阿坝2023年包虫病检测结果分析与防控建议

何 苗,罗昌俊,胡 毅,任云芳

阿坝藏族羌族自治州动物疫病预防控制中心,四川 马尔康 624000

0 引言

包虫病又称棘球蚴病(echinococcosis),棘球属绦虫,成虫体长2～7 mm,扁平带状,幼虫是棘球属绦虫的传染阶段,也被称为囊蚴(hydatidcyst),棘球属绦虫包含中间宿主和终末宿主,囊蚴在中间宿主体内形成并寄生[1]。包虫病主要有2种类型,分别为由细粒棘球绦虫(Echinococcusgranulosus)引起的囊型棘球蚴病和由多房棘球绦虫引起的泡型棘球幼病[2]。棘球幼体积大、活力强,常寄生于动物的肝、肺、脾以及其他器官,造成其功能障碍和萎缩。人食用被寄生的肉制品而导致感染。棘球绦虫成虫寄生于犬科食肉动物[3-4],幼虫(棘球蚴)寄生于人和多种食草类家畜及其他动物,羊包虫病的主要传染源是感染了绦虫的犬,羊包虫病对羊和其他哺乳动物均具有潜在感染的风险[1]。阿坝藏族羌族自治州农牧民分布较为广泛,牛羊散养,加上乡镇居民对犬只的管理还有待完善,是包虫病高发地区。本文基于2023年8月阿坝藏族羌族自治州动物疫病预防控制中心实验室采集的全州13个县(市)的样本结果进行分析,并给出包虫病的防控建议。

1 样本采集

1.1 犬粪采集

使用无菌离心管从阿坝13个县(市)中按照每个县(市)200份随机采集犬只粪便样本,并于-80 ℃超低温冰柜中冻存至少7 d以上,以确保样本中病原被灭活。

1.2 羊血清采集

使用无菌离心管从阿坝13个县(市)中按照每个县(市)100份随机采集羊血,并分离血清,-20 ℃低温保存待用。

2 实验方法

2.1 犬粪包虫抗原ELISA检测实验方法

本次实验使用犬粪包虫抗原试剂盒,实验前将待检样本取出,放置常温,配备洗涤液,使用蒸馏水或去离子水按照1：10稀释;配备样品稀释液,用蒸馏水或去离子水与样品稀释液按照1：1稀释;取1 g犬粪加入1 mL工作浓度样品稀释液,充分搅拌混匀,静置10 min,再3 000 rpm离心10 min,取上清待检;在板上加入待检样本、阴性对照孔、阳性对照孔各100 μL,盖膜37 ℃避光反应30 min,反应结束后洗板6次;每孔各加入酶100 μL,盖膜37 ℃避光反应30 min,反应结束后洗板6次;洗板结束后每孔加入等体积的底物液与显色液混合液100 μL,盖膜37 ℃避光反应10 min;反应结束后每孔加入终止液50 μL,用酶标仪双波长450 nm主波长,630 nm参比波长读取OD值。

2.2 羊包虫病抗体血清ELISA检测实验方法

实验使用羊包虫Eg95免疫抗体检测试剂盒,实验前将待检样本取出,放置常温,配备洗涤液,用蒸馏水或去离子水按照1：10稀释;稀释待检血清,按照1：100稀释;然后在板中加入原液阴性对照、原液阳性对照及待检样本各100 μL,盖膜37 ℃避光反应30 min;反应结束后洗板3次,再每孔加入酶100 μL,盖膜37 ℃避光反应30 min,反应结束后重复洗板3次;拍干后每孔加入等体积的底物液与显色液混合液100 μL,盖膜37 ℃避光反应10 min;反应结束后每孔加入终止液50 μL,用酶标仪双波长450 nm主波长,630 nm参比波长读取OD值。

3 结果与分析

3.1 犬粪包虫抗原检测结果判定

本次实验,犬粪包虫抗原检测有效样本数量为2 119份,阳性数56份,犬粪包虫阳性率2.64%。如图1所示,阿坝藏族羌族自治州13个县(市)2023年犬粪包虫抗原检测结果阳性率均控制在5%以下。

图1 13个县市2023年犬粪包虫抗原检测结果

3.2 羊包虫血清抗体检测结果判定

本次实验,羊包虫血清抗体检测有效样本数量为542份,阳性数505份,羊包虫血清抗体保护率93.17%。如图2所示,阿坝藏族羌族自治州13个县(市)2023年羊包虫血清抗体检测结果排除阿坝县与小金县有效样本为0,其余县(市)保护率除理县外,均在95%以上。

图2 阿坝藏族羌族自治州2023年羊包虫血清抗体检测结果

3.3 分析

3.3.1 犬粪包虫抗原检测结果

根据结果分析,壤塘县阳性率最高,其次为阿坝县、松潘县。壤塘县为草地县,据壤塘县人口普查数据,2023年壤塘县常驻人口4.5万,管辖面积6 836 km2,人口较为稀少,当地经济条件发展还有待提高,对于犬只的疫苗注射、饲养管理等方面还有所欠缺,特别是在偏远的高海拔地区,基层动物防疫专业工作人员较为缺乏,配套设施不太齐全,这或许是造成壤塘县犬粪包虫病抗原阳性率较高的原因。

3.3.2 羊包虫血清抗体检测结果

根据结果分析,阿坝县与小金县本次实验羊包虫血清抗体检测有效样本数量为0,其原因为阿坝县与小金县在本次实验中与其他县(市)样本混淆,无法辨认,导致此次实验阿坝县、小金县有效样本数量为0。理县羊包虫血清抗体保护率偏低,可能是因为当地羊只数量较少,养殖业并不发达,主要依靠农产品,比如大白菜、卡子核桃等,基层动物防疫的专业工作人员对羊只的免疫重视度不够。

4 讨论

包虫病属于牧区的高发疾病,该病可引起怀孕母羊流产或不孕不育,此外还会造成羊只食欲不振,毛发杂乱、身体消瘦,如不加以干预治疗,病症严重后则会导致咳嗽、腹痛、呼吸困难,甚至出现死亡[3]。西藏自治区属于肝包虫的流行地区,对此,肖瑶睿[5]提出专门设立流浪犬收留处,加大对屠宰方式的监管等措施来遏制包虫病的发生。另外,因为包虫病属于人畜共患病,在人医方面,包虫病也属于一道难题,字金荣 等[6]对云南省北部地区6～12岁儿童进行棘球蚴病血清学流行病学调查,其结论为滇西北地区的儿童抗体阳性率高于其他地区,牧区最高,此结果也侧面表明包虫病感染率牧区高于非牧区。农民日报曾对人的包虫病做过调查,人在感染前期无明显症状,后期患病部位疼痛,肝包虫病患者腹胀如鼓,脑包虫患者则会发作癫痫[7]。因此,对于该病的预防,不容小觑,不仅仅是要对动物进行免疫预防,也需要做好相关人员的防护。

包虫病的疫苗研究近年来也取得了一些成果,棘球蚴疫苗目前有4种类型：①早期棘球蚴疫苗,主要是由棘球绦虫虫卵、六钩蚴分离纯化的分泌物、代谢物及细胞培养等制成,但由于抗原成分复杂,含有多种抗原蛋白,生产成本高,难以进行批量生产。②合成肽疫苗,棘球蚴合成肽疫苗是根据棘球蚴的主要宿主保护性抗原中已知抗原表位中某段氨基酸序列,通过人工设计和合成具有免疫原性的多肽疫苗,缺点是其抗原性及免疫原性受自身组成及宿主免疫系统等多种因素影响,并且免疫力不能垂直传递。③基因工程重组疫苗,运用DNA重组技术,基因工程重组疫苗生产成本低、安全性好,具有一针多防等优点。④转基因植物疫苗,该种类型疫苗具有易运输保存、可大规模生产、成本低廉、方便接种等优点,可广泛应用[8]。

另外根据流行病学调查,并结合本次实验结果来看,阿坝草地县犬粪包虫抗原检测结果高于其他非牧区县市,这也可能是由于当地牧民对动物性疾病认知不够,给当地动物疫病的防控工作带来了一定的阻碍。因此,应加强动物疫病预防知识的宣传与培训,从多个环节做好包虫病的防控,实现包虫病的净化。

5 防控措施

5.1 预防措施

包虫病的防控措施主要从控制传染源、切断传播途径、保护易感动物等方面进行。

5.1.1 控制传染源

感染棘球蚴的动物会成为传染源,一般为犬科类动物,因为棘球蚴成虫寄生于犬科类动物体内,因此要加强犬只管理,对于牧区犬只划定活动范围,远离牛羊群。定期派专业兽医人员对犬只进行驱虫,定期打扫犬舍,控制犬不到可能存在绦虫虫卵地方逗留,并对犬粪集中进行无害化处理。

5.1.2 切断传播途径

感染后动物的肝、肺等内脏必须经过高温煮沸或深埋等无害化处理,不能随意丢弃或喂食给犬只。

5.1.3 保护易感动物

在包虫病高发地区,对牛、羊经行定期免疫。定期打扫牛、羊圈舍,禁止犬只进入,保持圈舍干燥通风,感染后的牛、羊应及时隔离。加强饲养管理,增强易感动物机体抵抗力。牧民应加强自我防护,远离犬只,不饮生水,不食未煮熟食物,并应加强自身防护意识。

5.1.4 提升检测能力

阿坝藏族羌族自治州基层兽医人员不足,专业知识技能也较为薄弱,因此需要加大对基层兽医人员配备力度,加大专业知识技能的培训。包虫病高发地区动物疾控部门应与人疾控部门加强联系,建立监测和报告体系,定期收集该地区相关数据,以便分析当地包虫病情况。阿坝藏族羌族自治州各县(市)实验室建设不够完善,实验室人员专业能力也不够强,应加快实验室建设,配备标准的实验设备,加强实验室人员的专业培训,以便获取准确的检测数据,更好地保护当地动物,提高当地经济。

5.2 治疗

5.2.1 药物治疗

羊包虫病常用药物为吡喹酮,按体质量50 mg/kg,1次/d,连续5 d[9]。

5.2.2 手术治疗

症状较为严重的羊只,仅通过药物治疗并不能达到想要的效果,此时则需要手术治疗,主要是通过肝包虫外囊切除、肝切除、经皮肤穿刺引流或者放射治疗这4种方式[3]。

6 结束语

包虫病的防控,不应只局限于当下,更应用长远发展眼光,采取科学的措施。对于阿坝藏族羌族自治州这类牧区较多、包虫病高发地区,应加强兽医专业人员的配备,改善饲养环境,提升农牧民、养殖户的专业技能,严格进行动物免疫工作。同时,加强犬只管理,对牛羊实施区域化养殖,从多个环节消除包虫病的发生,保证农牧民的经济收入,促使当地经济的发展[10]。