取卵术中不同负压吸引压力值对妊娠结局的影响

刘 彬

江西省妇幼保健院辅助生殖中心，江西 南昌 330006

随着环境污染的加剧，目前不孕症发病率呈逐年增长的趋势，体外受精—胚胎移植是治疗不孕症的最有效方法，在体外受精—胚胎移植周期中获取到的卵母细胞的质量是能否成功受孕的关键所在，也是目前生殖医学医务工作者关注的热点问题之一［1-2］。取卵作为体外受精—胚胎移植的关键一环，直接关乎到妊娠结局，体外环境如光线、温度及人为操作是影响卵子质量的因素，此外取卵时的压力值也和卵子质量相关［3-4］。既往取卵负压压力值普遍在100～200 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），且目前尚无统一压力值的相关标准，在如此大范围压力值下，获取到的卵母细胞是否会出现损伤，进而对胚胎种植、胚胎质量及妊娠结局产生影响，是目前探讨较少的问题。国内研究显示［5］，不同取卵泵负压下（120 mmHg 与160 mmHg），卵母细胞受精率、胚胎移植率和优质胚胎率随压力增加而下降，该研究中主要设置了2 个压力值，其结论有待进一步探讨，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019 年2 月—2020 年2 月江西省妇幼保健院生殖中心收治的107 例行辅助生殖技术的不孕症患者作为研究对象，使用随机摸球法将其分为A 组（n=35）、B 组（n=36）和C 组（n=36）。A 组不孕年限1～6 年，平均不孕年限（2.6±0.8） 年；BMI 18.5～27.6 kg/m2，平均BMI （22.9±3.8）kg/m2；年龄24～38 岁，平均年龄（29.3±5.8）岁；胚胎移植个数1～3 个，平均胚胎移植个数（1.9±0.4）；原发性不孕18例，继发性不孕17例。B 组不孕年限1～6年，平均不孕年限（2.7±0.7）年，BMI18.4～27.8 kg/m2，平均BMI（23.2±4.7）kg/m2，年龄23～38 岁，平均年龄（28.7±6.1）岁，胚胎移植个数1～3 个，平均胚胎移植个数（1.8±0.5），原发性不孕18 例，继发性不孕18 例。C 组不孕年限1～6年，平均不孕年限（2.9±0.8）年；BMI 18.5～27.5 kg/m2，平均BMI（23.5±4.8） kg/m2；年龄24～39 岁，平均年龄（29.4±5.8）岁；胚胎移植个数1～3 个，平均胚胎移植个数（1.8±0.7）个；原发性不孕20例，继发性不孕16例。三组患者一般资料具有可比性（P＞0.05）。

1.2 入排标准

纳入标准：（1）年龄范围22～38 岁；（2）结合临床显示因子宫内膜异位症、输卵管因素引起的不孕；（3）男方精液检查结果正常；（4）自愿参加本次研究且签署知情同意书；（5）所有患者病历资料均完整。排除标准：（1）供精移植；（2）既往不良孕产史；（3）合并子宫腺肌症、子宫畸形、卵巢占位性病变、多囊卵巢综合征等可能对本研究结果产生影响；（4）合并恶性肿瘤；（5）精神状态异常或有精神疾病史。

1.3 方法

所有患者进行黄体期长方案促排卵：在月经来潮后的第21 d，使用长效促性腺激素释放激动剂1.25 mg，在下次月经来潮后的2～5 d，抽取外周静脉血5 mL，检测促黄体生成素（LH）、促卵泡生成素（FSH）及雌二醇激素（E2）水平，若E2水平≤182 pmol/L，FSH 水平＜5 U/L，LH 水平＜5 U/L，则提示患者机体出现垂体脱敏，此时给予绝经期促性腺激素，剂量范围75～225 U/L，具体用量根据患者年龄、卵巢储备功能等情况决定。用药后采用经阴道超声检测卵巢中卵泡发育情况，以此为依据调整促性腺激素释放激动剂用量，当主导卵泡中3个直径超过16 mm、2 个直径超过17 mm 或1 个超过18 mm 时，停止用药，注射绒毛膜促性腺激素（丽珠集团丽珠制药厂生产，国药准字H44020672）10 000 U，注射完成后36 h左右进行取卵。

取卵方法：所有取卵过程均由同一医护人员进行操作，在超声引导下进行穿刺取卵，在取卵前设置3 个不同负压，分别为100 mmHg、130 mmHg、160 mmHg，取卵时采用英国WALLACE 公司生产的17G 单腔取卵针进行取卵，安装完成后启动负压吸引器，将卵泡抽吸进入大小合适的试管，并迅速转移进入胚胎培养室。

体外受精—胚胎移植：在卵子体外培养月4～6 h 后进行常规授精，授精后18 h去除卵母细胞周围颗粒细胞，评估受精情况，第3 d进行胚胎评估，判断胚胎卵裂情况。

黄体支持：使用黄体酮阴道缓释凝胶（Fleet laboratories Limited 公司生产，注册证号：H20140552 ，规格：8%：90 mg/支）90 mg进行黄体支持。

1.4 观察指标

（1）比较三组患者的进针次数、穿刺持续时间、取卵过程中出血量。（2）比较三组患者获卵率、优质胚胎率、受精率、生化妊娠率、临床妊娠率。生化妊娠根据胚胎移植14 d 后血液或尿液β-人绒毛膜促性腺激素（β-HCG）水平进行判定，生化妊娠判定标准：血β-HCG 水平＞2.5 U/L 或尿液β-HCG 阳性；临床妊娠根据胚胎移植30 d后超声检查结果判定；优质胚胎判定标准［6］：授精后第2 d 胚胎卵裂球数目达到4 个，第3 d 胚胎卵裂球数目达到8 个，且性状规整、大小均匀、透明带完整，碎片在10%以下且无颗粒现象。

1.5 统计学方法

采用SPSS 21.0 软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t 检验。计数资料以例数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组患者取卵相关指标情况

B 组与C 组患者的进针次数及穿刺持续时间均低于A组，C 组患者取卵过程中的出血量高于A 组与B 组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 三组患者取卵相关指标情况（±s）

表1 三组患者取卵相关指标情况（±s）

组别A组（n=35）B组（n=36）C组（n=36）进针次数（次）3.41±0.87 2.61±0.54 2.47±0.39穿刺持续时间（min）13.21±3.74 9.87±2.14 9.76±2.32取卵过程中出血量（mL）0.64±0.12 0.63±0.21 1.51±0.61

2.2 三组患者妊娠结局情况

B 组患者的优质胚胎率高于A 组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 三组患者妊娠结局情况（±s） 例（%）

表2 三组患者妊娠结局情况（±s） 例（%）

组别A组（n=35）B组（n=36）C组（n=36）总获卵31（88.57）35（97.22）34（94.44）总优质胚胎18（51.43）27（75.00）25（69.44）总受精22（62.86）26（72.22）25（69.44）总生化妊娠21（60.00）24（66.67）21（60.00）总临床妊娠19（54.29）23（63.89）20（55.56）

3 讨论

体外受精胚胎移植是目前治疗不孕的最有效方法，在阴道超声引导下取卵是目前医疗条件下获取卵子的最安全及最经济的方法，自超声技术被用于体外受精胚胎移植领域以来，不孕症患者的临床妊娠率不断提高。随着相关研究的不断开展，目前认为影响体外受精胚胎移植妊娠结局的相关因素较多，其中提高优质胚胎率被公认为是获得较好妊娠结局的关键所在［7-8］。关于如何获取优质卵子、降低取卵时间、改善体外受精胚胎移植患者妊娠结局是生殖医学科医务工作者关注的热点。取卵术是体外受精胚胎移植的体外操作首要环节，在取卵过程中如何设置大小合适的负压具有重要意义［9-10］。根据物理学中压强理论，在压力一定的情况下，面积越小，压强越大，管道中的液体流动速度越快。卵冠丘复合体与卵泡壁的分离是取卵术中的关键一环，在较高取卵针流速状况下，复合体迅速脱落进入管针，并进入回收系统。

卵母细胞在卵泡液中的停留时间与单个卵泡穿刺持续时间呈正比，既往研究［11］认为，取卵术中的压力范围在100～200 mmHg均是安全，但越来越多的研究［12］认为，压力设置的大小与获取到的卵母细胞的质量之间存在一定关联。一项动物实验结果显示，取卵针直径与取卵术中压力大小对母牛卵冠丘复合体的发育能力及形态具有一定关系，压力越大牛卵冠丘复合体完整率越低，但回收率增加。一项针对母猪排卵前卵泡回收的研究显示［13］，不同负压及流速下，卵母细胞回收率随压力增加而下降，卵冠丘复合体质量与负压压力大小具有密切联系，当压力处于60～125 mmHg时，对母猪进行取卵术是较为合适的。张杨等［14-15］研究显示，人体中卵子四周的卵丘数量受取卵术中压力大小影响，在160 mmHg 的较大压力下，取卵得到的卵子质量较差，因而该研究中建议将取卵术中负压设置为120 mmHg更为合适。本研究中对A组、B组和C组设置了三种不同负压，分别为100 mmHg、130 mmHg 和160 mmHg，本研究结果显示，B 组与C 组患者的进针次数及穿刺持续时间均低于A 组，C 组患者取卵过程中的出血量高于A 组与B 组。分析后认为，压力越大，取卵针中液体流动速度越快，可在更短时间内获取到更多的目标数量卵子，因此B 组与C 组的进针次数及穿刺持续时间均低于A 组，但压力过大会增加对患者组织的损伤，故C 组患者的出血量高于A 组。本研究结果显示，B 组患者的优质胚胎率明显高于A 组，且B 组临床妊娠率及生化妊娠率均高于其余两组。分析后认为，取卵术中较小压力状态下卵泡与卵巢组织不易剥离，同时会增加操作时间，由于卵巢纺锤体对周围温度变化情况极为敏感，当操作时间延长时很可能导致纺锤体的消失，取卵术中较大压力可能导致卵子孤雌激活［16-17］，对卵子的正常生理功能产生不良影响，可能是造成优质胚胎率下降的主要原因。但受到现有研究条件和时间等因素的限制，本研究纳入样本量较少，且观察指标缺乏全面性，后续研究中应增加纳入样本量与观察指标，以深入挖掘取卵术中设置不同负压吸引压力水平在改善妊娠解决中的优势及作用机制，为临床提供更多可靠依据。

综上所述，取卵术中设置130 mmHg 的负压能够提高优质胚胎率，设置较小的压力能够获得更高的操作安全性，但临床实际过程中需根据具体情况进行压力选择。