氯氟醚菊酯对斑马鱼胚胎及仔鱼心脏发育的毒性及氧化损伤作用

李瑞瑞, 周 宁, 吴梦琪, 徐文平, 陶黎明, 张 阳

(上海市化学生物学重点实验室，华东理工大学 药学院，上海 200237)

氯氟醚菊酯 (结构式见图式1) 是一种广泛使用的拟除虫菊酯类杀虫剂[1]。目前，它是市场上家庭用卫生杀虫剂的主要品种之一，常被用作蚊香或蚊香液类产品[2]。伴随它的大量使用，其环境暴露风险也受到了越来越多的关注。2017 年Pierre等使用大鼠模型评价了氯氟醚菊酯类蚊香的急性毒性，发现该产品经肺吸收，具有高毒性风险，主要表现为麻木、嗜睡等[3]。2021 年，埃及报道，吸入氯氟醚菊酯类蚊香烟雾的小白鼠出现细胞凋亡、组织病理学改变和生化指标的破坏[4]。也有研究表明，含氯氟醚菊酯的蚊香对人体存在一定的毒性风险，如肺炎[5]、脑损伤[6]、呼吸道黏膜损伤和过敏[7]等。此处，还有大量研究表明，同类别农用拟除虫菊酯类杀虫剂 (高效氯氰菊酯、溴氰菊酯、功夫菊酯等) 的持续使用会对人体和动物产生多种毒性，比如神经、内分泌干扰[8]、发育及生殖[9]、心脏毒性等。其中溴氰菊酯还可引起斑马鱼的发育毒性、细胞凋亡、心血管系统损伤和焦虑样行为，也会促进谷氨酸能突触之间的兴奋性神经递质的释放，导致成年斑马鱼社会行为的过度活跃[10]；高效氯氰菊酯可能通过延缓性腺发育、干扰性激素分泌和影响HPG 轴基因的表达而对斑马鱼的生殖系统产生毒性[11]。

图式 1 氯氟醚菊酯结构式Scheme 1 The structural formula of meperfluthrin

生物体细胞内活性氧物质 (reactive oxygen species，ROS) 的过量产生与累积会导致氧化应激的发生，从而打破氧化还原平衡状态[12]。氧化应激的发生可能引起DNA、蛋白质和脂质等生物分子的氧化损伤，导致细胞功能异常，甚至发生凋亡或坏死[13]。为了对抗氧化应激产生的有害效应，生物体内有一套复杂的抗氧化防御系统，包括抗氧化酶，如超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT) 及谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px) 等。这些抗氧化物质可以中和ROS，从而减轻其对细胞的损伤[14-15]。心脏作为推动血液循环的主要器官，对于动物的生长发育乃至存活都具有重要的生命意义。生物体一旦发生氧化应激，对心脏组织将产生一定的毒害作用，同时会引发生物体的心血管病变等。斑马鱼Danio rerio模型因胎心透明，心脏及血管发育等表观形态易于被观察研究，目前已被广泛应用到毒理学研究领域[16]。

鉴于此，本研究评估了氯氟醚菊酯对斑马鱼心脏结构和功能的影响，包括心房和心室的形成、心脏收缩和泵血功能等；初步探讨了氯氟醚菊酯引起心血管毒性的潜在机制，旨在探究氯氟醚菊酯急性暴露对斑马鱼胚胎及仔鱼发育时期心血管发育的毒性效应，为氯氟醚菊酯的安全使用与风险管控提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物

斑马鱼成鱼由国家斑马鱼资源中心提供。雌、雄斑马鱼(5 月大) 分别饲养，饲养水温控制在(28 ± 1) ℃，pH 值为7.2，电导率约为500 μS/cm，饲养房内光周期设置光照14 h 和黑暗10 h 交替，每日早、晚喂食鲜活丰年虫。

1.2 试剂和材料

氯氟醚菊酯 (meperfluthrin，CAS：352271-52-4；纯度≥99.5%)，江苏扬农化工股份有限公司提供。将氯氟醚菊酯粉末溶于二甲基亚砜 (DMSO)，于4 ℃下保存。2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)、RIPA 裂解缓冲液和吖啶橙 (AO,acridine orange) 染色试剂，均来自Sigma-Aldrich(美国)。Caspase 兔抗，购自生工生物 (中国上海)。与氧化应激有关的商业检测试剂盒，购自碧云天生物技术有限公司。用于mRNA 分析的TRIzol 试剂、逆转录酶、SYBR-Green Master Mix 和引物，均购自武汉赛维尔生物科技有限公司。CFX 96 孔，购自Labselect (中国北京)。磷酸盐缓冲溶液 (PBS，phosphate buffer saline) 等其他化学试剂，均购自上海泰坦科技有限公司。

A1 HD25 共聚焦显微镜 (日本尼康公司)；SMZ745T 体式显微镜 (日本尼康公司)；CSW-DZ01倒置荧光显微镜 (德国徕卡公司)；QuantStudio 5 实时荧光定量PCR 仪 (美国Thermo Fisher 公司)。

1.3 试验方法

1.3.1 急性毒性测试 将斑马鱼成鱼(雌雄比例1 : 1)在产卵前1 晚置于育种缸中进行黑暗处理，第2 天早上抽掉缸中隔板，使其在强光刺激下开始交配。交配后1 h 采集胚胎，用胚胎培养液清洗3 次，置于28 ℃恒温培养箱内。将受精后6 h 的斑马鱼胚胎分别暴露于质量浓度分别为0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 和3.2 μg/mL 的氯氟醚菊酯药液中后，记录胚胎暴露72 h 的死亡情况。

将受精后6 h 的斑马鱼胚胎分别暴露于0、0.2、0.4、0.8 μg/mL 的氯氟醚菊酯药液中，每24 h 记录心率 (每分钟跳动次数，bpm)。于48 h 和72 h统计并计算孵化率。

1.3.2 心血管毒性评估 基于本课题组先前的研究，静脉窦-动脉球 (SV-BA) 的间距和心包面积被勾勒出，以测量心包水肿的严重程度[13]。Tg(kdrl:EGFP)斑马鱼的胚胎分别经0、0.2、0.4、0.8 μg/mL的氯氟醚菊酯药液暴露72 h 后，使用PBS 清洗3 次，并用5 mg/L 的三卡因麻醉，而后在共聚焦显微镜下采集图像，使用NIS 软件进行图像分析，通过心脏部位的荧光强度和心房与心室的面积评估氯氟醚菊酯对斑马鱼仔鱼的心脏毒性；通过肠下静脉的血管排列情况评价氯氟醚菊酯对仔鱼的血管毒性。

1.3.3 与氧化应激相关的酶活性检测 为了评估分别暴露于0、0.2、0.4、0.8 μg/mL 氯氟醚菊酯药液72 h 胚胎的氧化应激水平，检测了与氧化应激有关的抗氧化酶 (SOD、CAT、GSH-Px) 活性以及丙二醛 (MDA) 和ROS 的含量水平，通过检测心脏部位的荧光强度评价药物对胚胎心脏的毒性效应。

每组收集30 枚胚胎，随机取样，在暴露72 h后用PBS 清洗3 次，并在冰上匀浆，根据先前的研究报告，使用试剂盒测定SOD、CAT、GSH-Px的酶活性和MDA 的含量水平，使用DCFH-DA 探针检测在药液中暴露72 h 后斑马鱼仔鱼的活性氧水平[17]。经不同浓度的氯氟醚菊酯药液处理斑马鱼胚胎72 h 后，用PBS 洗涤3 次，之后用5 mL ROS 检测液 (20 μmol/L DCFH-DA) 在28 ℃黑暗条件下孵育30 min。随后，用PBS 清洗仔鱼3 次。最后，使用倒置荧光显微镜捕捉整个仔鱼的实时图像。

1.3.4 病理学切片 为了评估斑马鱼心脏的组织病理学变化，进行了苏木精伊红 (hematoxylin-eosin,HE) 染色。将暴露于0、0.2、0.4、0.8 μg/mL 的氯氟醚菊酯药液72 h 的野生型AB 斑马鱼仔鱼在4%多聚甲醛溶液、4 ℃环境下固定过夜。然后用HE染色进行组织学观察。于体式显微镜下采集图像。

1.3.5 RNA 提取和实时荧光定量PCR 用TRIzol试剂提取0、0.2、0.4、0.8 μg/mL 的72 hpf (hours post fertiliation， 受精后小时)仔鱼 (每组约30 尾)的总RNA。通过qRT-PCR 检测凋亡基因的表达水平，包括心肌蛋白标记基因myl7、心肌细胞转录因子myh6和心室早期发育标记基因vmhc。

引物由赛维尔公司合成，引物序列如表1 所示。qRT-PCR 反应体系根据2 × Universal Blue SYBR Green qPCR Master Mix 试剂盒(G3326)开展，实时荧光定量PCR 仪的反应运行程序为：①95 ℃预变性30 s；②95 ℃变性15 s，60 ℃退火10 s，72 ℃延伸30 s，40 个循环；③熔解曲线程序：95 ℃，15 s；60 ℃，1 min；95 ℃，20 s，步进0.15 ℃/s。以β-actin为内参，用2-ΔΔCt法计算目的基因的表达水平[13]。

表1 引物序列Table 1 Primer sequences

1.3.6 统计学分析 实验数据的统计以3 个重复为单位，采用SPSS 25.0 计算机程序 (IBM 公司，美国纽约) 进行。分析结果以平均值 ± 标准差(SD) 表示。显著性概率水平设定为显著差异*，P≤ 0.05；极显著差异**，P≤ 0.01。

2 结果与分析

2.1 急性毒性

根据不同浓度检测终点统计到的死亡率数据，利用OriginPro 2023b 统计学软件绘制了“浓度-致死率”效应曲线，如图1 所示，并拟合得到了氯氟醚菊酯对斑马鱼的72 h-LC50值为0.756 μg/mL，95%置信区间为0.724～1.003 μg/mL。根据急性毒性结果，选择LC50值作为最高浓度，故将药液暴露质量浓度设置为0、0.2、0.4、0.8 μg/mL。

图1 氯氟醚菊酯对斑马鱼胚胎-仔鱼的致死率(72 h)Fig.1 Mortality of meperfluthrin to zebrafish embryo-larvae (72 h)

2.2 氯氟醚菊酯对斑马鱼胚胎的发育毒性

2.2.1 氯氟醚菊酯诱导斑马鱼胚胎的发育畸形

将6 hpf 的斑马鱼胚胎在不同质量浓度的氯氟醚菊酯中急性暴露72 h，每24 h 进行一次表型观察，结果发现，斑马鱼胚胎从24 h 开始出现不同程度的畸形特征，包括脊柱弯曲、尾部弯曲、心包水肿或卵黄囊肿大 (图2A)，其中0.4 和0.8 μg/mL剂量暴露组的致畸率显著，卵黄囊肿大的畸形占比最高 (图2B)。

图2 A.氯氟醚菊酯诱导斑马鱼产生脊柱弯曲 (SC)、尾部弯曲 (TC)、卵黄囊肿大 (YSE)和心包水肿 (PCE) 等畸形现象；B.氯氟醚菊酯对斑马鱼的畸形率统计Fig.2 A.Meperfluthrin induced malformations including spinal curvature (SC), tail curvature (TC), yolk sac edema (YSE),and pericardial edema (PCE) in zebrafish; B.Statistical analysis of malformation rate in zebrafish induced by meperfluthrin

2.2.2 氯氟醚菊酯对斑马鱼胚胎及仔鱼的发育毒性 斑马鱼胚胎暴露于梯度质量浓度的氯氟醚菊酯24、48 和72 h 后，其心率与对照组相比被显著抑制 (图3A)，其中48 h 的心率最高。如图3B 所示，0.2 μg/mL 的氯氟醚菊酯对斑马鱼胚胎的孵化率没有影响，但在0.4 和0.8 μg/mL 剂量暴露组中，48 hpf 的斑马鱼胚胎孵化显著延迟，72 hpf 的胚胎孵化不受暴露液质量浓度的影响，这可能是因为48 hpf 的胚胎各项机能发育不完善，免疫力较弱，难以抵御药剂的作用。由图3C 可以看出，0.4 和0.8 μg/mL 的剂量组，斑马鱼仔鱼的体长明显缩短。此外，随着氯氟醚菊酯质量浓度的增大，斑马鱼仔鱼眼部和头部面积出现显著减小(图3D、3E)。说明氯氟醚菊酯的暴露延缓了斑马鱼胚胎的早期发育。

图3 氯氟醚菊酯诱导斑马鱼胚胎的发育毒性Fig.3 Developmental toxicity induced by meperfluthrin in zebrafish embryos

2.3 氯氟醚菊酯对斑马鱼仔鱼的心脏毒性

2.3.1 氯氟醚菊酯诱导斑马鱼仔鱼心脏线性化采用HE 染色观察斑马鱼仔鱼心脏的组织病理学变化，结果 (图4) 表明，与对照相比，0.2、0.4 和0.8 μg/mL 的氯氟醚菊酯处理使斑马鱼仔鱼心脏的心室扩大和线性化 (白色箭头指示)，说明氯氟醚菊酯损害了斑马鱼仔鱼心脏的发育形态。

图4 氯氟醚菊酯对斑马鱼心脏组织的影响(72 h)Fig.4 Effects of meperfluthrin on zebrafish heart tissue (72 h)

2.3.2 氯氟醚菊酯对斑马鱼仔鱼心脏SV-BA 间距的影响 测量药物暴露后的斑马鱼仔鱼的SVBA 间距和心包面积发现，与对照相比，暴露于0.2、0.4 和0.8 μg/mL 的氯氟醚菊酯的仔鱼呈现SV-BA间距显著加宽 (图5B) 和心包面积增大 (图5C) 的现象，并具有浓度依赖性。

图5 氯氟醚菊酯对斑马鱼仔鱼心脏的SV-BA 间距 (B) 和心包面积 (C) 的影响(72 h)Fig.5 Effect of meperfluthrin on cardic SV-BA spacing (B) and pericardial area (C) on zebrafish larvae (72 h)

2.3.3 氯氟醚菊酯诱导斑马鱼心脏的心房心室分化 斑马鱼的心脏是脊椎动物胚胎中第一个发育成熟并具有生理功能的器官，由心房和心室两个腔室组成[18-19]。若心脏受到影响，心房和心室的位置将发生改变，SV-BA 距离也会发生相应的改变。本研究结果发现，经3 个剂量的氯氟醚菊酯处理72 h，斑马鱼仔鱼的心房和心室发生分化 (图6)，并且随着药剂质量浓度的增加，心房和心室间距较未处理组相比加大，这正好验证了HE 染色和SV-BA 的结果。

图6 氯氟醚菊酯暴露对斑马鱼仔鱼心房心室位置的影响(72 h)Fig.6 Effect of meperfluthrin exposure on the position of the atria and ventricles of zebrafish larvae hearts (72 h)

2.3.4 氯氟醚菊酯诱导斑马鱼心脏的基因表达失调myl7在斑马鱼的心房和心室中表达，与其心肌细胞增殖等生理过程密切相关；myh6是与斑马鱼心脏发育有关的重要基因；vmhc是最早标记心室的标记基因[20]。如图7 所示，斑马鱼胚胎暴露于3 个氯氟醚菊酯处理组72 h 后，与对照相比，myl7、myh6和vmhc的表达量均随着药剂质量浓度的增加而显著降低。说明氯氟醚菊酯可能通过降低myl7、myh6和vmhc基因的表达而损伤心肌细胞的功能，从而产生对斑马鱼心脏的毒性。

图7 暴露于氯氟醚菊酯的斑马鱼心脏发育相关的基因表达水平(72 h)Fig.7 Expression levels of genes associated with cardiac development in zebrafish exposed to meperfluthrin (72 h)

2.4 氯氟醚菊酯对斑马鱼仔鱼血管的毒性

2.4.1 氯氟醚菊酯对斑马鱼心脏部位血管发育的影响 采用6 hpf 的转基因斑马鱼胚胎进行药剂暴露，发现与对照相比，经0.2、0.4 和0.8 μg/mL 的氯氟醚菊酯处理的斑马鱼仔鱼心脏部位的血管发育不完全 (图8)，说明氯氟醚菊酯会导致斑马鱼仔鱼心脏的血管出现发育缺陷。

图8 氯氟醚菊酯暴露对斑马鱼仔鱼心脏血管发育的影响Fig.8 Effect of meperfluthrin exposure on zebrafish larvae cardiac vascular development

2.4.2 氯氟醚菊酯诱导斑马鱼肠下静脉发育缺陷

将经药剂处理72 h 的斑马鱼仔鱼置于玻璃皿中，于共聚焦显微镜下采集图像。结果表明，与对照相比，处理组的肠下静脉排列杂乱，分布不均匀 (图9)。说明0.2、0.4 和0.8 μg/mL 的氯氟醚菊酯处理胚胎72 h 后引起了斑马鱼肠下静脉发育异常。

图9 氯氟醚菊酯诱导对斑马鱼肠下静脉的影响(72 h)Fig.9 Effect of meperfluthrin induction on zebrafish subintestinal veins (72 h)

2.5 氯氟醚菊酯对斑马鱼的氧化应激效应

2.5.1 氯氟醚菊酯诱导斑马鱼心脏产生ROS 本研究结果表明，与对照相比，氯氟醚菊酯处理组诱导了斑马鱼仔鱼心脏处ROS 产生，并且这种现象呈现剂量依赖性 (图10A 和10B)，说明氯氟醚菊酯诱导斑马鱼的心脏毒性可能是通过氧化应激这一途径。

图10 氯氟醚菊酯对斑马鱼氧化应激的影响(72 h)Fig.10 Effect of meperfluthrin on oxidative stress in zebrafish (72 h)

2.5.2 氯氟醚菊酯对MDA 含量的影响 6 hpf 的斑马鱼胚胎在不同质量浓度的氯氟醚菊酯中暴露72 h 后，与对照组相比，0.2、0.4、0.8 μg/mL 的暴露组中斑马鱼仔鱼的MDA 含量均显著增加(P均≤0.05) (图10C)，说明氯氟醚菊酯促进了斑马鱼体内MDA 的产生，可能引起其的氧化应激效应。

2.5.3 氯氟醚菊酯对抗氧化防御系统相关酶的影响 经过72 h 的氯氟醚菊酯暴露后，与对照组相比，0.4 和0.8 μg/mL 的暴露组中3 种酶的活性均显著下降，其中最高浓度处理组的SOD 和GSHPx 的酶活性分别仅占对照组的29.87%和44.36%(图10D)，说明氯氟醚菊酯暴露引起了斑马鱼抗氧化防御系统的崩溃，使得过量的ROS 无法被清除而导致氧化损伤。

3 结论与讨论

氯氟醚菊酯是目前市场上销量最大的卫生用杀虫剂品种之一，它的环境安全风险受到了广泛关注。本研究通过研究氯氟醚菊酯急性暴露对斑马鱼胚胎发育的影响，尤其是对其心血管系统发育的影响，评价了氯氟醚菊酯的环境安全风险和毒理学特征。

斑马鱼的胚胎期是其生命周期中最重要的时期之一，早期发育过程相对快速且容易观察[21]。将斑马鱼胚胎暴露于四溴菊酯，发现四溴菊酯会导致斑马鱼的心血管发育异常和红细胞生成障碍等，同时胚胎还发生了氧化应激现象[22]。本研究结果表明，暴露于氯氟醚菊酯的斑马鱼胚胎出现了不同程度的畸形 (图2A)，在0.4 和0.8 μg/mL的氯氟醚菊酯下暴露72 h 的斑马鱼畸形特征尤为显著，并且卵黄囊水肿的畸形率最高 (图2B)。这可能是因为卵黄囊是由蛋白质和脂质组成的透明囊泡，是为斑马鱼的早期发育提供营养和支持的，其在受精卵形成后不久就开始退化变薄，蛋白质和脂质逐渐被胚胎吸收和利用，此时卵黄囊对外界污染物的抵抗能力下降，更易遭受氯氟醚菊酯的胁迫。此外，氯氟醚菊酯的暴露会造成斑马鱼胚胎及仔鱼的早期发育毒性，如心率变化、体长变短、头眼发育缺陷等，这可能导致斑马鱼对外界刺激的反应受损。

斑马鱼已被广泛用作研究心脏发育、评估心脏结构和功能、探索毒性机制以及进行药物筛选等研究的可信赖的模式生物[23]。Park 等的研究表明，卫生用菊酯类杀虫剂联苯菊酯对斑马鱼胚胎最显著的病理诱导特征是心脏水肿[24]。SV-BA 间距可反映斑马鱼心房和心室的位置变化，通过在体式显微镜下测量SV-BA 间距可判断受试化合物对心脏的影响[25]。与对照相比，暴露于氯氟醚菊酯72 h 的斑马鱼仔鱼心脏的SV-BA 间距显著增大，心房心室出现明显分化，这可能是由于氯氟醚菊酯诱导斑马鱼心脏发育异常，导致心腔变形，从而引起压力改变，使得SV-BA 间距受到影响。心脏形态学结果显示，暴露于氯氟醚菊酯的斑马鱼仔鱼的心包面积与对照相比也显著增加(图4、图5B)。myl7、myh6、vmhc分别调节心肌收缩、维持心肌结构和推动血液泵出，共同确保斑马鱼心脏的正常功能和循环系统的稳定[26]。在心脏分化过程中，早在14 节段期就可以在前侧板中胚层中观察到肌球蛋白基因的表达，并且在少数细胞中开始表达myl7，它与肌球蛋白重链 (如myh6) 相互作用，形成心肌纤维的骨架[27]。vmhc主要参与心肌的收缩过程，推动血液从心室排出[28]。这3 种基因的表达失调说明斑马鱼的心肌细胞在氯氟醚菊酯诱导后功能受损 (图7)，这可能与观察到的心脏缺陷和心包水肿有关。这些结果表明，氯氟醚菊酯分别从发育、结构和功能等方面对斑马鱼的心脏造成了严重损伤。

有研究表明，联苯菊酯可通过抑制斑马鱼胚胎发育过程中的血管生成而抑制器官发育，其机制可能与肠道氧化应激和炎症反应有关[24]。本研究结果表明，氯氟醚菊酯可诱导斑马鱼心脏部位的血管发育异常 (图8)，这说明氯氟醚菊酯暴露可能影响了斑马鱼血管的运输功能，导致心脏无法正常供血，进而影响心脏发育。这可能也是氯氟醚菊酯引起斑马鱼心脏毒性的原因之一，并且这一毒性可能是通过氧化应激实现的。斑马鱼的肠下静脉在胚胎发育中涉及到血液循环、营养吸收、免疫功能和器官发育等功能，氯氟醚菊酯的暴露影响了肠下静脉的均匀排列，与对照相比静脉血管出现分支，排列杂乱 (图9)，说明氯氟醚菊酯诱导斑马鱼产生了不可逆的血管毒性，对其进行研究有助于深入了解与斑马鱼胚胎发育相关的疾病和畸形的形成机制[29]。

拟除虫菊酯类杀虫剂，如氯氰菊酯可能会增加活性氧的产生，影响抗氧化酶的活性，从而导致氧化应激，引起细胞内的炎症反应，进而导致代谢紊乱等[30-31]。氧化应激是导致机体组织产生病理表现的关键因素，心血管、肝脏等疾病都与活性氧 (ROS) 密切相关[32]。ROS 是重要的细胞信号分子，但过量的ROS 产生可能会导致氧化应激和细胞损伤，导致不可逆转的细胞凋亡和死亡[33]。同时氧化应激可诱导细胞脂质过氧化，破坏细胞膜的完整性，产生具有高活性的MDA[34]，这可能影响细胞内的信号传递，导致细胞凋亡、氧化应激和DNA 损伤等不良效应[35]，而鱼类的抗氧化防御机制用来对抗氧化应激和脂质过氧化。有研究称，家用菊酯类杀虫剂炔丙菊酯和四氟苯菊酯等均能诱导斑马鱼抗氧化酶的变化，增加脂质过氧化和氢过氧化物[36]。本研究也表明，氯氟醚菊酯诱导斑马鱼心脏部位产生了过量的ROS (图10A)，同时SOD、CAT、GSH-Px 等抗氧化酶的活性也因药物作用而减少 (图10B)，MDA 含量显著增加(图10C)，这导致了氧化应激的加剧，使细胞遭受不可逆转的损伤，最终影响器官和组织的功能。

本研究使用斑马鱼为模型对氯氟醚菊酯的毒理学效应进行了探究。结果表明，氯氟醚菊酯对斑马鱼胚胎的72 h-LC50值为0.756 μg/mL；氯氟醚菊酯急性暴露引起了斑马鱼胚胎及仔鱼的发育毒性 (心率变缓、孵化率降低、头眼发育缺陷、体长缩短) 和器官畸形 (心包水肿、卵黄囊肿大、脊柱和尾部弯曲)；心血管毒性 (心脏线性化、SVBA 间距增大、心房和心室分化、血管发育不完全) 和氧化应激效应 (ROS 产生过量，MDA 含量增加，抗氧化酶活性降低)。本研究揭示了卫生杀虫剂氯氟醚菊酯的环境风险及毒性效应，初步阐明了氯氟醚菊酯诱导斑马鱼胚胎及仔鱼心脏毒性发生的潜在机制；研究结果增进了氯氟醚菊酯的毒理学认识，有利于促进环境友好型卫生杀虫剂的开发和使用。