPS 水溶液质量浓度5 mg/mL、 AB-8 大孔树脂用量100 mg/mL、吸附时间为2 h 的条件下，考察AB-8 吸附法的脱蛋白效果 ，结果如图5 所示。

由图5可以明显看出，随着反应温度的升高，蛋白质脱除率呈现缓慢下降的趋势，而多糖损失率随反应温度的升高先缓慢升高再下降。在反应温度20 ℃ 时，蛋白质脱除率为72.49%，多糖损失率为20.8%。这可能是由于升高温度，多糖分子的扩散增加，大孔树脂对多糖的吸附能力增加，多糖的损失率增大，蛋白质脱除率反而减小。故最佳反应温度为20 ℃。

2.3 结构表征

2.3.1 FTIR分析

由于银耳多糖中的官能团具有高度的红外吸收特性，本文对CTFPS 和 TFPS 分别进行了红外吸收表征，如图6 所示。

由图6可知，波数3 284 cm-1 附近的宽峰是由糖分子中的O—H 拉伸振动引起的，表明多糖中存在分子间或分子内氢键[26]；波数2 974 和2 901 cm-1 处的特征峰代表甲基或亚甲基的C—H 伸缩振动[27]；波数 1 398 cm-1 处的特征峰显示羧基的C—H 伸缩振动和 C—H 的可变角度振动。通过与张力凡[9]和张黎君[28]的研究结果对比发现，由波数3 284、2 974、1 398 cm-1 处附近的特征峰可判断出CTFPS和TFPS均为多糖类物质。此外，波数1 596 和1 719 cm-1 附近的特征峰为COO—的CO 不对称拉伸振动和对称拉伸振动，表明多糖中存在糖醛酸。而波数1 237 cm-1 处的特征峰表明SO 的收缩振动，表明多糖含有硫酸根[29]。1 039 cm-1 处的吸收峰对应于由吡喃糖环的C—O—H 和C—O—C 形成的拉伸振动的吸收峰。947和844 cm-1 之间的吸收峰可能代表2个多糖中存在 β-糖苷键[30]；800 cm-1 附近的吸收峰证明了α-D-甘露糖的存在[31]。因此，CTFPS 和 TFPS 均具有 α 型和β 型糖苷键。

2.3.2 SEM 分析

通过 SEM 研究了 CTFPS 和 TFPS 的微观结构，如图7所示。

由图 7 可以看出， CTFPS 和TFPS 呈现为片状堆积的无定形固体，表面有许多不规则排列的孔洞，结构较为疏松。

2.4 抗氧化性能分析

2.4.1 还原能力

银耳多糖可以将 K3[Fe（CN）6]中的 Fe3+ 还原为 K4Fe（CN）6 中的 Fe2+，并且 K4Fe（CN）6 进一步与 FeCl3 反应形成 Fe4[Fe（CN）6]3，该物质在 700 nm 处具有最大吸光度[32]。因此，对于 TFPS-Fe3+反应溶液，通常在 700 nm 处测量吸光度。吸光度越高，说明银耳多糖的还原能力越强。脱蛋白前后银耳多糖的还原力结果如图 8 所示。

由图8可以看出，CTFPS 和TFPS 均有明显的还原力，在一定浓度范围内还原力与多糖浓度呈现量效关系，还原力随着浓度的升高而增大，且脱蛋白后的 TFPS 的还原能力明显强于未脱蛋白的CTFPS。

2.4.2 DPPH 自由基清除

无水乙醇溶液的最大吸收波长为517 nm，多糖可以清除DPPH·并降低DPPH·的吸光度，由此评估银耳多糖对DPPH·自由基的清除率[33]。脱蛋白前后的银耳多糖对DPPH·自由基的清除能力结果如图9 所示。

由图9可知，CTFPS和TFPS均有明显的DPPH 自由基清除能力，其DPPH·清除能力随着多糖浓度的增加而增加，且脱蛋白后TFPS的DPPH·清除能力明显强于未脱蛋白的CTFPS。在0.1～2 mg/mL质量浓度范围内，TFPS和CTFPS的DPPH·清除能力均在1.5 mg/mL达到最高值，DPPH·清除率分别为75.54% 和37.99%。

2.4.3 羟基自由基清除能力

H2O2 和 Fe2+ 产生羟基自由基，可以与水杨酸反应生成2，3-二羟基苯甲酸和2，5-二羟基苯酸，形成的2种酸在510 nm 处具有最大吸收波长。当多糖清除羟基自由基时，510 nm 处的吸光度应降低，由此可以评估银耳多糖的羟基自由基清除能力[34]。脱蛋白前后银耳多糖的羟基自由基清除能力如图10 所示。

由图10可以看出，CTFPS 和 TFPS 均有明显的羟基自由基清除能力，其羟基自由基清除能力随着多糖浓度的增加而增加。质量浓度在0.5 mg/mL 时，CTFPS和TFPS的羟基自由基清除率相同；随着浓度的增加，TFPS的羟基自由基清除能力逐渐强于CTFPS。在 0.1～2 mg/mL 质量浓度范围内，CTFPS和TFPS 的羟基自由基清除能力均在2 mg/mL 达到最高值，羟基自由基清除率分别为44.72% 和41.78%。

2.5 吸湿保湿性能分析

2.5.1 吸湿性能

对CTFPS和TFPS的吸湿性能进行测定，并与丙三醇进行比较，结果如图11 和图12 所示。

由图11和图12可以看出，在相对湿度 43% 和81% 的环境下，3个样品的吸湿率在最初的 24 h 内显著增加，且在 24 h 左右吸湿效果几乎达到饱和。丙三醇的吸湿效果最好，TFPS 的吸湿效果次之，CTFPS 的最差。同时，在相对湿度81% 的环境下吸湿率高于相对湿度43%。在相对湿度81% 的环境下，3个样品的吸湿率大小顺序为丙三醇＞ TFPS gt; CTFPS，吸湿时间为 48 h 时，吸湿率分别为170%、40% 和30%。

2.5.2 保湿性能

丙三醇、CTFPS 和 TFPS 的保湿效果如图 13 所示。

由图13可以看出，在相对湿度为0的环境下，3个样品的水分含量快速降低，随着时间的增加，其保湿效果不断减小。在 3 h 内，丙三醇的保湿率高于其它2个样品，在 3 h 后，TFPS 的保湿效果优于丙三醇，且 CTFPS 的保湿效果与丙三醇相差甚微，说明 CTFPS 和 TFPS 都具有显著的保湿效果。在 48 h 时，3个样品的保湿效果为 CTFPS gt; TFPS gt;丙三醇，其保湿率分别为8.11%、5.41% 和 4.17%。

3 结 论

为了得到更高纯度的银耳多糖，对 CTFPS 进行纯化处理。研究结果表明：

（1） 以多糖损失率和蛋白质脱除率为依据，对比 AB-8 吸附法、酶法、TCA 法、GDL 法和聚酰胺法对 CTFPS 的脱蛋白效果发现，AB-8 吸附法的脱蛋白效果最佳。

（2） 通过单因素实验优化工艺条件，得出最优工艺条件为： CTFPS 水溶液质量浓度 5 mg/mL，AB-8大孔树脂用量 100 mg/mL，吸附时间 5 h，吸附温度 20 ℃。在最优条件下，蛋白质脱除率为 82.47%，多糖损失率为 18.24%。

（3） 比较脱蛋白后的TFPS与CTFPS的红外特征峰和SEM谱图发现，脱蛋白工艺不会破坏多糖的结构。

（4） TFPS的抗氧化活性和吸湿保湿性能强于 CTFPS。而且，AB-8大孔吸附树脂再生简便，使用周期长，操作简单，更适用于银耳多糖的工业化生产。

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本文引文格式：

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