丁香酚对凤尾鹅头红金鱼的麻醉效果

邱正 张红 刘超 张志山

摘 要：在水温24 ℃下进行了不同浓度的丁香酚对凤尾鹅头红金鱼麻醉效果研究。结果表明，不同浓度的丁香酚对凤尾鹅头红金鱼都有较好的麻醉以及复苏效果，10～70 mg/L的丁香酚都能在6 min中内使凤尾鹅头红金鱼进入麻醉期，在10 min中内完成麻醉鱼的复苏，复苏率以及72 h成活率均达到100%。麻醉时间随着丁香酚的浓度上升而缩短，与浓度呈负相关。麻醉后复苏所需要的时间随浓度上升依次增加，与浓度呈正相关。其中30～40 mg/L浓度的丁香酚能达到3 min麻醉5 min苏醒，效果最佳。同时进行了20～28 ℃水温对（30 mg/L浓度的丁香酚）凤尾鹅头红金鱼麻醉及复苏时间的研究。结果表明，20～28 ℃水温都能在5 min中内使凤尾鹅头红金鱼进入麻醉期，在7 min中内完成麻醉鱼的复苏，复苏率以及72 h成活率均达到100%。随着温度的升高，达到M3麻醉期及M5完全复苏期所需时间呈缩短趋势，与水温呈负相关。其中在30 mg/L浓度的丁香酚浓度下，控制水温在24～28 ℃，均能使试验鱼3 min麻醉5 min苏醒，效果最佳。

关键词：丁香酚；凤尾鹅头红金鱼；麻醉；复苏

凤尾鹅头红金鱼属鲤形目（Cypriniforms），鲤科（Cyprinidae），鲫属（Carassius）蛋种鱼的一种，具有很高的观赏价值[1-2]。凤尾鹅头红金鱼为鹅头红与丹凤金鱼经过多代杂交后选育出的兼具鹅头红的红顶白身和丹凤的长薄尾鳍等优良性状于一身的新品系，民间有“极品中的极品”之说。凤尾鹅头红金鱼鱼体洁白无杂色，头如鹅头，头瘤红彩鲜艳，头部红色不过鳃，背部光滑平整，无背鳍，无刺尾，双尾长薄鳍（图1）。由于凤尾鹅头红金鱼极高的经济价值，在进行人工繁殖[3]、运输、测量时很容易擦伤，影响其观赏性，因此选择一种安全、高效的鱼用麻醉剂，对凤尾鹅头红金鱼的日常人工操作十分必要。

丁香酚（Eugenol） ，化学名为2－甲氧－4－丙烯基酚，又称丁子香酚，是一种无色或淡黄色的油状液体，有强烈的丁香的香气。近几年来，丁香酚已经被很多国家和地区认定为没有药物残留的合法水产麻醉剂[4-6]，并且被广泛应用在亲鱼的人工繁殖、活鱼采血、运输等麻醉中。

1 材料与方法

1.1 材料

本试验样本凤尾鹅头红金鱼取自济南冯氏观赏鱼养殖有限公司。试验所用丁香酚为吉安市万亿香料油有限公司产品，含丁香酚99%以上，相对浓度为1.063～1.068 g/mL，使用前按丁香酚与无水乙醇1∶10的体积比配制成母液。

1.2 试验用丁香酚溶液的配制

在20 L的水体中一次加入2、4、6、8、10、12、14 mL的母液配制成浓度为10、20、30、40、50、60、70 mg/L的试验用麻醉浓度，设置编号为A-G。于4 ℃冰箱中避光保存备用。

1.3 试验方法

1.3.1 试验前的准备 试验所用的凤尾鹅头红金鱼暂养于济南冯氏观赏鱼养殖有限公司养殖池中，挑选健康、体表无伤病的试验用鱼65尾，平均体质量（38.74±4.5）g。试验前24 h停止投喂，曝气保证水体中充足的溶氧量。试验组的麻醉以及复苏均在周转箱中进行，麻醉及复苏水体均为20 L。试验后将凤尾鹅头红金鱼按照不同试验组分别放入4 m3水泥暂养池中静养，继续观察72 h，统计试验用鱼的存活率。

1.3.2 不同浓度丁香酚的麻醉及复苏效果试验 将已经配好的10、20、30、40、50、60、70 mg/L浓度（编号A-G）的丁香酚母液从冰箱中取出，倒入试验用麻醉水体中，充分搅拌30 s（水温24 ℃，总样本35尾，每组试验样本5尾）。当鱼体麻醉程度达到M3麻醉期时，记录秒表显示的麻醉时间（T1）。并立即将试验鱼转移到清水中进行复苏，记录秒表显示的试验鱼达到M5完全复苏期秒表时间（T2）。

1.3.3 不同温度对丁香酚麻醉及复苏效果试验 通过加热棒加温和冰块降温的方法，将麻醉和复苏水体的水温控制在20、22、24、26、28 ℃（编号a-e）。将已经配好30 mg/L浓度的丁香酚母液倒入的麻醉水体中，充分搅拌30 s（总样本25尾，每组试验样本5尾）。当鱼体麻醉程度达到M3麻醉期时，记录秒表显示的时间（t1），并立即将试验样本转移到清水中复苏，记录秒表显示的试验样本达到M5完全复苏期秒表时间（t2）。

1.3.4 数据处理 试验所得的数据以平均值±标准差的形式表示，使用SPSS27.0软件进行单因素方差分析，当显著性水平P＜0.05，使用LSD多重比较法检验组间差异，分析各试验组显著性差异。

2 结果与分析

2.1 凤尾鹅头红金鱼麻醉程度的分期

参照孟庆磊等[7]的麻醉分期，根据麻醉过程中试验样本表现出的行为特征，将整个麻醉过程拆分为M0（正常期）、M1（镇静期）、M2（轻度麻醉期）、M3（麻醉期）、M4（部分复苏期）、M5（完全复苏期）6个不同时期。详情见表1。

2.2 不同浓度丁香酚对凤尾鹅头红金鱼麻醉效果的影响

不同浓度的丁香酚对凤尾鹅头红金鱼都有比较好的麻醉效果，10～70 mg/L浓度的丁香酚都能在6 min中内使凤尾鹅头红金鱼进入麻醉期。其中10 mg/L（编号A）达到M3麻醉期的时间最长，70 mg/L（编号G）时间最短。随着丁香酚浓度上升，麻醉时间呈缩短趋势。多重比较显示，不同的浓度组之间凤尾鹅头红金鱼需要的麻醉时间，C与D组、D与E组、E与F组、F与G组之间差异不显著（P＞0.05），而其他各组之间差异显著（P＜0.05）。

2.3 不同浓度的丁香酚对凤尾鹅头红金鱼复苏时间的影响

10～70 mg/L的丁香酚（编号A-G）在10 min中内都能完成试验组的复苏，暂养池静养72 h后观察复苏率达到100%。其中10 mg/L（编号A）试验组所需的复苏时间最短，随着丁香酚浓度的上升，复苏时间呈增长趋势。多重比较显示，A与B组、B与C组、C与D组、E与F组之间差异不显著（P＞0.05），而其他各组之间差异显著（P＜0.05）。不同浓度的丁香酚对凤尾鹅头红金鱼的麻醉及复苏时间影响详情见表2。

2.4 不同水温对丁香酚麻醉效果的影响

在30 mg/L丁香酚母液浓度下，通过秒表记录试验组达到M3麻醉期的秒表时间t1。随着水温的升高，达到M3麻醉期阶段的时间呈缩短趋势，与水温呈负相关。水温20～28 ℃都能使试验鱼在5 min内达到M3麻醉期。多重比较显示，c与d组、d与e组之间差异不显著（P＞0.05），而其他各组之间的差异显著（P＜0.05）。

2.5 不同水温对丁香酚复苏时间的影响

将麻醉的试验组转移到清水中进行复苏，秒表记录试验组达到M5完全复苏期秒表时间（t2）。随着水温的升高，试验组复苏时间（t2-t1）呈缩短趋势，与水温呈负相关。水温20～28 ℃都能使试验鱼在7 min内复苏率达100%，暂养池中静养观察72 h成活率100%。多重比较显示，b与c组、b与d组、c与d组、c与e组、d与e组之间差异不显著（P＞0.05），而其他各组之间的差异显著（P＜0.05）。不同水温对试验组麻醉及复苏时间详情见表3。

2.6 乙醇对丁香酚麻醉效果的影响

由于丁香酚属于油性液体，水溶性差，因此考虑到实际生产操作的方便，需要无水乙醇作为媒介，制成丁香酚母液使用。考虑到乙醇本身具有一定的麻醉作用，可能对试验组麻醉效果有一定程度的影响。因此，本次试验设立了0.7 mg/L的无水乙醇溶液（约70 mg/L的丁香酚试验组中的无水乙醇含量）进行对比试验。结果显示，加入0.7 mg/L的无水乙醇溶液组中的凤尾鹅头红金鱼（试验样本5尾）均未出现麻醉分期的行为特征，由此可见母液中无水乙醇的存在对丁香酚的麻醉效果并无明显的影响。

3 讨论

3.1 丁香酚对试验组麻醉效果可行性研究

丁香酚广泛应用在优鲈3号[8]、加州鲈[9]、条纹小鲃[10]、黄尾鲴[11]、松江鲈[12]、花鲈[13]、异齿裂腹鱼[14]、锦鲤[15]、翘嘴鲌[16]等麻醉研究，是一种安全、高效[17]的鱼用麻醉剂，可广泛应用于日常试验生产等操作。

3.2 不同浓度的丁香酚对凤尾鹅头红金鱼麻醉效果分析

除澳洲长鳍鳗[18]等个别鱼类之外，绝大多数的鱼类麻醉时间都是随着麻醉剂浓度上升而逐渐缩短。本研究中，当丁香酚的浓度在10 mg/L时，凤尾鹅头红金鱼的麻醉时间最长达到359 s，当丁香酚浓度升至30 mg/L时，试验鱼所需要的麻醉时间大幅减少。当浓度达到70 mg/L，最短仅需37 s即可达到M3麻醉期。由此可见，丁香酚的浓度对凤尾鹅头红金鱼麻醉时间影响显著。但实际试验生产中，过高的丁香酚麻醉浓度容易造成鱼体表脱黏，感染细菌性疾病，应根据试验组的体长体重，酌情选择麻醉浓度。

3.3 不同浓度丁香酚对凤尾鹅头红金鱼复苏所需时间分析

在已有的鱼类麻醉实验资料报道中，绝大多数鱼类麻醉后复苏所需要的时间随着麻醉剂浓度的升高而逐渐增长。本试验中，随着丁香酚浓度的上升，麻醉后的复苏所需要的时间依次增加，与浓度呈正相关，当丁香酚母液浓度大于50 mg/L时，复苏时间大幅增加。在实际生产实践中，过高的复苏时间会影响工作效率，在5 min内复苏是比较理想的麻醉浓度。

3.4 不同水温对丁香酚麻醉效果分析

水温是影响麻醉剂作用效果的一个重要环境因素。随着水温升高，试验鱼新陈代谢加速，心跳和呼吸频率加快，体内血液流动加速，使丁香酚有更好的麻醉效果，当水温达到22 ℃时，麻醉时间大幅缩短。水温24～28 ℃都能使试验组在3 min内达到M3麻醉期，在实际生产实践中可以极大地提升工作效率。

3.5 不同水温对丁香酚复苏效果分析

与麻醉效果相似，随着水温升高，试验鱼新陈代谢加速，心跳和呼吸频率加快，体内血液流动加速。当水温达到22 ℃时，复苏所需时间大幅减少，22～28 ℃之间复苏时间小幅减少，试验组b—试验组e中水温对复苏时间影响不显著。

3.6 丁香酚麻醉凤尾鹅头红金鱼的最佳浓度

李元等[19]、刘长琳[20]等认为，理想的麻醉浓度需要同时满足2个条件：（1）3 min之内麻醉；（2）5 min之内苏醒。本研究结果表明丁香酚是一种安全、高效的对凤尾鹅头红金鱼的麻醉剂，10～70  mg/L的丁香酚都可以使凤尾鹅头红金鱼达到M3麻醉期，并且可以达到100%复苏。其中在水温24 ℃下，30～40 mg/L浓度的丁香酚满足3 min内麻醉，5 min之内苏醒，是凤尾鹅头红金鱼最佳的麻醉浓度。在30 mg/L浓度的丁香酚母液浓度下，24～28 ℃的水温对凤尾鹅头红金鱼都有较好的麻醉及复苏效果，可极大地提升生产试验效率。

参考文献：

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The anesthetic effect of eugenol on red goldfish

QIU Zheng1，ZHANG Hong2，LIU Chao1，ZHANG Zhishan1

（1.Shandong Freshwater Fisheries Research Institute 2. Jinan Agricultural Technology Extension Service Center， Jinan 250013，China）

Abstract：The effects of different concentrations of eugenol on the anesthesia of goldfish were studied at water temperature of 24 °C. The results showed that different concentrations of eugenol had good anesthetic and resuscitation effects on red goose-head with phoenix tail goldfish， and 10～70 mg/L eugenol could induce the goldfish to enter the anesthetic period within 6 minutes， the recovery rate and the survival rate of the anesthetized fish reached 100% within 10 min and 72 h. The anesthesia time was shortened with the increase of eugenol concentration， which was negatively correlated with the concentration. The time needed for resuscitation increased with the increase of concentration， which was positively correlated with the concentration. Among them， eugenol （30～40 mg/L） can achieve 3 min anesthesia and 5 min recovery， and the effect was the best. At the same time， the effects of water temperature （20～28 ℃） on anesthesia and resuscitation time for the eugenol concentration of 70 mg/L were studied. The results showed that the water temperature of 20～28 ℃ could make the goldfish enter the anaesthesia period within 5 minutes， and the resuscitation rate and the survival rate of 72 hours reached 100% within 7 minutes. With the increase of temperature， the time needed to reach M3 anesthesia stage and M5 full recovery stage was shortened， and negatively correlated with water temperature. Under the concentration of eugenol 30 mg/L and the water temperature 24～28 ℃， the experimental fish were anesthetized for 3 min and resuscitated for 5 min.

Key words：eugenol; red goose-head with phoenix tail goldfish; anesthesia; resuscitation

（收稿日期：2024-05-21）