治疗麦穗鱼扁弯口吸虫病药物对比试验

姜汉军，贾秀秀，田海军，2*

（1.信阳农林学院水产学院，河南 信阳 464007；2.信阳市水生动物病害工程技术研究中心，河南 信阳 464007）

麦穗鱼（Pseudorasbora parva），属鲤形目，鲤科，亚科，为杂食性的鲤科小型鱼类，多分布于淡水中，鱼背部呈灰黑色，腹部白色，体侧鳞有一黑色纵带似麦穗状，因此称为麦穗鱼[1-2]。随着人们消费的多样化及对水产品需求量的增加，麦穗鱼逐渐进入水产养殖的行业。文献[3]研究表明，麦穗鱼对环境的适应能力强，尤其适宜在底质肥沃、底栖生物丰富的水体中生活，在冰封的水体及水温38 ℃时，也能正常生活。

扁弯口吸虫（Clinostomum complanatum），属扁弯动物门，吸虫纲，复殖吸虫目，弯口科，弯口属[4]。可感染草鱼、鲢、鳙、鲤、鲫、麦穗鱼、青鳉和斗鱼等大部分淡水鱼类，一旦感染，会造成较大的损失，甚至全军覆灭。近年来，扁弯口吸虫病在全国各地均有发现，流行季节为5—8月。

目前，对麦穗鱼患扁弯口吸虫病的研究主要集中在形态学、生物学等方面，有关麦穗鱼扁弯口吸虫病药物防治方面的研究报道较少，其主要集中在敌百虫等化学药物方面[4-10]。周工健等[9]先采用硫酸铜泼洒杀灭中间宿主螺类，后用90%晶体敌百虫全池泼洒，对杀灭扁弯口吸虫包囊内的囊蚴有明显效果，通过反复对比试验，最后采用0.3 mg/L 浓度的敌百虫溶液全池泼洒，连泼2 次（中间间隔24 h），发病特别严重的连泼3 次，可有效控制扁弯口吸虫病。杨慧英等[10]开展扁弯口吸虫对淡水鱼种的危害及防治试验，结果表明，轻微感染扁弯口吸虫且可摄食的鱼种，内服阿苯达唑粉，使用90%晶体敌百虫0.3 g/m3全池泼洒1 次，病情严重可隔天连用3 次，能有效控制扁弯口吸虫病。

鱼类寄生虫的防治药物，主要包括化学药物和中草药物2 大类。目前，随着人们对食品安全的重视，追求绿色食品，中草药对鱼类常见寄生虫的治疗，已经成为渔业养殖生产新的研究方向。现选择化学药物甲苯咪唑、氯化铜、90%晶体敌百虫，中草药选用了雷丸和槟榔，检测对比其对麦穗鱼扁弯口吸虫病的杀灭效果，拟为麦穗鱼患扁弯口吸虫病的药物防治提供参考。

1 材料与方法

1.1 时间与地点

2018年10—12月，试验地位于信阳农林学院水产学院病理实验室。

1.2 材料

1.2.1 试验鱼

试验鱼来自信阳农林学院楚韵湖。2018年10月中旬，在学校楚韵湖中发现有大量麦穗鱼患扁弯口吸虫病，麦穗鱼体长3～5 cm。用板罾分批次捕捞约500 尾麦穗鱼，经检测，采捕的麦穗鱼45%个体都有扁弯口吸虫的寄生。

1.2.2 器材

6 个鱼缸（40 cm×30 cm×20 cm）、体视显微镜、双凹玻片、载玻片、盖玻片、加热棒、增氧器、烧杯、电炉、解剖针等。

1.2.3 药物

治疗扁弯口吸虫的药物为中草药和化学药物2 类，中草药为雷丸和槟榔；化学药品为甲苯咪唑、氯化铜和90%晶体敌百虫。

采用煎煮提取的方法，提取雷丸和槟榔的有效成分。分别称取雷丸4 g、槟榔2 g，粉碎后，过孔径0.25 mm 的网筛；加蒸馏水1 L，熬制30 min 过滤；将过滤的药物残渣再熬制2 次，将2 次熬制的药液混合在一起，密封冷却保存备用。该试验中草药浓度均为生药换算的浓度。例如称取槟榔2 g，经过2 次熬制的药液，加入盛有20 L 水的鱼缸里，则槟榔的浓度为100 mg/L。

1.3 试验方法

6 个鱼缸分别盛有原池塘水20 L，ρ（溶解氧）为6.2～7.8 mg/L，水温为（26±0.5）℃。选取体长3～5 cm患有扁弯口吸虫的麦穗鱼，随机分为6 个试验缸，其中1 组为空白对照缸，进行3 次重复试验，在相同环境下的鱼缸内，分别投放被扁弯口吸虫病感染的麦穗鱼20 尾，让其适应72 h 后，参照中草药提取浓度的标准浓度及杀寄生虫药的标准给药剂量，在其中5 口鱼缸分别加入5 种药物，对照缸不加药，进行给药试验，中草药和化学药物标准用药量见表1。用2 倍量（药物标准计量的2 倍）和5 倍量（药物标准计量的5 倍）分别给药；分别在12，24，48，72 h，镜检患病鱼体表和鳃上的扁弯口吸虫孢囊，记录各组药物的杀虫率及死亡率。杀虫率（%）=（对照组的扁弯口吸虫孢囊数量－试验组扁弯口吸虫孢囊数量）/对照组的扁弯口吸虫孢囊数量×100%；死亡率（%）=（投放的鱼数量－镜检时鱼存活数量）/投放鱼数量×100%。

表1 中草药和化学药物标准用药量①

在干净无划痕的双凹玻片上，分别悬滴0.25 mL槟榔煎煮提取液（200 mg/L）及0. 25 mL 雷丸煎煮提取液（400 mg/L），随机取病鱼10 尾，用2 枚小解剖针，挑开病鱼肌肉、尾柄等处形成淡黄色的小包囊，用吸管将虫体吸至凹玻片上，将扁弯口吸虫置于双凹玻片上，在体视显微镜下观察虫体变化情况。记录试验开始时间，并随时观察扁弯口吸虫体的反应。

2 结果与分析

2.1 中草药及化学药物对麦穗鱼扁弯口吸虫病治疗效果

雷丸、槟榔2 种中草药对扁弯口吸虫病的治疗效果见表2。由表2 可见，槟榔在48 h 时杀虫率最高，为60%；超过48 h 后补充药物，麦穗鱼扁弯口吸虫的数量保持不变，杀虫率下降；雷丸对麦穗鱼扁弯口吸虫病没有杀灭效果；氯化铜、甲苯咪唑、敌百虫对扁弯口吸虫在6 h 具有较明显的杀灭效果，其中甲苯咪唑杀虫率达到80%，敌百虫杀虫率达到78%，氯化铜的杀虫率在70%。

表2 中药及化学药物对扁弯口吸虫病的治疗%

2.2 不同药物浓度对扁弯口吸虫病的治疗效果

不同浓度的药物对扁弯口吸虫的杀灭率及试验鱼情况见表3。由表3 可见，在使用2 倍剂量（标准药物使用剂量的二倍）、5 倍剂量（标准药物使用剂量的5 倍）条件下，中草药杀虫没有化学药物杀虫率高。在2 倍剂量下，槟榔的杀虫浓度为200 mg/L，药物作用时间在48 h 时，杀虫效果最好，杀虫率为60%；雷丸在治疗麦穗鱼扁弯口吸虫病中无效果；且两者在5 倍剂量时，槟榔会导致麦穗鱼出现中毒现象。中草药在杀虫浓度标准剂量时，给药均未出现中毒及死亡现象。化学药物在标准剂量下，甲苯咪唑的杀虫浓度为0.2 mg/L，杀虫率为80%；90%晶体敌百虫在杀虫浓度0.3 mg/L时，杀虫率为78%；氯化铜的杀虫浓度为0.2 mg/L，杀虫率为75%。化学药物在2 倍、5 倍剂量下用药均会出现中毒现象；表明甲苯咪唑对麦穗鱼扁弯口吸虫病的治疗效果最佳；中草药作用时间较长，杀虫率不高。

表3 不同浓度的药物对扁弯口吸虫的杀灭率及试验鱼情况

2.3 槟榔和雷丸对离体扁弯口吸虫的杀虫活性

于体视显微镜下观察扁弯口吸虫体的变化。浓度为400 mg/L 的雷丸药液，对扁弯口吸虫的杀虫作用较弱，30 min 后，未发现死亡虫体，活力不减弱。在浓度为200 mg/L 的槟榔药液中的虫体，刚开始，作蛭状剧烈伸缩运动；5 min 后扁弯口吸虫挤成一团；20 min 后，虫体停止摆动，显微结构开始模糊；30 min 后，虫体结构完全被破坏，胞质流出，凝固。

3 讨论

目前，治疗扁弯口吸虫病的药物，主要有敌百虫和阿苯哒唑。但长时间使用这些化学药物，不仅会使扁弯口吸虫产生耐药性，而且会杀灭水体中大量的有益菌，从而影响生态平衡。与化学药物相比，中草药属于天然环保药物，使用后不仅对鱼病的治疗有显著效果，而且不易产生抗药性，残留低。扁弯口吸虫病杀虫率的确定，是根据扁弯口吸虫孢囊脱落数量计算。本试验中，因为发现对照组麦穗鱼扁弯口吸虫孢囊在试验周期内，没有出现自然脱落的现象，所以可以确定，试验组出现扁弯口吸虫孢囊的脱落，是由于药物杀虫引起。

本试验中，除化学药物外，中草药采用了煮沸提取法，方便、简单易行，槟榔对扁弯口吸虫的杀虫率接近于化学药物的杀虫率。槟榔的主要化学成分为生物碱，含量为0.3%～0.7%，其中主要为槟榔碱（0.1%～0.5%）和槟榔次碱（0.31%～0.66%），还含有鞣质，主要起杀虫、抑虫作用的是生物碱中的槟榔碱，作用于虫体的神经系统[11-12]。甲苯咪唑、氯化铜、敌百虫等高频率的使用，导致寄生虫产生抗药性，降低药效，同时对水质的破坏不可逆，化学药物在鱼体内残留期长，对鱼类的毒副作用大，会直接影响水产品的品质。

试验结果显示，槟榔相对于甲苯咪唑、氯化铜等化学药物，具有高效、低残留的优势。中草药超声波提取物的杀灭效果，优于常温浸泡提取物和煮沸提取物[13]。如果能采用超声波提取、萃取等更为科学的提取方法，槟榔的杀虫效果会更好。因此对于中草药有效成分的提取及剂型方面，将是中草药治疗扁弯口吸虫病的研究重点。