干细胞因子在3例犬急性脊髓神经系统疾病治疗中的应用和体会

王福军

(1.黑龙江民族职业学院生物科技系 , 黑龙江 哈尔滨 150000 ; 2. 哈尔滨市福爱宠物医院 , 黑龙江 哈尔滨 150000)

犬常见的神经系统疾病主要包括脑、脊髓和外周神经的损伤,症状主要见于疼痛、抽搐、骨骼肌肌肉震颤、瘫痪、神经反射减弱或消失等。虽然神经系统对损伤有一定的自我修复能力,但是过程复杂且漫长,需要把握住最佳治疗时间积极的治疗[1]。目前,干细胞治疗技术作为新的治疗手段已逐渐应用到宠物临床方面,给神经系统疾病治疗开辟了新的方向[2]。干细胞在一定条件下可以分化成多种功能细胞或组织器官,医学界称其为“万能细胞”[3],通过静脉回输可以迁移到中枢神经病变部位,经旁分泌作用产生可溶性细胞因子修复受损组织。干细胞因子在体内迅速补充细胞新陈代谢所需的营养,靶向修复受损细胞,激活休眠的干细胞,刺激新生组织再生。本文将介绍3例犬急性脊髓神经系统疾病,通过结合临床症状和数字高清X线或磁共振成像(Magnetic resonance imaging,MRI)诊断结果,使用干细胞因子加以干预治疗,观察患犬的恢复效果,以期为犬类似神经系统疾病的诊断和治疗提供参考。

1 病例一

1.1 发病情况 八哥犬,2岁,雄性,体重10 kg。患犬于就诊前2 d开始出现行动缓慢,运动量少,高处跳跃活动减少,病情渐进加重,临床表现为双侧后肢行动困难,勉强支撑身体,就诊当日突然出现双侧后肢瘫痪,仅靠两前肢呈“划水状”方式移动。患犬无既往病史,未受到撞击和跌落。饮食有所减少,排便困难。

1.2 诊断

1.2.1 一般检查 该患犬体温正常,精神状态一般,体表毛发状态正常。触诊患犬腰部伴有疼痛反应,疼痛刺激双侧后肢,反应极不敏感,且双侧后肢本体反射轻度消失。

1.2.2 影像学检查 X线检查:腰5～腰7椎间隙狭窄,椎间孔狭小灰暗,“马头状”结构外观消失。

1.2.3 诊断结果 结合临床症状和X线影像学检查结果初步诊断患犬为腰5～腰7椎间盘突出症,压迫脊髓而导致双侧后肢瘫痪。

1.3 治疗和效果 对患犬使用甲强龙连续静脉滴注3 d以消除急性水肿。患犬脊髓神经修复治疗:静脉滴注犬干细胞因子注射液,1支/d,连用3 d。支持治疗时给予患犬静脉滴注葡萄糖酸钙;皮下注射维生素B1和维生素B12以营养神经;皮下注射骨肽,口服康仕健,修复软骨,以改善患犬关节的灵活性;皮下注射痛立定以缓解其疼痛。

经过3 d的综合治疗用药并结合犬干细胞因子注射液静脉输注治疗后,该患犬的双侧后肢痛觉逐渐灵敏,本体反射逐渐恢复正常,并可以正常站立,但行走还未恢复正常速度。除犬干细胞因子注射液外,其他药物继续使用。治疗第7天,该患犬的症状完全消失,走路和跑动恢复正常。此后每日饲喂康仕健口服药,半年后回访,主述该犬平日表现未见异常。

2 病例二

2.1 发病情况 杂交蝴蝶犬,10岁,雌性,已绝育,无严重既往病史。患犬至本院就诊前3 d突然前后肢均站立不稳,运动量明显下降,精神沉郁,食欲下降。主人带其在家附近宠物医院就诊并进行血常规、血清生化和X线检查,结果均未见明显异常。采用激素疗法、抗生素治疗、降颅内压和皮下注射维生素B1和维生素B12等常规治疗3 d,患犬未见好转,遂转至本院。

2.2 诊断

2.2.1 一般检查 该患犬前后肢均无法站立,本体反射消失,疼痛反应轻度敏感,神经系统疾病症状明显,结合其他宠物医院的检查和治疗进一步进行MRI检查。

2.2.2 影像学检查 MRI检查结果显示:颈胸腰椎多处椎间盘髓核信号降低,呈脱水变性,椎体背纵韧带肥厚;其中颈3～颈4椎间隙狭窄,椎间盘背侧纤维环连续性中断,邻近颈3～颈4椎间盘椎管内可见脱出髓核(图1A);颈2～颈5、颈6～胸1和胸12～腰5椎间盘背侧向椎管内改变(图1B);相应段脊髓受压变形水肿明显。

图1 病例二MRI脊髓扫描图

2.2.3 诊断结果 患犬颈胸腰椎多处椎间盘退行性改变,颈2～颈3、颈4～颈5、颈6～胸1和胸12～腰5椎间盘突出,颈3～颈4椎间盘髓核脱出,相应段脊髓受压损伤。

2.3 治疗和效果 综合分析该患犬此前治疗过程和疗效,本院建议对患犬采用常规用药和静脉输注干细胞因子注射液进行尝试治疗。

首日采用甲强龙对患犬急性脊髓损伤进行治疗以缓解组织水肿,采用抗生素进行抗菌消炎和皮下注射维生素B1和维生素B12营养神经药进行常规支持治疗,但患犬症状未见改善。次日对患犬增加静脉滴注干细胞因子治疗,1支/d,连续3 d。

干细胞因子治疗期间患犬精神状态逐渐改善,饮食饮水增加,搀扶其前肢站立平稳,本体反射恢复,但仍无法行走,后肢较前肢恢复缓慢。此后患犬继续接受抗菌消炎药与维生素B1和维生素B12营养神经药支持疗法。7 d后对患犬后肢应用动物专用轮椅,可支持其前肢正常行走,半个月后患犬行动自如,恢复其发病前状态。

治疗1个月后对患犬进行MRI影像学复查,可见椎间盘突出缓解,椎体背纵韧带肥厚解除,脊髓水肿信号消失,颈3～颈4椎间盘髓核脱出物固化、脱水萎缩,未对脊髓造成明显压迫(图1C),胸12～腰5段脊髓受压变形水肿明显缓解(图1D)。

3 病例三

3.1 发病情况 雪纳瑞,8岁,雄性,患犬无既往病史,饮食和排便均正常。就诊1周前患犬出现行动缓慢,安静时有浑身抖动现象,病情逐渐加重。

3.2 诊断

3.2.1 一般检查 患犬就诊当日双侧后肢行走时不受支配,人为搀扶下勉强支撑其身体,腰间无力,身体前倾,头伸直,两前肢呈强力支撑状态。疼痛刺激双侧后肢反应不敏感,按压其胸腰椎,多处有疼痛反应。

3.2.2 影像学检查 X线检查未见明显异常,需MRI检查进一步确诊。MRI检查结果显示:胸10～胸11和胸12～腰1椎间盘背侧向椎管内改变,腰1～腰2椎间盘背侧向椎管内改变,背侧纤维环呈“锯齿样”改变(图2A);患犬胸腰椎多处椎间盘髓核T2信号减低,椎体背纵韧带肥厚;胸13～腰5椎体终板腹侧少量增生和钙化(图2B);邻近腰1～腰2椎间盘右侧椎管内见少量等T1和等T2髓核脱出物;相应段脊髓受压变形水肿明显。

图2 病例三MRI脊髓扫描图

3.2.3 诊断结果 患犬椎体和椎间盘退行性改变;胸13～腰5椎体终板腹侧增生和钙化;胸10～胸11和胸12～腰1椎间盘突出;腰1～腰2椎间盘髓核脱出;相应段脊髓受压损伤。

3.3 治疗和效果 综合分析该患犬病情发展时长,采用常规用药结合静脉输注犬干细胞因子注射液进行治疗。

治疗方案:给予患犬非甾体抗炎药止疼,糖皮质激素甲强龙进行抗炎消除患部水肿,维生素B1和维生素B12用来营养神经,干细胞因子静脉输注以恢复其受损神经细胞,连续治疗3 d。

该患犬表现出精神状态逐日改善,疼痛缓解,后肢逐日站立平稳。经3 d治疗后该患犬走路基本无异常,相较以往未用干细胞因子注射液用药治疗的患犬恢复迅速。

患犬康复后10 d复查MRI可见椎间盘突出得到缓解,椎体背纵韧带肥厚解除,脊髓水肿信号消失,腰1～腰2脱出椎间盘髓核固化并脱水萎缩,未对脊髓造成压迫(图2C和2D)。

4 讨论

干细胞具有再生为各种组织的潜能,在传统医疗手段束手无策的疾病方面显示出了奇迹般的治疗效果。在体内或体外特定的诱导条件下,干细胞可分化为多种组织细胞,可作为理想的种子细胞用于衰老和病变的组织器官损伤修复中。神经干细胞具有分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的能力,是一种能自我更新的细胞[4]。患病部位组织损伤后释放各种趋化因子,吸引神经干细胞聚集到损伤部位,并在局部微环境的作用下分化为不同种类的细胞,修复并补充损伤的神经细胞。干细胞增殖分化过程中分泌干细胞因子,干细胞因子经血液循环进入组织,迅速补充细胞新陈代谢所需的全部营养,靶向激活休眠的干细胞,促进损伤细胞的修复,增强神经突触之间的联系,建立新的神经通路[5]。目前,干细胞的来源、分离、培养和鉴定还有许多工作要做,尤其体外培养的干细胞输入体内后还不能控制其生长分化,极大地增加了临床应用的风险,注射干细胞还有一定的副作用,加重免疫系统的负担。虽然干细胞的作用越来越被认可,但是其高昂的价格让很多人望而却步。干细胞因子富含多种有效成分,可以刺激自体内源性干细胞生长,也是体外培养干细胞必不可少的物质。本文应用的犬干细胞因子注射液为北京京蒙细胞生物科技股份有限公司生产,3 mL/支,主要成分有:神经生长因子、上皮细胞生长因子、粒细胞集落刺激因子、促干细胞生长因子、成纤维细胞生长因子、脑源性神经营养因子、白细胞介素4、白细胞介素10、趋化因子、细胞间黏附分子-1和各种溶菌酶等100余种有效活性成分。干细胞因子进入机体后,休眠干细胞被大量激活,细胞分化速度达到生长期的水平,全面修复和补充受损、老化或病变的细胞。

病例一患犬通过急性双侧后驱瘫痪等症状和X线检查结果诊断为急性椎间盘突出压迫脊髓症。对患犬采用紧急抗水肿治疗,解除压迫神经的不利因素,恢复神经细胞的功能。同时配合静脉输注干细胞因子对受损神经细胞进行治疗,促进神经元的发育和分化,并恢复其正常功能,防止发生退行性病变。辅以其他药物支持治疗,将神经细胞损伤程度降到最低。患犬短期治疗效果明显,后期预后良好。另有2例结合临床症状和MRI影像学检查结果确诊患有急性椎间盘疾病继发急性脊髓神经损伤,患犬临床症状严重,在接受常规治疗效果不明显后,依靠干细胞因子静脉输注治疗达到了理想的康复效果,而且未出现明显不良反应,因此认为干细胞因子在修复神经损伤方面有一定疗效。目前,药物仍是治疗急性脊髓损伤的主要措施,关键是通过消除水肿和控制炎症保护部分正常的神经功能,并通过修复受损神经实现神经功能改善。

近些年中国小动物诊疗行业发展迅速,高清数字X光线、计算机断层扫描(Computed tomography,CT)和MRI高端影像诊断技术逐渐被应用和推广,极大的提高了影像学诊断的准确性。MRI诊断技术具有高软组织分辨率优势,既可以显示解剖结构和病理改变,又可以清晰显示出患犬椎间盘的退变情况和脊柱形态等,明显优于CT检查和X线检查[6]。本文应用的犬干细胞因子注射液含有多种有效活性成分,包括多种干细胞因子、神经营养因子、神经生长因子和神经保护因子,对中枢和周围神经元的发育、分化、生长、再生和功能特性的表达均具有重要的调控作用[7]。通过静脉注射干细胞因子可以治疗患犬神经损伤后出现的姿势和行动异常、精神萎靡以及神经性抽搐等症状。本文报道均为宠物医院临床治疗病例而非造模病例,临床每个病例脊髓损伤位置和程度均有差异性,因此未使用干细胞因子注射液的病例没有进行描述,希望通过后期增加对类似病例患犬使用该药物,从而完善对干细胞因子的应用体会。