血清CYR61、NCAM-1在急性脑梗死表达水平及对预后的预测价值

张士杰 王秋菊 盛文达

河南省郑州市第九人民医院神经内科 450053

急性脑梗死是由于脑血管闭塞导致局部脑血灌注中断所致,已成为当今严重威胁人类健康的疾病之一,给家庭和社会造成沉重负担。因此,早期准确评估急性脑梗死病情及预后,对于指导临床治疗和合理配置药物具有重要意义。富含半胱氨酸蛋白61(CYR61)也被称为CCN1,是CCN蛋白家族的成员。大量数据表明CYR61参与血管生成、胚胎发育和组织修复过程[1]。神经细胞黏附分子-1(NCAM-1)是一种细胞黏附分子,它在胶质细胞和神经元中表达,与细胞因子和离子通道在神经元生长和细胞相互作用中发挥作用[2]。但目前关于CYR61、NCAM-1在急性脑梗死疾病中表达尚不明确。基于此,本文通过检测CYR61及NCAM-1在血清中水平,初步探讨二者与疾病严重程度和预后的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2021年1月—2022年6月本院收治的156例急性脑梗死患者为观察对象,其中男96例,女60例,年龄(62.35±4.12)岁,收缩压(127.55±8.51)mmHg(1mmHg=0.133kPa),舒张压(76.46±4.53)mmHg。根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将患者分为轻度组(≤15分,49例)、中度组(16～30分,62例)和重度组(≥31分,45例)。同期选取于本院进行健康体检120例志愿者作为对照组,经头颅磁共振成像证实没有急性脑梗死,其中男63例,女57例,年龄(61.64±3.35)岁,收缩压(125.62±8.69)mmHg,舒张压(75.62±4.69)mmHg。两组一般资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。纳入标准:(1)急性脑梗死患者诊断参考《中国急性缺血性脑卒中诊疗指南2018》[3],并通过头颅计算机X线断层扫描或磁共振成像检查佐证;(2)年龄18～80岁;(3)所有入选患者均为首次卒中,既往无严重神经功能障碍史;(4)脑梗死发病时间≤72 h;(5)患者及其家属签署知情同意书。排除标准:(1)意识受损,生命体征不稳定;(2)严重痴呆,精神失常不能配合;(3)孕妇;(4)在急诊室接受静脉溶栓治疗的患者;(5)患者年龄<18岁。本研究经过医院道德伦理委员会批准通过。

1.2 标本采集及指标监测 健康人群于体检当日,患者在禁食1晚后,于6:00—7:00之间采集血液样本,并将其放入5ml Eppendorf(EP)试管中。2 500g/min离心12min。分离血清并以1～2ml等份保存于-80℃。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清CYR61、NCAM-1水平。

1.3 随访 记录急性脑梗死患者自入院起2个月内的预后情况,出院患者采用电话或者门诊方式进行随访,根据改良Rankin量表(mRS)将患者分为预后不良组(分值≥3分,75例)和预后良好组(分值<3分,81例),量表总分值0～6分。

2 结果

2.1 两组血清CYR61、NCAM-1水平比较 研究组血清CYR61水平较对照组升高[(10.39±2.24)μg/L VS (4.56±1.05)μg/L,t=26.362,P<0.05],NCAM-1水平较对照组降低[(169.36±36.31)ng/ml VS (212.55±48.58)ng/ml,t=8.453,P<0.05)]。

2.2 研究组不同病情程度患者血清CYR61、NCAM-1水平比较 三组患者血清CYR61水平显示:重度组>中度组>轻度组(P<0.05),而血清NCAM-1水平显示:重度组<中度组<轻度组(P<0.05)。见表1。

表1 不同病情程度患者血清CYR61、NCAM-1水平比较

2.3 血清CYR61、NCAM-1表达与疾病严重程度的相关性分析 Spearman法分析结果显示,急性脑梗死患者血清中CYR61水平与疾病严重程度呈显著正相关(r=0.825,P<0.05),NCAM-1水平与病情严重程度呈显著负相关(r=-0.584,P<0.05)。见图1。

图1 血清表达与病情严重程度相关性分析

2.4 不同预后患者血清中CYR61、NCAM-1水平比较 预后不良组患者血清中NCAM-1水平较预后良好组患者降低[(7.05±1.95)μg/L VS (14.01±2.56)μg/L,t=13.065,P<0.05],而CYR61水平较高[(197.76±41.75)ng/ml VS(138.69±30.44)ng/ml,t=10.030,P<0.05]。

2.5 血清中CYR61、NCAM-1水平对预后不良的预测价值 血清CYR61、NCAM-1水平预测预后不良的AUC分别为0.910(95%CI:0.853～0.950)、0.892(95%CI:0.832～0.936),最佳截断值分别为10.42μg/L,153.68ng/ml,对应的敏感度分别为86.67%、76.00%,特异度分别为88.89%、88.89%,联合预测的AUC为0.955(95%CI:0.910～0.982),敏感度为89.33%,特异度为87.65%。见图2。与单独指标比较,CYR61联合NCAM-1预测预后不良AUC升高。

图2 血清CYR61、NCAM-1水平预测预后不良的ROC曲线

3 讨论

目前主要依靠临床表现、影像学诊断急性脑梗死,但部分患者患病24h后无明显影像学改变,且偏头痛、癫痫发作等疾病症状与脑卒中相似,影响病情诊断。如果可早期检测患者血液中特定生物标记物可能有助于在紧急情况下进行诊断,特别是对于缺乏CT或MRI扫描仪小型医疗机构。

NCAM-1也被称为CD56,具有参与细胞间信息传导、维持内皮细胞屏障的功能。曾伟雄等人[4]研究表明冠心病患者血清NCAM-1水平与冠状动脉的病变严重程度密切相关,一定程度上反映心肌损伤的严重程度。本文中NCAM-1在急性脑梗死患者血清中表达降低,随着病情严重程度及预后的加重逐渐降低,可见其与病情严重程度及预后呈负相关,可能作为反映急性脑梗死病情进展的潜在血清指标之一,其作用机制可能为在血管病理情况下,如动脉粥样硬化,ICAM-1等黏附分子被内皮细胞诱导表达,破坏了内皮屏障的稳定性以及功能障碍,并促使内皮功能失调,进一步促进动脉粥样硬化的形成。结果还显示,预后不良的患者血清NCAM-1水平较存活患者降低,表明NCAM-1水平降低与急性脑梗死不良预后相关,可作为短期预后预测的早期指标,以便医师在临床中动态检测指标变化,及时予以有效治疗措施,改善患者预后。

CYR61是一种细胞外基质蛋白,在组织修复、发育、细胞黏附、迁移及增殖等多种生理功能中发挥作用。研究表明,CYR61过表达与乳腺癌、胃癌及口腔癌等癌细胞侵袭有关[5]。此外,CYR61通过参与炎症微环境的调控,介导炎症疾病、自身免疫性疾病的发展过程,被认为是一种新的促炎因子[6]。正常情况下,CYR61低表达可维持机体生理需求,然而炎症因子、生长因子和机械张力刺激等因素可导致CYR61合成增加。高表达CYR61分泌到细胞外基质后,与细胞膜上多种整合素受体结合,发挥多种生物学功能[7]。本研究中,与健康志愿者相比,患者血清CYR61水平上调,随着病情加重及预后不良发生逐渐升高,提示CYR61与急性脑梗死病情及预后均关系密切,其作用机制可能为CYR61通过促进单核细胞、巨噬细胞等对血管内皮细胞的黏附作用,增强血管平滑肌细胞的迁移及增殖能力及各种促炎因子的分泌,从而参与疾病发展进程。此外,急性脑梗死患者血清中CYR61、NCAM-1表达与疾病严重程度均具有相关性,进一步表明两者与疾病的发生发展进程关系密切。且血清CYR61、NCAM-1联合使用AUC为0.955,显著高于单项检测,还可提高预测敏感性。因此,两者联合可预示患者预后不良,具有足够特异性。

综上所述,在急性脑梗死患者血清中CYR61水平升高,NCAM-1水平降低,二者联合检测可能作为预测急性脑梗死功能结局的潜在生物标志物。但本研究纳入病例数较少,且来自同一中心,后续将完善实验,并更深一步分析两者在急性脑梗死疾病中的具体作用机制。