长沙县地区门诊儿童常见上呼吸道感染病原体共感染特征

彭杜平,洪迎瑞,喻娟娟,范英杰,李兴军,王 群,周凡琦,杨牡丹,李 敏

1.长沙县妇幼保健院儿科,湖南长沙 410100;2.长沙县妇幼保健院检验科,湖南长沙 410100;3.感染性疾病与肿瘤基因诊断技术国家地方联合工程研究中心,湖南长沙 410000

世界卫生组织(WHO)2019年全球十大死亡病因数据及国家卫生健康委员会发布的《2021中国卫生健康统计年鉴》报告显示,全球呼吸道感染疾病形势日趋严重,尤其儿童等免疫力低下者更易受呼吸道感染疾病影响。《中国医疗机构儿童疾病构成的系统评价》研究报道表明,无论门诊就诊儿童还是住院儿童,呼吸道感染疾病均严重威胁其健康,对家庭及社会造成了严重的医疗负担[1]。目前,儿童呼吸道感染疾病高发且临床表现复杂,呼吸道感染病原体种类多,上呼吸道感染病原体主要为病毒,单个病原体感染或多个病原体混合感染可能出现相同或不同的症状,即使感染同种呼吸道病原体时,由于个体差异也会出现不同的症状。临床受限于有限的病原学检测手段,常无法快速、准确地鉴别致病病原体,导致不少门急诊医生可能依据临床经验进行诊断与治疗,易造成抗菌药物滥用和细菌耐药性增加。呼吸道病原体的感染及传播受诸多因素影响[2-4],地区、文化背景、经济水平、医疗保障水平、气候条件及研究人群都可能是其影响因素,了解本地区的儿童呼吸道感染病原体特征对本地区流行病防控具有重要意义。因此,本研究采用高灵敏度、特异度的多重聚合酶链反应(PCR)技术对2022年1—6月长沙县妇幼保健院收治的17 456例门急诊患儿进行检测,全面、深入了解长沙县的儿童上呼吸道感染流行的病原体及其感染特征等,以期为本地区上呼吸道感染患儿早期诊断、治疗及合理用药提供可靠依据,同时为流行病学研究提供参考依据,现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 回顾性分析湖南省长沙市长沙县妇幼保健院门急诊于2022年1—6月收治的17 456 例上呼吸道感染患儿(临床初诊有发热或呼吸道症状,如咳嗽、咳痰、呼吸困难,既往无哮喘、支气管扩张等基础疾病,年龄<14岁)的临床资料,其中男9 636 例,女7 820例。根据儿科年龄分组标准,进行年龄分组:<1岁1 524例,1～<4岁5 959例,4～<7岁5 739例,7～<14岁4 234例。所有患儿按照院内检验标准,均采样过咽拭子标本。

1.2仪器与试剂 所有咽拭子标本采用湖南圣湘生物科技股份有限公司的6项呼吸道病原体核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法,国械注准:20213400256)检测,按照产品说明书进行操作,检测6种上呼吸道感染常见病原体,包括:甲型流感病毒(Flu.A)、乙型流感病毒(Flu.B)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、鼻病毒(HRV)、肺炎支原体(MP)。采用仪器为Natch CS2全自动核酸提取仪(圣湘生物科技股份有限公司,中国)和实时荧光定量PCR仪(Applied Biosystems,美国)。

1.3检测方法 分别取200 μL待测标本、试剂盒配套的阴性对照和阳性对照加入1.5 mL离心管中,按试剂盒及仪器说明书操作提取核酸。在两管多重PCR反应液中分别加入5 μL核酸,进行PCR扩增和检测。

1.4观察指标 分析2022年1—6月6种呼吸道感染病原体检出情况;分析6种呼吸道感染常见病原体混合感染情况;分析不同性别患儿6种呼吸道感染病原体检出情况;比较不同年龄段患儿6种呼吸道感染病原体检出率及混合感染率; 由于本院2022年4—6月重症肺炎患儿比例明显增加,对临床诊断、治疗要求进一步提高,因此本研究收集了MP感染患儿的治疗信息,以及白细胞计数、血红蛋白、中性粒细胞百分比、淋巴细胞百分比等实验室检测指标结果,针对性分析MP混合及单一感染患儿的治疗时间和实验室检测指标特征。

1.4统计学处理 采用R软件(version 4.1.0)进行数据处理及统计分析。不符合正态分布的计量资料以M(P25,P75)表示;两组间比较采用Mann-WhitneyU检验,多组间比较采用Krusral-WanisH检验。计数资料以例数或百分率表示,组间比较采用χ2检验或Fisher确切概率法。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.12022年1—6月呼吸道感染病原体检出情况 17 456例呼吸道感染患儿中,共检出9 239 例患儿存在病原体感染,总检出率为52.93%,包括8 538例单一病原体感染(48.91%),以及701例混合感染(4.02%);检出率最高的病原体为Flu.B,其他依次为HRV、Flu.A、RSV、ADV、MP,见表1。

表1 呼吸道常见病原体检出率

2.2呼吸道感染常见病原体混合感染情况 在701例混合感染病例中,检出690例2种病原体混合感染、11例3种病原体混合感染,分别占总样本的3.95%、0.06%,具体共感染病原体分布见表2,主要是Flu.B混合感染(占混合感染的45.22%),其次为ADV混合感染、Flu.A混合感染,此外MP及ADV更易与其他病原体发生共感染,MP混合ADV、Flu.A、Flu.B或HRV感染共61例,占MP总感染的24.11%(61/253),ADV混合感染272例,占ADV总感染的29.99%(272/907)。见表2。

表2 呼吸道感染常见病原体混合感染情况

2.3不同性别患儿呼吸道感染病原体检出情况 9 636例男童中,5 104例检出病原体(52.96%),其中混合感染393例(4.08%),7 820例女童中,4 135例检出病原体(52.89%),其中混合感染308例(混合感染率为3.94%),女童与男童的呼吸道感染病原体检出率及混合感染率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。但男童中MP与Flu.B混合感染率(0.052%)及MP与ADV混合感染率(0.026%)分别高于女童中MP与Flu.B混合感染率(0.052%)及MP与ADV混合感染率(0.013%),差异有统计学意义(P<0.05),其他常见病原体的检出率在女童与男童间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 不同性别患儿呼吸道病原体检出情况[n(%)]

2.4不同年龄段患儿呼吸道感染病原体检出率及混合感染率比较 随着年龄增长,Flu.B及MP检出率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05),而4～<7岁患儿Flu.A检出率明显高于其他年龄段患儿,差异有统计学意义(P<0.05),<1岁患儿RSV检出率明显高于其他年龄段患儿,差异有统计学意义(P<0.05),1～<4岁患儿ADV检出率高于其他年龄段患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,不同年龄段患儿的混合感染率比较,差异均有统计学意义(P<0.05),1～<7岁患儿相对较高,占4.2%～4.4%,<1岁和7～<14岁患儿中MP与ADV混合感染率相对高于其他年龄段患儿,>1岁患儿中Flu.A、Flu.B或RSV与ADV混合感染率相对高于<1岁患儿;HRV与ADV共感染主要在1～<7岁患儿,HRV与RSV共感染最易发生于<1岁患儿,HRV与Flu.B共感染最易发生于7～<14岁患儿。见表4。

表4 不同年龄段患儿呼吸道感染病原体检出率及混合感染率比较[n(%)]

2.5MP混合及单一感染情况比较 MP感染的患儿中,混合感染患儿白细胞计数异常、中性粒细胞百分比异常、淋巴细胞百分比异常的比例相对更高,MP单一感染患儿的血红蛋白异常比例相对更高,差异均有统计学意义(P<0.05);而MP混合及单一感染治疗时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。见表5。

表5 MP混合及单一感染情况比较[M(P25,P75)或n(%)]

3 讨 论

呼吸道感染疾病是儿童最常见疾病之一,与病原体的流行、年龄、地区、季节等差异相关,研究证实引起呼吸道感染的病原体种类繁多,既有单个病原体感染,也有多个病原体混合感染,导致呼吸道感染的病情复杂、临床症状多样。因此,快速、准确地检测出呼吸道感染的病原体具有十分重要的意义,通过早诊断、早干预,采用精准化方案治疗,可有效降低呼吸道感染发病率和病死率,并且快速确定病原体有助于及时控制病原体流行暴发,也能为流行病学监测和疫情防控提供强有力的支持[5-6]。

本研究采用《儿童呼吸道感染病原体核酸检测专家共识》[7]推荐的核酸检测方法,采用灵敏度、特异度、准确度均较高的呼吸道病原体多重PCR检测方法,首次针对长沙县的儿童呼吸道感染流行性病原谱特征进行全面分析。长沙县妇幼保健院2022年1—6月的17 456例上呼吸道感染患儿检测数据显示:总检出率为52.9%,混合感染率为4.0%,主要病原体依次为Flu.B、HRV、Flu.A、RSV、ADV和MP,以上病原体检出率分别为24.00%、11.41%、8.41%、6.54%、5.20%、1.45%,其中男童与女童的病原体检出率及混合感染率比较,差异均无统计学意义(P>0.05),与相关文献报道一致[8]。

区别于既往文献报道呼吸道感染集中于幼儿期或学龄前儿童[9-10],本研究中7～<14岁患儿呼吸道感染病原体检出率最高,并且随年龄增长,Flu.B及MP检出率明显升高。这可能与本地区学龄期儿童入学后的集体生活和社交活动相关,提示应加强对本地区学龄期儿童的呼吸道感染疾病防控,减少感染或交叉感染风险。

在本研究中,混合感染率为4.0%,低于国内其他地区的研究报道[11-13],主要为两种病原体混合感染,尤其是Flu.B的混合感染;另外不同年龄段患儿的混合感染率有明显差异,在1～<7岁患儿中相对较高(占4.2%～4.4%),7～<14岁患儿的混合感染率则明显降低(约3.5%),可能是因为学龄期儿童与外界接触增多,自身免疫力逐渐增强,对各类病原体免疫力有所增加。

需要注意的是,尽管本研究MP感染患儿较少,但发生混合感染的比例却不低,与中国疾病预防控制中心发表的2009-2019年全国范围全年龄段急性呼吸道感染患者前瞻性流行病监测数据相符[14],MP混合感染约占MP总感染的24.11%,MP混合感染患儿白细胞计数异常、中性粒细胞百分比异常、淋巴细胞百分比异常的比例相对MP单一感染患儿更高,提示有必要及时、准确鉴别诊断呼吸道感染病原体,关注本地区混合感染的潜在影响。遗憾的是,本研究仅纳入分析长沙县妇幼保健院2022年1—6月检测数据,观察时间较短,数据分析结果可能存在偏倚,未能完整反映新型冠状病毒感染疫情期间长沙县地区儿童上呼吸道感染及共感染变化特征。

随着分子诊断技术,尤其多重PCR技术及一体化检测技术的进步,通过高灵敏度、高特异度地一次性检测呼吸道感染常见病原体,有助于及时诊断或排除多种病原体感染[15-16],不遗漏多种病原体混合感染,明显提高了呼吸道感染疾病的诊断效率,切实在患者初次就诊时即开展精准检测,实现精准治疗。