40%咪鲜胺铜盐·氟环唑悬浮剂分析方法

罗 琳，袁玉兵

(1.安道麦辉丰(江苏)有限公司，江苏 盐城 224100；2.江苏辉丰石化有限公司，江苏 盐城 224100)

1 前言

40%咪鲜胺铜盐·氟环唑悬浮剂(福满美)是由咪鲜胺铜盐和氟环唑复配而成的杀菌剂，兼具保护和治疗作用，能较好地防治小麦赤霉病、褐斑病[1]和水稻稻曲病[2-4]、稻瘟病、纹枯病[5-8]、花生叶斑病[9]等病害。“福满美”内吸渗透性强，药效持续期长，可控制小麦、水稻等农作物的多种病害，同时能大大提高农作物的产量。因此40%咪鲜胺铜盐·氟环唑悬浮剂的含量对小麦的增产和病害防治的重要性与药效不言而喻。目前该产品两种有效成分咪鲜胺与氟环唑含量分析方法[10-12]对40%咪鲜胺铜盐·氟环唑悬浮剂有干扰，本文开发的液相色谱分析方法能同时分离并测定两种组分的含量并经过验证。

2 氟环唑与咪鲜胺含量测定方法

2.1 方法提要 试样用乙腈溶解，以乙腈∶水=60∶40为流动相，使用以Eclipse Plus-C84.6×250 mm，5 μm色谱柱和紫外检测器，波长270 nm，流速1.0 mL/min，对试样中的氟环唑与咪鲜胺进行高效液相色谱分离，外标法定量。

2.2 试剂和溶液 乙腈：色谱纯/分析纯；水∶新制二次蒸馏水。

2.3 标准品

2.3.1 氟环唑标准品 标准品化学名称、化学结构、CAS号如下：

图1 氟环唑的结构

中文名：(2RS，3SR)-1-[3-(2-氯苯基)-2，3-氧桥-2-(4-氟苯基)丙基]-1H-1，2，4-三唑

CAS号：135319-73-2

分子式：C17H13ClFN3O

分子量：329.76(按2011年国际相对原子质量计)

2.3.2 咪鲜胺标准品 标准品化学名称、化学结构、CAS号如下：

图2 咪鲜胺的结构

中文名：N-丙基-N-[2-(2，4，6-三氯苯氧基)乙基]-1H-咪唑-1-甲酰胺

CAS号：67747-09-5

分子式：C15H16Cl13N3O2

分子量：376.7(按2011年国际相对原子质量计)

2.4 仪器 高效液相色谱仪：具有可变波长紫外检测器；色谱数据处理工作站；色谱柱：4.6×250 mm，5μm不锈钢柱，内装Eclipse Plus-C8填充物；微量进样器：50 μL；超声波清洗器。

2.5 高效液相色谱操作条件 流动相：乙腈∶水=60∶40；流速：1.0 mL/min；柱温：30℃；检测波长：270 nm；进样体积：10 μL；运行时间：15 min；保留时间：氟环唑约6.11 min，咪鲜胺约8.38 min。

2.6 测定步骤

2.6.1 标样溶液的配制 准确称取氟环唑标样50 mg(精确至0.000 2 g)、咪鲜胺标样150 mg(精确至0.000 2 g)置于同一50 mL容量瓶中，用乙腈溶解定容到刻度，摇匀。

2.6.2 试样溶液的配制 准确称取含氟环唑约50 mg(咪鲜胺约150 mg)(精确至0.000 1 g)的试样置于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解定容到刻度，超声5 min用0.45 um滤膜过滤。

2.6.3 测定 在上述色谱条件下，待仪器稳定后，先注入数针标样溶液，直至标样的响应值基本稳定后，按下列顺序进样：标样溶液，试样溶液，试样溶液，标样溶液。

2.7 计算 将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样溶液中的氟环唑与咪鲜胺峰面积分别进行平均。试样中氟环唑质量百分含量X1按式(1)计算，咪鲜胺铜盐质量百分含量X2按式(2)计算：

(1)

(2)

式中：

A1—试样溶液中氟环唑峰面积的平均值；

A2—标样溶液中氟环唑峰面积的平均值；

A3—试样溶液中咪鲜胺峰面积的平均值；

A4—标样溶液中咪鲜胺峰面积的平均值；

m1—试样的质量，g；

m2—氟环唑标样的质量，g；

m3—咪鲜胺标样的质量，g；

p—标样中氟环唑、咪鲜胺的含量，%；

1.089—咪鲜胺换算成咪鲜胺铜盐的换算系数。

2.8 允许差 2次平行测定结果之差≤0.5%，取其算术平均值作为测定结果。

3 方法特异性和非分析物的干扰分析

按照配方比例，将除氟环唑原药、咪鲜胺铜盐原药以外的所有助剂混匀，作制剂空白，称500 mg左右制剂空白，按照上述方法进行处理，并检测，氟环唑约6.11 min、咪鲜胺约8.38 min(原药保留时间)处无响应，证明非分析物对氟环唑、咪鲜胺含量的测定无干扰。

将制剂及标样按照2中方法进行处理并检测，方法的拖尾因子、理论塔板数和峰纯度(表1)。标样、试样液相色谱图及光谱图(图3～6)。

表1 方法特异性

图3 标样(SD5)的液相色谱图

图4 标样(SD5)的光谱图

图6 试样(Sample1)的光谱图

4 线性相关

4.1 标准系列溶液的配置 准确称取氟环唑标准品39.6 mg、咪鲜胺标准品121.2 mg于同一50 mL容量瓶中；氟环唑标准品45.4 mg、咪鲜胺标准品136.2 mg于同一50 mL容量瓶中；氟环唑标准品51.0 mg、咪鲜胺标准品151 mg于同一50 mL容量瓶中；氟环唑标准品55.4 mg、咪鲜胺标准品164.0 mg于同一50 mL容量瓶中；氟环唑标准品61.4 mg、咪鲜胺标准品180.8 mg于同一50 mL容量瓶中，用乙腈溶解稀释后，用乙腈定容，摇匀。分别标为SD1至SD5。其中称重重量精确到±0.1 mg，氟环唑标准品含98.7%，咪鲜胺标准品含量98.60%。

4.2 线性关系测定 在上述色谱条件下，待仪器稳定后，进不同浓度的标准溶液，测定其相应的峰面积，以浓度为横坐标、峰面积值为纵坐标进行线性回归，(表2～3、图7～8)。结果表明，氟环唑的浓度在0.781 8～1.212 0 mg/mL之间具有良好的线性范围。线性回归方程为y= 991.65x+4.131 4，相关系数R2=0.999 5。咪鲜胺的浓度在2.390 0～3.565 4 mg/mL之间具有良好的线性范围。线性回归方程为y=581.94x～13.434，相关系数R2=0.999 6。

表2 氟环唑的线性范围测定结果

表3 咪鲜胺的线性范围测定结果

图7 氟环唑的线性范围曲线

图8 咪鲜胺的线性范围曲线

5 准确度

在用2中方法检测的空白样品中加入一定量的氟环唑与咪鲜胺标准品，再按2中方法步骤测定其含量，计算回收率，其结果(表4～5)：

表4 氟环唑测定准确度

表5 咪鲜胺测定准确度

氟环唑的平均回收率为100.26%。回收率在98.98%与101.05%之间，表明本方法用于40%咪鲜胺铜盐·氟环唑悬浮剂中氟环唑的定量分析是可行的。

咪鲜胺的平均回收率为100.80%。回收率在99.79%与101.52%之间，表明本方法用于40%咪鲜胺铜盐·氟环唑悬浮剂中咪鲜胺的定量分析是可行的。

6 精密度

分别称取5个40%咪鲜胺铜盐·氟环唑悬浮剂至50 mL容量瓶，用乙腈稀释定容至刻度，按照2中方法测定氟环唑与咪鲜胺含量(表6～7)。

表6 氟环唑测定方法的精密度

表7 咪鲜胺测定方法的精密度

7 结论

40%咪鲜胺铜盐·氟环唑悬浮剂的有效成分含量分析方法：试样用乙腈溶解，以乙腈∶水=60∶40为流动相，使用以Eclipse Plus-C84.6×250 mm，5 μm色谱柱和紫外检测器，波长270 nm，流速1.0 mL/min，经过方法特异性验证无干扰，线性关系分别为0.999 5和0.999 6，准确度分别为100.26%和100.80%，相对标准偏差分别为0.24%和0.55%，各项验证均符合分析标准，且简单高效易操作，因此该方法可用于产品质量检测，具有很强的可行性和实际应用价值。