过敏性疾病患儿食物sIgE和sIgG4检测结果分析

殷国煜,邱媛(杭州市妇产科医院检验科,杭州 310000)

食物过敏(food allergy)是指由免疫机制介导的食物不良反应[1]。据世界过敏组织(World Allergy Organization,WAO)调查显示,发达国家儿童食物过敏患病率高达10%[2]。国内研究数据表明,儿童食物过敏患病率呈逐年增加趋势,是诱导皮肤、消化道及呼吸道等多种症状的重要原因[3],严重影响儿童健康发育及生活质量。

目前,针对食物特异性抗体IgE(sIgG)及特异性抗体IgE4(sIgE4)检测是常用的过敏原检测方法,但sIgG4水平在过敏性疾病患儿中的情况鲜见报道。本研究旨在对皮肤、消化道及呼吸道过敏患儿食物sIgG4、sIgE检测结果进行统计及分析,以期了解过敏性疾病患儿食物过敏原的分布情况及临床特点,并为儿童食物过敏防治提供科学依据。

1 资料与方法

1.1研究对象 回顾性分析2022年11月至2023年11月在杭州市妇产科医院儿童保健科就诊的过敏性疾病患儿641例,其中男375例,女266例,年龄(2.81±2.00)岁。均经临床确诊,符合《诸福棠实用儿科学》(第7版)变态反应性疾病分类诊断的标准[4]。纳入标准:(1)患儿皮肤、消化道或呼吸道出现过敏症状:如皮肤出现皮疹、荨麻疹、湿疹等;呼吸道出现鼻炎、支气管炎、哮喘等;消化道出现便秘、腹泻、消化不良等;(2)患儿未服用对本研究结果有影响的药物。排除标准:(1)合并先天性疾病;(2)伴有全身严重感染疾病;(3)合并严重内科疾病;(4)患儿病史资料不全。将患儿分成婴儿组(0～1岁:176例)、幼儿组(1～3岁:300例)和童年组(3～14岁:165例)。按照临床诊断将患儿分为消化系统(258例)、皮肤系统(133例)、呼吸系统(250例);选取同期在我院体格检查无特殊且无过敏相关症状的儿童100例作为健康人对照组,其中,男56例,女44例,年龄(1.89±1.36)岁。

1.2仪器与试剂 DX-Blot 45Ⅱ全自动免疫印迹仪、DX-Reader生物芯片阅读仪(杭州浙大迪迅生物基因工程有限公司)。过敏原特异性抗体IgE检测试剂盒及食物特异性抗体IgG4检测试剂盒(杭州浙大迪迅生物基因工程有限公司)。

1.3标本采集 使用真空采血管(含分离胶黄头管)采集患儿静脉血3～5 mL(该项目不需空腹),待标本完全凝结后,4 000 r/min离心10 min分离血清,2～8 ℃保存。

1.4食物sIgE检测 本实验采用免疫印迹法检测儿童血清标本中食物特异性IgE抗体,包括9种食物性过敏原(鸡蛋白/牛奶/牛肉/虾/螃蟹/贝/腰果/芒果/菠萝)。所有操作过程严格按照试剂盒说明书进行。IgE判读标准: <0.35 IU/mL为阴性; 0.35～0.70 IU/mL为弱阳性;0.71～3.50 IU/mL为阳性;3.51～17.50 IU/mL为较强阳性;17.51～50.0 IU/mL为强阳性;50.0～100.0 IU/mL为特强阳性;>100.0 IU/mL为极强阳性。

1.5食物sIgG4检测 采用蛋白芯片法检测食物特异性IgG4抗体,包括20种常见食物过敏原(牛肉/猪肉/鸡肉/大麦/小麦/玉米/牛奶/鸡蛋/鳕鱼/螃蟹/虾/腰果/花生/榛子/菠萝/桃/蘑菇/西红柿/马铃薯/大豆)、3种牛奶过敏原组分(α-乳清蛋白/β-乳球蛋白/酪蛋白)和1种鸡蛋白过敏原组分(卵类粘蛋白)。所有操作过程严格按照试剂盒说明书进行。IgG4判读标准:<250 UA/mL为阴性;250～500 UA/mL为轻度;500.1～1 000 UA/mL为中度;>1 000 UA/mL为重度。

1.6统计学分析 采用SPSS 19.0统计软件进行数据处理及统计学分析,计数资料以频数或百分率(%)表示,组间比较采用χ2检验或Fisher检验,sIgG4和sIgE抗体检测一致性采用Kappa检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1患儿组与健康人对照组食物sIgE和sIgG4阳性率比较 患儿组食物sIgE阳性率显著高于健康人对照组,差异有统计学意义(P<0.001);其中,呼吸系统、消化系统、皮肤系统组的食物sIgE阳性率均高于健康人对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。患儿组食物sIgG4阳性率亦显著高于健康人对照组,差异有统计学意义(P<0.001);其中,呼吸系统、消化系统、皮肤系统组的食物sIgG4阳性率均显著高于健康人对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。见表1、表2。

表1 患儿组与健康人对照组食物sIgE阳性率[n(%)]

表2 患儿组与健康人对照组食物sIgG4阳性率[n(%)]

2.2患儿组食物sIgE和sIgG4检测结果分析 患儿组食物sIgE阳性率由高到低位居前6位的依次为牛奶(21.37%)>鸡蛋白(18.25%)>虾(9.36%)>螃蟹(8.74%)>牛肉(7.02%)>腰果(4.37%),其中,sIgE强度集中在1～2级别,以1～2种食物阳性较为常见。见表3及表4。患儿组sIgG4阳性率由高到低位居前6位的依次为鸡蛋白(75.82%)>牛奶(70.51%)>鳕鱼(35.41%)>螃蟹(24.80%)>虾(22.00%)>小麦(21.06%),其中,牛奶、鸡蛋白、鳕鱼、螃蟹、虾、腰果sIgG4强度集中在3级,有73.01%的患儿对2种及以上过敏原过敏。见表3～表5。

表3 过敏原种类分析

表4 食物sIgE强度分级检测结果

表5 食物sIgG4强度分级检测结果

2.3同种食物sIgE和sIgG4检测结果比较 对相同食物过敏原(鸡蛋白、牛奶、虾、螃蟹、牛肉、腰果)sIgE和sIgG4抗体检测结果进行Kappa检验,其κ值均小于0.4,结果一致性较低。见表6。除牛肉外,鸡蛋白、牛奶、虾、螃蟹、腰果sIgG4阳性率显著高于sIgE阳性率,差异具有统计学意义(P<0.05)。见表7。

表6 同种食物sIgE和sIgG4检测一致性比较(n)

表7 同种食物sIgE和sIgG4检测结果阳性率比较[n(%)]

2.4不同性别患儿食物sIgE和sIgG4阳性率比较 本研究中,男性患儿食物sIgE阳性率为37.33%(140/375),低于女性患儿的37.59%(100/266),但差异无统计学意义(P>0.05)。见表7。男性患儿食物sIgG4阳性率为89.60%(336/375),低于女性患儿的91.73%(244/266),但差异无统计学意义(P>0.05)。见表8。进一步单独比较男童、女童间排名前6位的食物sIgE和sIgG4阳性率,结果差异均无统计学意义(P>0.05)。见表8、9。

表8 不同性别患儿食物sIgE阳性率比较[n(%)]

表9 不同性别患儿食物sIgG4阳性率比较[n(%)]

2.5不同年龄患儿食物sIgE和sIgG4阳性率比较 对比不同年龄段患儿食物sIgE结果,婴儿组的阳性率为40.91%(72/176),幼儿组为38.33%(115/300),童年组为32.12%(53/165),婴儿组阳性率最高,但3组间差异无统计学意义(P>0.05)。此外,单独比较不同年龄患儿排名前6位的食物sIgE阳性率,发现鸡蛋白、螃蟹、虾IgE抗体阳性率随患儿年龄增长而降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。见表10。

表10 不同年龄患儿食物sIgE阳性率比较[n(%)]

进一步对比不同年龄患儿食物sIgG4结果发现,婴儿组阳性率为77.84%(137/176),幼儿组为93.00%(279/300),童年组为99.39%(164/165),童年组阳性率最高,且3组间差异具有统计学意义(P<0.001)。此外,单独比较不同年龄患儿排名前6位的食物sIgG4阳性率,发现鸡蛋白、牛奶、鳕鱼、小麦IgG4抗体阳性率随年龄增长而升高,差异具有统计学意义(P<0.001)。见表11。

表11 不同年龄患儿食物sIgG4阳性率比较[n(%)]

2.6不同系统疾病患儿食物sIgE和sIgG4阳性率比较 对比不同系统疾病患儿食物sIgE阳性率结果,消化系统为35.66%(92/258),呼吸系统为35.34%(47/133),皮肤系统为40.40%(101/250),皮肤系统阳性率最高,但各组间总阳性率差异无统计学意义(χ2=1.54,P>0.05)。进一步单独比较不同年龄患儿排名前6位的食物特异性IgE抗体阳性率,发现鸡蛋白、虾、螃蟹、腰果IgE抗体阳性率在皮肤系统组最高,差异具有统计学意义(P<0.05)。见表12。对比不同系统疾病组食物特异性IgG4抗体阳性率结果,消化系统为90.70%(234/258),呼吸系统为94.74%(126/133),皮肤系统为88.00%(220/250),呼吸系统阳性率最高,但各组间总阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。进一步单独比较不同年龄患儿排名前6位的食物特异性IgG4抗体阳性率发现,鸡蛋白、牛奶IgG4抗体阳性率在呼吸系统疾病组最高,虾、小麦IgG4抗体阳性率在皮肤系统疾病组最高,差异具有统计学意义(P<0.05)。见表13。

表12 不同系统疾病患儿食物sIgE阳性率比较[n(%)]

表13 不同系统疾病患儿食物sIgG4阳性率比较[n(%)]

2.7食物sIgG4牛奶、鸡蛋白组分分析 牛奶过敏原组分检测结果显示,β-乳球蛋白致敏率最高,达82.96%,牛奶项目级别越高,各组分阳性率越高。鸡蛋白过敏原组分检测结果显示,卵类黏蛋白阳性率为83.74%,鸡蛋白项目级别越高,卵类黏蛋白阳性率越高,差异具有统计学意义(P<0.001)。见表14。

表14 牛奶、鸡蛋白过敏原组分阳性率分布[n(%)]

3 讨论

传统观念认为的食物过敏通常是指IgE介导的Ⅰ型超敏反应,发作迅速,对单一食物过敏较为多见,患者容易自我发现敏感食物。而实际上,IgG4介导的慢性食物过敏更为常见,但sIgG4由于其独特的分子特征和生物学特性,在过敏性疾病中的临床意义一直存在争议。早期研究认为sIgG4在过敏原特异性免疫疗法(AIT)中具有诱导耐受功能[5]。然而,后来的临床观察显示,sIgG4也可与食物抗原形成免疫复合物[6],参与过敏性疾病的发生[7]。刘云等[8]、张芳芳[9]均发现食物sIgG4与婴幼儿湿疹及胃肠道症状相关。Schuyler等[10]发现牛奶蛋白 sIgG4 抗体与牛奶引起的嗜酸性粒细胞食管炎相关,剔除牛奶饮食后症状显著改善。过敏相关疾病与食物sIgG4抗体的阳性程度存在一定关系,通过检测食物sIgG4,有助于对过敏相关疾病患者进行饮食干预,可改善部分症状和生活质量[11-13]。

本研究的641例患儿中,食物sIgE、sIgG4阳性率均显著高于健康人对照组(P<0.001),提示儿童过敏性疾病的发生与食物过敏密切相关。从患儿食物sIgE结果分析,sIgE阳性率为37.44%,2种以下食物多见,强度较弱,阳性率最高的是牛奶(21.37%)和鸡蛋白(18.25%)。食物sIgE在婴幼儿中的阳性率更高,且随年龄增长有下降趋势,与多项研究结论相似[14-15]。

从患儿食物sIgG4结果分析,食物sIgG4阳性率高达90.48%,多数食物sIgG4强度集中在3级,有73.01%的患儿对2种及以上过敏原过敏,阳性率最高的是鸡蛋白(75.82%)和牛奶(70.51%),与国内相关研究报道基本一致[16-17]。另外,本研究还针对3种牛奶及1种鸡蛋白过敏原组分进行检测,结果显示牛奶过敏原组分中β-乳球蛋白阳性率最高,为82.96%,α-乳清蛋白、酪蛋白的阳性率分别为50.44%和53.32%,3种牛奶组分阳性率均大于50%,属于主要过敏原组分[18]。鸡蛋白过敏原组分卵类黏蛋白阳性率为83.74%,也属于主要过敏原组分[18]。

此外,对不同性别组儿童食物sIgE、sIgG4阳性率分析,女童组阳性率略高于男童组,但差异无统计学意义[9,19]。年龄分段结果显示,婴儿组sIgE阳性率最高,鸡蛋白、螃蟹、虾sIgE阳性率随年龄增长而降低。童年组sIgG4阳性率最高,鸡蛋白、牛奶、鳕鱼、小麦sIgG4抗体阳性率随年龄增长而升高,这可能与各年龄段饮食结构及数量变化有关[20]。笔者还发现,按照系统疾病分组结果显示,鸡蛋白、虾、螃蟹、腰果sIgE阳性率在皮肤系统组最高;鸡蛋白、牛奶sIgG4阳性率在呼吸系统疾病组最高,虾、小麦sIgG阳性率在皮肤系统疾病组最高,但具体机制有待进一步研究。

此外,本研究针对同种食物sIgE、sIgG4结果进行比较,结果显示食物sIgG4阳性率显著高于sIgE,Kappa分析表明两种抗体检测结果一致性较差,提示食物sIgG4检测可以作为食物sIgE检测的补充,为具有典型过敏症状而sIgE检测为阴性的患儿提供诊断依据,避免漏诊、误诊。

综上所述,笔者通过研究发现sIgG4介导的食物过敏现象在过敏性疾病患儿中较多发生,且临床表现多样,因此,食物sIgE和sIgG4联合检测对防治过敏具有重要的指导意义,为临床诊疗提供了新思路。然而,本研究尚存在一定不足,例如由于我院开展食物过敏原项目时间较短,暂未进行患儿脱敏治疗前后数据比对,有待后续进一步深入研究。