益生菌发酵板芪复合物对断奶仔猪生长性能的影响

王 晶，苗 颖，蔡永超，李 琰，闫 微，常伟辰，张红英，杨明凡*

（1.河南农业大学动物医学院，河南郑州 450046；2.河南财经政法大学数学与信息科技学院，河南郑州 450046；3.河南省卫生监督所，河南郑州 450008）

近年来，抗生素在临床上的滥用导致耐药性菌株的增加，造成临床一些动物疾病的治疗更加困难（黄雨婷等，2022）。为此，中华人民共和国农业农村部公告第194号文件规定：自2020年7月1日起，饲料生产企业停止生产含有促生长类药物饲料添加剂（中药类除外）的商品饲料。因此，研发绿色、无耐药、效果好的预防保健药物已迫在眉睫（齐静等，2022）。中药是我国五千年留下的瑰宝，具有绿色、无耐药性等优势，在预防和治疗疾病上发挥了很大作用（陈天毅等，2018）。但因中药的适口性差、利用率低、价格高等缺点限制了其在畜牧兽医中的应用。

微生物发酵技术成为一种新的中药炮制方法。利用微生物的产酶作用及其在增殖过程中产生的代谢产物来分解中药或饲草植物细胞壁和大分子物质，促进有效成分的释放，提高了中药的利用率，改善了中药的适口性，降低了中药的使用成本（汪鹏等，2020）。本文旨在探究益生菌发酵板芪复合物对断奶仔猪生长性能的影响，为益生菌发酵板芪复合物在饲料添加剂领域的开发与应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 发酵用的菌种：枯草芽孢杆菌K3菌株和乳酸杆菌HN12菌株均由河南农业大学微生物教研室分离鉴定并保存的菌株；板芪复合物由河南德邻生物制品有限公司提供。

1.2 试验设计 试验将60头体重相近的28日龄断奶的三元仔猪随机分为1个对照组和2个试验组，试验组饲料中分别按照0.5%的比例添加益生菌发酵板芪复合物（试验I组）和添加0.5%未发酵的板芪复合物（试验II组），连续使用14 d，对照组使用基础日粮。按照常规方法进行饲养管理。试验期间详细记录各组仔猪的采食量、体重、健康状况等。

1.3 基础日粮 仔猪的基础日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平（干物质基础）

1.4 益生菌发酵板芪复合物的制备 将板芪复合物粉碎至60目细度，按照1∶1的比例加入蒸馏水，蒸汽彻底灭菌，然后加入培养好的枯草芽孢杆菌和乳酸杆菌至终浓度均为1×108CFU/g，32℃培养48 h，即可制备好益生菌发酵的板芪复合物。

1.4.1 益生菌发酵板芪复合物前后主要成分含量的变化 高效液相检测益生菌发酵板芪复合物前后主要成分变化。根据《中国兽医药典》标准方法进行检测，板蓝根色谱检测的有效成分靛玉红，黄芪色谱检测有效成分黄芪甲苷。

1.5 生长性能测定

1.5.1 日采食量 试验期间每天采用“清料槽法”称取每组试验猪的日采食量，并做好记录。

1.5.2 体重 分别在试验开始后的第5、10、15、20天对仔猪进行称重。

1.5.3 腹泻率的测定 观察各组仔猪的粪便状态，按照以下规则进行计分：固体，0分；糊状，1分；半液体，2分；液体，3分。2分及以上视为腹泻，统计各组仔猪腹泻率。

腹泻率/%＝每日腹泻头次/（仔猪头数×试验天数）×100。

1.6 血液样品的采集与处理 分别在试验开始后的第5、10、15、20天晨饲前对试验猪进行前腔静脉采抗凝血。将血液样品送郑州白苹生物公司进行检测。

1.7 直肠大肠杆菌和乳酸杆菌检测 试验开始后的第5、10、15、20天随机抽取5头仔猪，用棉拭子无菌取直肠内容物，置于灭菌PBS缓冲液中摇匀，并进行倍比稀释。检测大肠杆菌采用麦康凯琼脂培养基，检测乳酸杆菌采用MRS固体培养基，采用平板培养计数法对肠道大肠杆菌和乳酸杆菌进行计数。

1.8 数据统计与分析 试验数据采用Excel 2016进行初步处理，采用SPSS 25.0软件进行统计分析，试验结果以“平均值±标准差”表示，P＜0.05表示组间差异显著。

2 结果

2.1 益生菌发酵板芪复合物前后主要成分含量变化 由图1可知，两株益生菌同时发酵板芪复合物后黄芪甲苷含量极显著上升（P＜0.01）；两株益生菌同时发酵板芪复合物后靛玉红含量极显著上升（P＜0.01）。

图1 益生菌发酵板芪复合物前后主要成分变化

2.2 发酵板芪复合物对仔猪生产性能影响 由表2可知，在仔猪35日龄，试验I组的料重比、平均日采食量和平均日增重均比对照组差异显著（P＜0.05），第三周后差异极显著（P＜0.01）；与对照组相比，试验II组在仔猪42日龄时料重比、平均日采食量和平均日增重均有差异显著（P＜0.05）；仔猪42日龄时，各组料重比、平均日采食量和平均日增重差异显著（P＜0.05），第三周后均表现出差异极显著（P＜0.01）。

表2 发酵板芪复合物对仔猪生产性能影响

2.3 益生菌发酵板芪复合物对仔猪腹泻率影响 由表3可知，各组腹泻率均存在显著差异（P＜0.05）。试验I组和试验II组仔猪在49日龄后均未出现腹泻现象。

表3 益生菌发酵板芪复合物对仔猪腹泻率影响 %

2.4 益生菌发酵板芪复合物对仔猪血液指标的影响 由表4可知，试验组与对照组仔猪的血液生化指标均在正常范围内，且试验I组和试验II组均能显著提高断奶仔猪血液中的血红细胞数目、淋巴细胞数目、血红蛋白含量、淋巴细胞百分比、粒细胞数目等，与对照组相比差异显著（P＜0.05）。

表4 益生菌发酵板芪复合物对仔猪血液指标的影响

2.5 益生菌发酵板芪复合物对仔猪直肠大肠杆菌和乳酸杆菌数量的影响 由表5可知，试验I组和试验II组在49和46日龄时，仔猪直肠大肠杆菌和乳酸杆菌数目与对照组相比差异显著（P＜0.05），试验I组和试验II组与对照组相比差异不显著（P＞0.05）。

表5 益生菌发酵板芪复合物对仔猪直肠大肠杆菌和乳酸杆菌数量的影响 lg CFU/g

3 讨论

3.1 益生菌发酵中药对其有效成分的影响 枯草芽孢杆菌和乳酸杆菌具有较强的分解有机物的能力，板蓝根和黄芪为中草药，其药效成分被植物的细胞壁包裹，进入动物体内后吸收利用率较低。益生菌发酵中药是应用现代微生物发酵技术，充分破坏中药的细胞壁结构，从而提高中药的利用率（汪鹏等，2020）。利用微生物发酵黄芪，发酵后黄芪多糖的含量是传统水提法的5倍以上（吴志勇，2003）。本试验用枯草芽孢杆菌和乳酸杆菌发酵板芪复合物，结果发酵后黄芪甲苷的含量是水提法的2.18倍，发酵后靛玉红的含量是水提法的3.25倍，说明益生菌发酵能显著提高板芪复合物中有效成分的释放。

3.2 发酵板芪复合物对仔猪生产性能影响 黄芪性甘温，归肺、脾经，具有补气升阳，益卫固表，利水消肿等功效。临床上常用于中气下陷引起的久泻不止，肺脾气虚引起的食欲下降、胃呆纳少等症（马艳春等，2022）。板蓝根性苦寒，归心、胃经。具有清热解毒，凉血利咽等功效。临床上常用于治疗肺热喘粗及恶喘，赤白痢疾，湿热疮毒等症（邓九零等，2021）。本试验在仔猪饲料中添加板芪复合物，从使用后的第7天后，发酵组仔猪在料重比、平均日采食量和平均日增重均比对照组和未发酵组仔猪差异显著；未发酵组与对照组相比在仔猪的42日龄时料重比、平均日采食量和平均日增重均比对照组差异显著。由此可见，板芪复合物能提高仔猪的生产性能，尤其经过益生菌发酵后效果尤为显著。

3.3 益生菌发酵板芪复合物对仔猪腹泻率影响仔猪生理特点为体质嫩弱，稚阴稚阳，五脏六腑形而未全，全而未壮，脏腑娇嫩，形气未充（范开，2006）。板芪复合物按照中医理论合理搭配，既能提高仔猪抵抗力，又能抵御外邪入侵（周孟清等，2014）。从本试验的结果可以看出，板芪复合物能显著降低断奶仔猪的腹泻率和死亡率（P＜0.05），尤其是经过益生菌发酵后的板芪复合物效果尤为显著。

3.4 益生菌发酵板芪复合物对仔猪血液指标的影响 仔猪血液生化指标可以反映出动物的健康状况和生产性能（张桂枝等，2012），其中四大重要指标为红细胞、白细胞、血红蛋白和淋巴细胞。红细胞又称红血球，机体呼吸的氧通过红细胞运输到达全身各处，同时红细胞还担负着免疫功能。白细胞是机体主要的免疫细胞，当病原微生物入侵机体时，白细胞能到达病原微生物所在部位将其吞噬消灭。血红蛋白反映机体贫血和免疫状况。淋巴细胞是机体重要的免疫细胞，具有抵抗外界病原微生物感染的功能（王玉磷等，2016）。本试验结果表明，仔猪的血液生化指标在正常范围内，益生菌发酵板芪复合物能提高仔猪血液中红细胞、白细胞、血红蛋白、粒细胞和淋巴细胞的含量，未发酵组在后期也能提高血液生化指标，说明板芪复合物具有增强动物免疫力的功效。

3.5 益生菌发酵板芪复合物对仔猪直肠大肠杆菌和乳酸杆菌数量的影响 大肠杆菌为肠道中的常在菌群，有的大肠杆菌是非致病性的，有的是条件性致病菌。乳酸杆菌是肠道中的优势菌群，对调节机体肠道菌群平衡、增强动物免疫力、抑制和杀灭有害细菌等方面具有重要的作用（梁东梅等，2018）。本试验结果可以看出益生菌发酵板芪复合物能够显著降低直肠中大肠杆菌数量，增加乳酸杆菌数量，从而增强仔猪抵抗力。

4 结论

益生菌发酵板芪复合物能调节断奶仔猪的肠道菌群平衡，促进动物消化吸收，增加动物生产性能，降低仔猪腹泻率，提高动物免疫力和增强其抗病力。从本试验的结果看出，板芪复合物也有上述功效，但经枯草芽孢杆菌和乳酸杆菌发酵后其效果更加显著。有关益生菌发酵板芪复合物的作用机制有待进一步探究。