血清C反应蛋白、淀粉样蛋白A及免疫球蛋白M联合检测对呼吸道合胞病毒感染严重程度的诊断效果

石明娟 中国科学院大学深圳医院儿科,广东省深圳市 518107

呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)主要累及鼻、喉、气管、支气管以及毛细支气管,具有高度传染性。RSV感染的症状表现因患儿年龄、健康状况以及感染累及部位而异,多见于2岁以内小儿[1]。如果RSV感染累及支气管尤其是毛细支气管,症状常常较严重,可能出现局灶性肺不张、坏死性毛细支气管炎,严重者可引起呼吸衰竭和心力衰竭[2]。因此,尽早诊断对改善患儿病情和预后至关重要。目前根据RSV感染的病情评估仅依据主观的临床表现,缺乏可信度较高的评估指标。研究表明,RSV患儿易聚集炎性因子,出现局部高水平的炎症浸润儿导致病情加重,使肺组织结构发生不可逆的变化[3]。本文将探讨RSV检测效能低下的原因,并研究血清C反应蛋白(CRP)、淀粉样蛋白A(SAA)及免疫球蛋白M(IgM)与呼吸道合胞病毒感染病情程度的严重性,并进一步探讨CRP、SAA、IgM联合检测诊断RSV的临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院于2020年1月—2023年4月收治的110例呼吸道合胞病毒感染患儿作为观察组,其中男66例,女44例,平均年龄(4.23±0.32)岁。纳入标准:(1)存在咳嗽、鼻塞或流涕、轻度咽喉痛、耳痛等症状;(2)配合静脉抽血者;(3)经病毒检测证实为呼吸道合胞病毒感染;(4)年龄<10岁。排除标准:(1)合并其他病原体感染;(2)既往有免疫缺陷病史;(3)近1个月内有免疫抑制剂用药史;(4)临床资料不完整者;(5)既往有先天性心脏病史。并选取同时期110例健康体检者作为对照组。根据《毛细支气管炎诊断、治疗与预防专家共识》判断病情严重程度,将观察组分为轻型(n=38)、中型(n=30)、重型(n=42)三个亚组。

1.2 方法 患儿于入院当日,所有研究对象于体检当日在空腹状态下采血,剂量为3mL,确保2h前没有服用任何药物的情况下进行采血。静脉血混匀后用3 000r/min的转速分离10min,得到血清,放置于-80℃冰箱中保存。选取酶标仪(BK-EL10C,济南好徕宝医疗器材有限公司)检测CRP、SAA、IgM水平。首先以1∶500的比例稀释血液,于待测样品孔、空白孔、标准孔分别滴入10μL血清、标准品和稀释液。而后添加10μL酶联物混匀,于45℃水浴箱放置30min后拿出甩干。蒸馏水洗涤后擦干,向每孔加入100μL TMB显色液混匀,于45℃水浴箱放置20min。温浴后拿出,向其加入100μL 终止液,溶液由蓝变黄时读取OD值,并绘画曲线确定数值。比较不同病情程度患儿CRP、SAA、IgM水平。SAA试剂盒购于武汉纯度生物有限公司,CRP试剂盒购于上海信裕生物科技有限公司,试剂盒购于上海科艾博生物有限公司。各组之间血清C反应蛋白、淀粉样蛋白A及免疫球蛋白M水平,并将病情程度与血清C反应蛋白,淀粉样蛋白A及免疫球蛋白水平作Pearson相关性分析。绘制曲线下面积分析单独检测和联合检测的应用价值。

2 结果

2.1 两组血清CRP、SAA、IgM水平比较 观察组CRP、SAA及IgM水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),见表1。

表1 两组血清CRP、SAA、IgM水平比较

2.2 不同病情严重程度患儿血清CRP、SAA、IgM水平比较 重型组CRP、SAA及IgM水平显著高于中型组,中型组CRP、SAA及IgM水平显著高于轻型组,差异具有统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 不同病情严重程度患儿血清CRP、SAA、IgM水平比较

2.3 血清CRP、SAA、IgM水平与病情程度的相关性比较 CRP、SAA及IgM水平与呼吸道合胞病毒感染病情程度成呈正相关性(r=0.652、0.489、0.258,P<0.001),CRP、SAA及IgM水平越高,患儿近期疗效越差。

2.4 血清CRP、SAA、IgM水平对呼吸道合胞病毒感染的诊断价值 IgM、SAA、CRP及联合诊断的曲线下面积为0.741、0.814、0.631、0.903,联合检测曲线下面积显著大于单独检测,敏感度和特异度分别为94.0%和82.0%,见表3。

表3 血清CRP、SAA、IgM水平对呼吸道合胞病毒感染的诊断价值

3 讨论

RSV感染起病急骤,患儿因自身免疫能力不成熟,抗感染能力弱,患病严重可引起中重度的呼吸困难甚至呼吸骤停。目前根据RSV感染的病情评估仅依据主观的临床表现,病原学指标诊断效能较低。现有多种研究表明,RSV感染患儿T细胞功能紊乱,体内细胞因子的变化可反映病情程度和治疗效果[4]。CRP是一类急性时相反应蛋白,在正常机体水平低下,出现感染性疾病时,6～8h水平可陡剧上升,CRP降至正常水平时间较长,血浆浓度可长时间保持稳定,水平越高表示组织损伤程度越严重,较为准确地体现免疫屏障被破坏程度[5]。报道指出,SAA作为一种多基因编码的急性敏感性反应蛋白,在感染急性期被免疫细胞大量合成释放入血,感染3～6h后水平开始升高,病原体被清除后可降至正常水平。研究表明,RSV感染可触发下呼吸道过度免疫反应,可通过各种免疫激活导致IgM水平升高[6]。

本文结果显示,观察组CRP、SAA及IgM水平显著高于对照组,证实在RSV感染后CRP、SAA及IgM水平显著升高。究其原因,SAA在受到RSV抗原的刺激后大量分泌入血,感染6h以内其含量可升高1 000倍;RSV感染可引起多器官损伤,并触发巨噬细胞释放炎性因子,导致CRP含量水平的提高;RSV作为抗原可刺激B细胞活化成熟,刺激特异性抗体大量释放,进而提高IgM浓度,与相应RSV抗原结合生成多级别生物学效应,刺激机体产生气道高反应性及炎症。有学者的报道指出,RSV感染可出现SAA水平的升高,4～6h达到峰值,与本文结果相一致[7]。此外,本文重型组CRP、SAA及IgM水平显著高于中型组,中型组CRP、SAA及IgM水平显著高于轻型组,证实预后不良或病情危重患儿CRP、SAA及IgM水平更高。也有研究指出,SAA和CRP与感染性疾病中的严重程度呈正相关,与本文结果一致[8]。究其原因,CRP、SAA及IgM水平急剧升高时,免疫系统被激活后促进B细胞的表达,诱发过敏反应,导致气道纤维化改变和慢性炎症的发生,因此CRP、SAA及IgM大量或过度表达时并不是RSV后单纯的应激行为,而是全程影响病理变化和免疫机制,CRP、SAA及IgM水平越高预示RSV病情越严重,与下呼吸道的不可逆损伤存在密切联系。有学者的报道指出,CRP、SAA及IgM水平与呼吸道合胞病毒感染病情程度成正相关性,证实CRP、SAA及IgM水平越高,患儿近期疗效越差[9]。本文结果显示,联合检测曲线下面积显著大于单独检测,证实联合检测针对病毒性感染有较高的诊断价值。究其原因,CRP水平升高多见于手术感染、恶性肿瘤、自身免疫性疾病等多种情况,单独检测某种疾病时特异性不高,且随着炎症反应被控制后数日CRP的高水平还未回落。而SAA半衰期短于CRP当病原体被清除后其数值可迅速降低。也有学者的研究显示,SAA在儿童早期感染性诊断中的敏感性高达83%[10],与本文结果相符。

综上所述,血清CRP、SAA及IgM联合检测可提高RSV的诊断效能,可高效评估RSV的病情严重程度,临床意义显著。