直接细菌鉴定与药敏试验法在临床血液检验中的应用分析

高郁平

细菌感染性疾病具有比较高的发病率, 若患者未及时得到针对性治疗对自身病症进行控制, 在长时间作用下细菌感染性疾病可能会继续发展为严重的菌血症或败血症, 这会对患者的身体健康造成严重的危害［1］。结合临床近几年实际接诊情况可以发现, 在多方面因素的影响下, 细菌感染性疾病的临床发生率存在明显增加的趋势, 在各个年龄阶段均存在发生率, 对患者健康以及日常生活所造成的负面影响较大。为促使患者尽快得到恢复, 更需要及时采取科学的用药方案进行治疗。抗生素在临床治疗过程中一直保持较高的使用率, 抗生素具有较好的抗感染效果, 可以杀灭侵入人体内的致病菌, 或者是抑制致病菌繁殖。据相关临床研究资料表示, 若使用抗生素后, 未对患者体内病菌进行有效抑制, 而在持续治疗过程中增加抗生素用药剂量, 容易导致患者抗生素敏感性与细菌耐药性增加, 致使临床对疾病的治疗难度提升, 无法保障抑菌效果。因而临床需要合理开展细菌检验, 以细菌检验结果为抗生素治疗方案的制度提供参考依据。本次研究中对临床血液标本分别采取直接细菌鉴定、药敏试验检验,检验结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2021 年10 月～2022 年10 月住院部及门诊200 例患者的血液标本, 其中男120 例,女80 例；年龄20～65 岁, 平均年龄(40.83±12.58)岁。本次研究取得本院医学伦理委员会的审批, 且患者对研究内容知情同意。本次纳入患者均为无血液系统疾病。

1.2 方法 对所有患者的血液标本均开展直接细菌鉴定与药敏试验法检验。直接细菌鉴定法：将患者血液样本直接放置在巧克力平板或者血平板、麦康凯平板进行接种, 在特定环境下进行培育(一般将温度控制在35℃, 二氧化碳浓度控制在6%), 培育时间为18～24 h,在孵育后进行染色处理, 再进行直接细菌鉴定。

药敏试验法：医护人员在无菌试管中放入患者的血液标本, 运用离心机对血液标本开展离心处理, 将离心机速度设置为1500 r/min, 离心5 min。医护人员将离心后的上清液转移到另外的无菌试管中, 随后进行离心, 离心速度为3500 r/min, 需进行15 min 的离心, 然后移除离心后的上清液, 运用磷酸缓冲盐溶液对试管中的沉淀进行洗涤, 需对沉淀进行2 次洗涤, 沉淀2 次后重悬。对悬液开展常规染色并以显微镜对细菌形态进行初步观察。若观察到革兰阳性菌(G+菌)存在有链状时则开展平板除初检, 并结合试验结果开展酶试验,将菌液浓度控制在6.0×105cfu/L, 再进行药敏试验。若为常规菌, 则可以直接在MH 平板上进行接种悬液, 进行耐药性试验。本次研究中设备系统为D2mini。

本次试验过程中的各方面操作均由本院具备有5 年以上检验医师进行, 确保各方面操作的准确性, 排除偶然误差, 培养结果由2 名5 年以上检验医师共同进行评估, 确保各方面数据结果的准确性。

1.3 观察指标 分析直接细菌鉴定对各项病原菌(克雷伯杆菌、埃希氏菌、假单胞杆菌、肠球菌、不动杆菌、葡萄球菌、甲型副伤寒菌、其他)检验的符合率、药敏试验法对药物敏感符合率, 并比较两种检验方法的检验时间。

1.4 统计学方法 采用SPSS19.0 统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差(±s)表示, 采用t检验。P<0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 直接细菌鉴定对各项病原菌检验的符合率分析

直接细菌鉴定对克雷伯杆菌、埃希氏菌、假单胞杆菌、肠球菌、不动杆菌、葡萄球菌、甲型副伤寒菌以及其他病原菌检验的符合率均为100.00%。见表1。

表1 直接细菌鉴定对各项病原菌检验的符合率分析(n, %)

2.2 两种检验方法的检验时间比较 直接细菌鉴定检验时间(32.19±6.49)min 短于药敏试验法的(57.93±8.61)min, 差异具有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 两种检验方法的检验时间比较(n=200, ±s)

表2 两种检验方法的检验时间比较(n=200, ±s)

注：与药敏试验法比较, aP<0.05

方法 检验时间(min)直接细菌鉴定 32.19±6.49a药敏试验法 57.93±8.61 t 33.762 P 0.000

2.3 药敏试验法对药物敏感度的符合率分析 药敏试验法检验中G+球菌对药物耐药、中度敏感、敏感的符合率分别为90.00%、90.91%、85.33%, G-杆菌对药物耐药、中度敏感、敏感的符合率分别为89.33%、91.11%、93.75%。见表3。

表3 药敏试验法对药物敏感度的符合率分析(n, %)

3 讨论

败血症和菌血症在临床中都属于血液感染性疾病, 这两种疾病的发病原因主要是细菌侵袭血液系统。近些年临床败血症与菌血症的发病率在逐渐升高, 诱发因素较为复杂, 细菌能够通过内置器、静脉注射、插管、外部创伤等途径进入患者体内, 对患者健康造成影响［2,3］。此外, 近些年临床在对感染类疾病开展治疗过程中主要使用抗生素进行治疗, 结合观察可以发现临床可使用的抗生素类型较多, 具有较高的可选择性。在具体用药治疗的过程中, 若未对抗生素类型进行合理选择, 则无法保障抑菌效果, 同时长时间使用抗生素过程中容易导致患者产生耐药性, 进一步增加治疗难度, 所以临床在对血液感染类疾病进行治疗时进行病原菌菌种鉴定与药敏试验存在重要价值。本次研究对血液标本开展直接细菌鉴定、药敏试验法检验,深入探究两种检验方法的鉴定价值。

血液是机体体液的重要组成部分, 如果各器官发生病理变化, 往往会引起血液成分的变化, 所以常通过检验血液诊断机体的健康状况［4］。通过血液检验, 可以更准确的了解机体各个系统、器官及不同细胞的生理生化状态, 有助于临床医生做出正确的判断［5］。在临床医疗研究持续发展的情况下, 可供选择的抗生素类型以及数量均明显增加, 在实际治疗的过程中为确保抗生素的综合治疗效果, 更应当结合患者病症实际情况, 选择最佳的药物进行治疗, 避免在盲目使用抗生素(或者大剂量用药)过程中导致患者出现耐药, 影响患者恢复。药敏试验法是临床较为常用的检验方式,可以准确检测出病原体对抗生素敏感性, 对于指导临床用药存在有极为重要的作用。在检验过程中, 通常在对应病原体生长的培养皿上贴上一些沾有相应抗生素的圆片, 观察沾有抗生素的圆片周围是否有细菌生长［6］。如果抑菌圈较小, 则可以说明药物对于这种病原体的抑菌作用较差, 如果抑菌圈较大, 则说明这种药物对于这个病原体有非常好的抑菌、抗菌效果, 即细菌对药物敏感。临床在选择抗生素时要根据药物敏感试验, 选择对细菌敏感的药物使用, 才能达到好的抑菌、杀菌效果［7］。直接细菌鉴定与药敏试验法都是临床常用检验方法。药敏试验法是临床运用较多的定性试验, 药敏试验法经常被临床用来开展药物敏感性测定。通常情况下药敏试验法会结合抗生素的抑菌水平科学合理的设计试验方案, 在药敏试验过程中测量抑菌环的直径［8］。药敏试验法可以检出耐药性, 可以使抗生素在临床使用过程中更加具备科学性, 有助于临床医生为患者制定个性化治疗方案, 促使患者尽快恢复。但需要注意的是, 药敏试验法的结果比较容易受到设备精度、环境等因素的影响, 致使药敏试验法在临床运用中具有比较大的局限性［9］。同时药敏试验法需要经历较长的流程, 在流程顺畅的情况下, 从试验开始到结束需要2 d, 若过程中无其他问题需解决, 则需要3 d［10］。在患者药敏结果没有出来前, 临床医生只是结合患者临床表现以及自身工作经验对其制定治疗方案［11-13］。在对患者使用抗生素进行治疗的过程中需综合评估患者的各方面情况, 对抗生素类型进行科学的选择, 严谨用药, 不得随意增加抗生素的使用剂量,以免导致患者出现耐药, 增加治疗难度。运用直接细菌鉴定的方式对细菌类型进行鉴定, 同样可以为临床用药提供指导, 且该检查具备有较高的时效性, 检测时间相对较短, 能够在较短时间内得到结果。

直接细菌鉴定会运用仪器直接接种血液标本, 孵育后就能够开展试验, 该方法能够省略先分离再培养的环节, 有效缩短检验时间［14,15］。同时直接细菌鉴定还能够对环境内二氧化碳的变化进行检验, 根据二氧化碳的结构合理分析氧气和菌种之间存在的关系, 以此明确最合适的增殖方式。本次研究结果数据显示,直接细菌鉴定对病原菌的检验符合率较高, 可以充分说明直接细菌鉴定在临床血液检验当中具有较高的应用价值。同时结果数据表示, 直接细菌鉴定的检验时间短于药敏试验法, 由此可以说明直接细菌鉴定的操作时间短, 临床可以用更短的时间取得良好的细菌鉴定结果, 从而能够为患者的临床用药提供有效参考, 确保可以针对性用药, 让患者在患病早期即可得到最佳治疗。药敏试验法对药物敏感度的符合率较高, 这可以说明药敏试验法能够有效测定药物的敏感情况, 可以为患者临床用药提供一定指导, 可以有效降低患者在使用抗生素治疗过程中产生的耐药性。同时, 两种检测方式操作相对较为简单, 所需费用较低, 在临床诊断以及治疗的过程中具备有较高的推广性, 对于保障临床用药的科学性存在有重要作用。在实际检验的过程中, 为充分保障临床血液检验过程中直接细菌鉴定与药敏试验法的检测准确性, 需要对以下几个层面问题加以重视。①科学处理血液样本：在对患者血液样本进行采集后, 应当立即进行送检, 并在最短时间内完成各方面检验操作, 降低血液样本污染率或者其他非人为因素的影响, 提高检测结果的准确性。对无法立即进行检测的血液样本则需要严格按照检测规定做好样本的临时存放工作, 充分保障样本在检测前的质量；②规范各方面操作：直接细菌鉴定与药敏试验法均属于较为紧密的实验操作, 任何一个操作步骤出现问题均有可能影响到检测结果, 导致出现检测偏差等情况,尤其在进行直接细菌鉴定前需要准确评估待检测样本是否受到污染等, 确保检测结果的准确性；③合理设置对照实验：在进行药敏试验的过程中可确保试验结果的准确性, 可以合理进行对照组试验, 确保可以在最短时间内对患者耐药性进行分析, 为临床用药提供科学指导；④提升检测医师对该方面检测工作的重视程度：在进行直接细菌鉴定与药敏试验法的过程中, 要求检测医师保持较高的责任意识, 各方面操作均需要严格按照规定进行, 避免出现操作不规范或者不合理的行为, 影响到检测结果的准确性。

综上所述, 临床血液检验能够运用直接细菌鉴定、药敏试验法进行检验, 直接细菌鉴定与药敏试验法均可以获得良好的效果, 可以在临床治疗中实现准确用药, 进一步提高治疗效果, 减少患者的治疗费用, 从而实现医疗服务质量得到进一步提高, 但直接细菌鉴定检验时间较短, 可以更进一步缩短患者的治疗等待时间, 故临床可以优先推广直接细菌鉴定的运用。