首发精神分裂症患者血清乙酰胆碱酯酶、miR-137表达与PANSS评分的相关性分析

刘义宁,李德敏,邢晓天,杨利芹（天津市安定医院,天津 300000）

精神分裂症是一种临床常见的涉及情感、思维、感知觉、行为等障碍和精神活动不协调的重型精神疾病，多发于青壮年时期[1]。精神分裂症若不能及时缓解，患者可能会出现毁坏物品、攻击他人、自残、自杀等行为，还可能并发代谢综合征、心血管疾病、糖尿病等，严重威胁患者及他人生命安全[2-3]。探寻精神分裂症特异性生物标志物，对临床病情评估和治疗方案确定有重要意义。Matias[4]等人的研究表明，乙酰胆碱酯酶活性与抑郁症进展中胆碱能神经传递过程密切相关。有研究[5]表明，微小RNA-137（microRNA-137，miR-137）在神经系统发育、分化、成熟过程中有重要作用，可能是人类神经、肿瘤疾病治疗靶点。研究[6]显示miR-137与精神分裂症的发生、发展有关。但当前鲜有针对乙酰胆碱酯酶、miR-137表达与精神分裂症关系的探究，因此本研究通过检测首发精神分裂症患者治疗前后血清乙酰胆碱酯酶、miR-137表达水平，分析与PANSS评分相关性，探究二者与首发精神分裂症患者病情严重程度的关系及在疾病进展中的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年6月-2019年6月天津市安定医院收治的首发精神分裂症患者120例作为首发精神分裂症组，其中男性63例，女性57例，年龄18-47岁，平均（27.31±8.65）岁。纳入标准：①根据美国精神疾病诊断和统计手册第5版（DSM-V），确诊为精神分裂症急性期患者，且阳性与阴性症状量表（Positive and negative syndrome scale，PANSS）总分≥60分[7]。②右利手。③首次发病，入组前3个月内未服用过抗抑郁或精神类药物。④临床资料完整。排除标准：①患有脑部外伤及其他神经系统类疾病。②合并患有免疫系统疾病或心血管疾病。③妊娠期或哺乳期患者。④有听说功能障碍患者。另选取同期在我院体检显示健康者120例作为健康对照组，其中男性66例，女性54例，年龄16-45岁，平均（26.47±8.26）岁。本研究经医院伦理委员会审批通过。

1.2 主要仪器和试剂 实时荧光定量（Quantitative Real-time PCR，qRT-PCR）仪、qRT-PCR试剂盒、RNA提取试剂盒、反转录试剂盒、乙酰胆碱酯酶检测试剂盒。

1.3 方法

1.3.1 样本采集及临床资料收集 健康对照组于体检时清晨（7:00-9:00），首发精神分裂症组患者于入组后次日清晨（7:00-9:00）及治疗4周后次日清晨（7:00-9:00）采集空腹外周静脉血5mL，以4℃、3000r/min离心15min，取上层清液分装于无菌EP管中，于-80℃保存，用于检测血清乙酰胆碱酯酶及miR-137表达水平。

于患者入组时收集患者性别、年龄、身体质量指数（Body mass index，BMI）、吸烟史、家族史、受教育程度等临床资料。

1.3.2 血清乙酰胆碱酯酶及miR-137表达水平检测 采用化学比色法进行血清乙酰胆碱酯酶检测，严格按照试剂盒说明书进行操作。采用qRT-PCR法进行血清miR-137表达水平检测。使用试剂盒提取RNA并反转录为cDNA后，用于qRT-PCR实验。qRT-PCR引物见表1。20μL反应体系如下：上、下游引物各2μ L，cDNA 2μL，Mix 10μL，ROX 0.4μL，无酶水3.6μ L。反应步骤如下：95℃，5min，1个循环；95℃，14s；63℃，35s；72℃，16s；40个循环，一个样品三次重复。采用2-ΔΔCT法计算miR-137表达水平。

表1 qRT-PCR引物

1.3.3 治疗方法 所有入组患者均应用非典型抗精神病药物利培酮治疗，初始剂量为2mg/d，根据病情进展逐步调整药物剂量，4周内平均剂量为4.5mg/d，剂量范围为2-6mg/d。在治疗剂量下，患者很少发生锥体外系不良反应，若发生椎体外系不良反应，则用苯海索（2-8mg/d）对抗，同时不合并其他药物治疗。此外，根据患者情况采取电抽搐、心理等治疗。

1.3.4 疗效判定 治疗4周后进行PANSS评定，由经过量表训练且具有5年临床经验的精神科医师进行操作，确保评分准确性。记录患者PANSS总分、阳性症状评分、阴性症状评分及一般精神病理评分。根据PANSS评分拟定疗效判定标准，当PANSS评分降低≥75%为临床治愈，当PANSS评分降低≥50%且＜75%为显著进步，当PANSS评分降低≥25%且＜50%为进步，反之为无效。

1.4 统计学分析 用SPSS20.0软件对本文中数据进行分析，计量资料以（）表示，采用独立样本t检验；计数资料用[n(%)]表示，采用χ2检验。采用Pearson法进行相关性分析，P＜0.05表示数据之间差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 首发精神分裂症组和健康对照组一般资料比较 如表2所示，首发精神分裂症组和健康对照组性别比例、年龄、BMI、受教育程度、吸烟比例、有无家族史比例比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

表2 两组一般资料比较[()/n(%)]

表2 两组一般资料比较[()/n(%)]

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2.2 首发精神分裂症组和健康对照组血清乙酰胆碱酯酶、miR-137表达水平比较 首发精神分裂症组患者血清乙酰胆碱酯酶表达水平明显高于健康对照组（P＜0.05），miR-137表达水平明显低于健康对照组（P＜0.05），见表3。

表3 两组血清乙酰胆碱酯酶、miR-137表达水平比较()

表3 两组血清乙酰胆碱酯酶、miR-137表达水平比较()

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2.3 治疗前后首发精神分裂症组患者血清乙酰胆碱酯酶、miR-137表达水平及PANSS总分比较 治疗4周后，首发精神分裂症组患者血清乙酰胆碱酯酶及PANSS总分明显低于治疗前（P＜0.05），miR-137表达水平明显高于治疗前（P＜0.05），见表4。

表4 治疗前后首发精神分裂症组患者血清乙酰胆碱酯酶、miR-137表达水平及PANSS总分比较()

表4 治疗前后首发精神分裂症组患者血清乙酰胆碱酯酶、miR-137表达水平及PANSS总分比较()

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2.4 治疗后首发精神分裂症组患者不同疗效血清乙酰胆碱酯酶、miR-137表达水平比较 相对于临床治愈，治疗4周后显著进步、进步及无效患者乙酰胆碱酯酶依次升高、miR-137表达水平依次降低（P＜0.05），见表5。

表5 治疗后首发精神分裂症组患者不同疗效血清乙酰胆碱酯酶、miR-137表达水平比较()

表5 治疗后首发精神分裂症组患者不同疗效血清乙酰胆碱酯酶、miR-137表达水平比较()

注：与临床治愈比较，aP＜0.05；与显著进步比较，bP＜0.05。

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2.5 治疗后首发精神分裂症组患者血清乙酰胆碱酯酶、miR-137表达水平与PANSS评分相关性 如表6所示，治疗4周后，首发精神分裂症组患者血清乙酰胆碱酯酶表达水平与PANSS总分、阴性症状评分、一般精神病理评分呈正相关（P＜0.05），miR-137表达水平与PANSS总分、阴性症状评分、一般精神病理评分呈负相关（P＜0.05）。

表6 治疗后首发精神分裂症组患者血清乙酰胆碱酯酶、miR-137表达水平与PANSS评分相关性

2.6 治疗前后首发精神分裂症组患者血清乙酰胆碱酯酶与miR-137表达水平相关性 治疗前后首发精神分裂症组患者血清乙酰胆碱酯酶与miR-137表达水平均呈负相关（治疗前r=-0.490，P＜0.001；治疗后r=-0.530，P＜0.001），见图1、图2。

图1 治疗前患者血清乙酰胆碱酯酶与miR-137表达水平相关性

图2 治疗后患者血清乙酰胆碱酯酶与miR-137表达水平相关性

3 讨论

首发精神分裂症临床表现为幻听、幻视、妄想、情感淡漠及情感反应不协调、意志减退、缺乏应有的积极性和主动性、存在认知功能缺陷等。目前研究认为，精神分裂症发病可能受多巴胺系统活性增强、神经发育相关因子水平等因素影响[8]。

乙酰胆碱酯酶是生物体内神经传导通路中的关键酶，可通过降解乙酰胆碱抑制神经递质对突触后膜的刺激作用，促进神经元受损发生[9]。黄邦锋[10]等人的研究发现，精神分裂症患者血清胆碱酯酶水平较健康体检者高，经治疗后血清胆碱酯酶水平明显降低。郭明冬[11]等人的研究显示，血管性痴呆患者经治疗后血清乙酰胆碱酯酶水平明显降低。本研究结果显示，首发精神分裂症组患者血清乙酰胆碱酯酶明显高于健康对照组，与郭明冬等人的研究结论类似，提示乙酰胆碱酯酶水平升高可能与精神分裂症发生有关。本研究结果显示，相对于临床治愈，治疗4周后显著进步、进步及无效患者乙酰胆碱酯酶依次升高，提示血清乙酰胆碱酯酶水平降低可能与精神分裂症患者症状改善有关。本研究还发现，治疗4周后，首发精神分裂症组患者血清乙酰胆碱酯酶与PANSS总分、阴性症状评分、一般精神病理评分呈正相关，提示血清乙酰胆碱酯酶水平可能反映精神分裂症患者总体患病水平，尤其是阴性症状及一般精神病理症状严重程度，检测其水平可能对疗效的改善有积极作用。

微小RNA（microRNA，miRNA）是一种在真核生物中广泛存在的短链内源非编码RNA，可参与蛋白质编码基因调控。研究[12]表明，miRNA可参与神经元细胞周期调控、大脑功能形成、突触形成及神经递质释放等生物学过程。相关研究[13]报道，血浆miR-137水平与精神分裂症患者的疗效有关。有研究发现，miR-137基因多态性可能通过改变大脑皮质结构，影响精神分裂症发生发展。研究显示外周血中miR-137表达可作为判断精神分裂症的生物标志物。此外，廖东升[14]等人的研究报道，双相障碍抑郁发作组与躁狂发作组患者血浆miR-137表达水平明显低于健康对照组。本研究结果显示，与健康对照组相比，首发精神分裂症组患者血清miR-137表达水平明显降低，提示血清miR-137水平降低可能预示精神分裂症发生发展。有研究报道，miR-137多态性与精神分裂症患者的临床特征密切相关。本研究结果显示，相对于临床治愈，治疗4周后显著进步、进步及无效患者miR-137表达水平依次降低，提示治疗4周后血清miR-137水平升高可能与患者病情好转存在一定关联。进一步研究发现，治疗4周后，首发精神分裂症组患者血清miR-137表达水平与PANSS总分、阴性症状评分、一般精神病理评分呈负相关，提示治疗后miR-137水平升高可用于评估精神分裂症患者阴性症状、一般精神病理症状改善情况，检测miR-137水平可能对治疗方案的制定及提高精神分裂症的治疗效果有帮助。

有研究表明，炎症因子水平与精神分裂症进展密切相关，未经临床治疗的首发精神分裂症患者CRP、IL-6等炎症因子明显上升。临床显示，术后谵妄患者多伴有乙酰胆碱酯酶水平降低，同时存在炎症指标升高，进而促进炎症反应，并影响疾病严重程度。本研究结果显示，治疗前后首发精神分裂症组患者血清乙酰胆碱酯酶与miR-137表达水平均呈负相关，提示乙酰胆碱酯酶与miR-137可能相互作用，影响精神分裂症的发生发展，并反映精神分裂症治疗效果，但具体的调控作用需在今后补充相关内容深入探讨。此外，起病年龄、受教育年限及治疗时间长短等因素均对患者疗效具有一定影响，但由于本研究样本基数小，可能对结果造成一定偏倚，仍需进一步扩样本对疗效影响因素深入分析。

综上所述，治疗4周后，首发精神分裂症组患者血清乙酰胆碱酯酶表达水平明显降低，miR-137表达水平明显升高，二者水平与PANSS总分、阴性症状评分、一般精神病理评分有关，可反映首发精神分裂症患者治疗效果，但其具体机制尚需进一步实验探究。