精子DNA碎片率与年龄、精液参数和生活习惯相关性分析

刘哲琪 孙洁*

单一的精液常规分析难以对男性精子质量进行全面分析和评估。近些年男性生殖门诊中就诊人数日渐增长，不育的原因也越来越复杂。目前，受到生活方式、饮食习惯，环境及压力等因素，导致发病率越来越高［1］。在特发性不育患者中有近20%的人群患有高水平的精子DNA 损伤，这成为了一个导致男性不育的重要因素［2］。传统的精液常规检查，已经不能够全面的反映精子功能的指标。在精子DNA 损伤程度方面，许多研究发现增加的DNA 碎片率（DFI）会对受孕率产生不利影响，精子中的DNA 损伤会影响后代的健康和幸福［3］。精子DFI 作为临床上反映精子遗传物质完整性的重要指标，影响男性的生育功能［4］。近年来研究发现精子DFI 这项指标可以更好的评价男性生殖功能［5］。此外，男性精液质量还会随着年龄的增长而下降，这会导致精子DFI 损伤，其具体表现通常是精子量的减少、精子畸形概率和程度增加以及精子活力减弱等。精子DNA 是重要的遗传信息载体，而精子染色质结构的完整性是精卵正常受精以及胚胎发育的关键保证［6-7］。本资料旨在分析男性精子DFI 与年龄、精液参数和生活习惯相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2020 年6 月至2022 年6 月于本院就诊的405 例男性作为观察组，观察组年龄22～55 岁，平均（32.23±4.94）岁，婚后性生活正常，未采取任何避孕措施，未孕＞1 年。纳入标准：世界卫生组织制定的《人类精液检查与处理实验室手册》中的相关标准；本次研究已充分告知患者，并取得其同意与配合。

1.2 研究方法 （1）精液标本采集：患者在禁欲2～7 d后，通过手淫法采集其全部精液于干燥、洁净、无菌的广口采精杯中，立即送往实验室，接受并放入37 ℃的恒温水浴箱中。（2）精液分析：记录精液液化时间，待精液完全液化后，观察并记录精液量、pH 值、粘稠度及颜色。再将精液标本进行充分混匀，使用移液器吸取4 μL 精液于精子检测板上，采用SAS 赛司计算机辅助精子分析（CASA）系统检测标本，其中对每份标本进行≥200 个的精子随机采样。

1.3 统计学方法 采用stata15 统计学软件。首先进行指标的描述性统计分析，其次对各指标进行相关性分析，最后采用Logistic 回归分析方法研究抽烟、蒸桑拿对精子DFI 的影响。

2 结果

2.1 各个指标的水平 见表1。

表1 各个指标的统计分析

2.2 各指标相关性分析 相关系数表反映了两个变量间的相关关系。从表2 可见，年龄与多个变量相关，主要体现在年龄与精子DFI 正相关、与精子正常形态率负相关、与雌二醇负相关。年龄与精子的质量指标相关性强。精子DFI 与精子正常形态、PR 负相关（碎片率越高，正常形态率越低、前向运动精子也越低）。精子正常形态与PR 正相关，与精子浓度正相关。雌二醇的含量与Zn 含量负相关。

表2 各指标相关性分析

2.3 生活习惯相关性分析 从表3 可见，在0.05 显著性水平下不抽烟、不喝酒与精子DFI 相关，即不抽烟、不喝酒的群体碎片率相对较高，不抽烟、不喝酒与正常形态率、PR 前向精子正相关，即不抽烟、不喝酒的群体正常精子形态率相对较高，PR 运动精子率也较高。蒸桑拿与精子DFI 也具有相关关系，蒸桑拿的群体DFI 更高。此外，考虑到本研究中可能存在的其他可变因素，本研究仍需进一步的大样本量对实验结果进行验证。

表3 生活习惯相关性分析

2.4 回归模型变量设置 以精子碎片率为因变量进行基础回归，模型变量设置情况如表4 所示。

表4 回归模型变量设置

2.5 回归分析结果 模型一用精子DFI 进行基础回归发现，抽烟、蒸桑拿都会增加精子DFI 的程度，并且抽烟对精子DFI 的影响最大，同时年龄也是影响精子DFI 的最大因素，随着年龄的上升，精子DFI 下降。模型二进一步将不抽烟、每日抽烟数量划分为不抽烟、每日＜10、10～20、＞20 的连续变量，喝酒划分为不喝酒、偶尔喝酒、经常喝酒的连续变量，发现与模型一的结果一致，吸烟、蒸桑拿都会导致精子DFI 的提升。模型三中，剔除不抽烟群体，加入是否超过10 年烟龄这一变量进行分析，发现每日的抽烟数量依然会影响精子DFI，同时烟龄超过10 年的群体精子DFI 也更高。

见表5。

表5 回归分析结果

3 讨论

不育症作为一项男性生育疾病，严重影响社会生育质量。近年来流行病学领域对该病症进行大量且深入的调查研究，发现男性精液质量在近些年呈现出较为明显的下降情况，而这一现象和当前适育人群的社会生活方式以及整体生态环境污染及恶化存在紧密的联系。传统的精液常规检查，已经不能够全面的反映精子功能的指标。为减少不育问题给家庭及社会带来的负面影响，需针对不育症男性患者的精液进行全面且透彻的分析，以更直观了解其生育功能，采用精子DFI 检测来判断精子功能好坏已经受到越来越广泛的关注。本文研究证实精子DFI 和男性年龄、生殖激素水平、生活习惯与精子DFI 有相关性。生活习惯或许是造成男性生育力下降的机制之一，但是考虑到当前实验在选择研究对象时可能存在未有效鉴别和剔除其他可变因素的情况，本研究尚需进行大样本量验证。作者期望通过本研究分析精液常规检查指标和形态学与精子DNA 完整性的相关性以及活力、研究者年龄等因素对精子DNA 完整性的影响，指导临床中医药的治疗。