Th22、Th17、Treg淋巴细胞在白癜风患者中的表达及其与血清5-HT、MT水平的关系

郭冰心,田卓,翟翊然

(南阳市中心医院 皮肤科,河南 南阳 473000)

白癜风是一种常见的后天性限局性或泛发性皮肤色素脱失病,多数由皮肤黑素细胞功能异常引起[1]。目前,临床上普遍认为白癜风与患者自身免疫、微量元素缺乏、精神及神经化学等有关,好发于指、背、颜面、腕、生殖器周围等,影响患者形象[2-3]。辅助性T淋巴细胞22(T helper lymphocyte 22,Th22)由朗格汉斯细胞分化而来,直接参与白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分化[4-5]。辅助性T淋巴细胞17(T helper lymphocyte 17,Th17)是CD4+Th淋巴细胞亚群,具有独立的分化、发育机制,能特异性产生IL-17,且在白癜风中的作用已经有报答,能参与机体免疫调节[6]。调节性T淋巴细胞(Treg)在维持机体免疫自稳、免疫耐受中发挥了重要的作用[7]。5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)的代谢产物直接影响色素脱失,5-HT在白癜风发病过程中存在相关的症状有非常重要的作用,人类皮肤的颜色主要与表皮中黑素细胞合成黑素以及黑素传递至周围角质形成细胞有关。酪氨酸酶是黑素合成的关键酶,是黑素细胞分化成熟的一个特征性标志,其活性与黑素合成含量呈正相关,因而增加黑素细胞数量、激活酪氨酸酶和加速黑素合成的治疗手段对白癜风的复色有治疗效果。但是,临床上对于Th22、Th17及Treg淋巴细胞在白癜风患者中的表达及与血清5-HT、褪黑素(melatonin,MT)水平相关性研究较少[8-9]。本文采旨在探讨Th22、Th17、调节性T淋巴细胞Treg在白癜风患者中的表达及与5-HT、MT水平的相关性。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选择2020年5月至2022年6月医院收治的78例白癜风患者作为研究对象,作为观察组,分为活动期白癜风(48例)和静止期白癜风(30例),根据分型分为寻常型白癜风(36例)和节段型白癜风(42例)。观察组男29例,女49例,年龄(24～63)岁,平均(43.98±5.71)岁;病程(12～68)个月,平均(35.71±3.49)个月。选择同期健康体检者37例,设为对照组,男21例,女16例;年龄(25～64)岁,平均(44.11±5.79)岁。观察组和对照组的一般资料差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经医院医学伦理委员会审批。

1.2 纳入及排除标准

(1)纳入标准:符合白癜风相关诊断标准[10];活动期患者近3个月白斑扩大、增多,且具有新发皮损、边界模糊。(2)排除标准:合并其他皮肤疾病;合并脑血管疾病;合并精神异常;有自身免疫系统疾病;凝血功能异常;近期使用其他方法治疗影响预后评估。

1.3 方法

1.3.1仪器与设备

酶标仪(南京华东电子医疗设备有限责任公司)、台式自动高速低温离心机TG16-W(德国Eppendorf公司)、酶联免疫吸附试验试剂盒(天根生化科技有限公司)、超低温冰箱(美国Termo Forma公司)。

1.3.2标本采集及检测

观察组次日早晨复诊空腹状态下取静脉血3 mL,对照组健康体检当天取空腹静脉血3 mL,15 min离心,离心力1 184 g,血清分离后放置在-30 ℃冰箱中备用。采用酶联免疫吸附试验测定5-HT、MT水平[11]。采集外周静脉血,分离外周血单个核细胞,通过流式细胞技术定量分析Th22、Th17等。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 Th22、Th17、Treg、5-HT、MT水平

观察组患者Th22、Th17水平高于对照组(P<0.05),Treg、5-HT、MT水平低于对照组(P<0.05),见表1。

表1 观察组与对照组Th22、Th17、Treg、5-HT、MT水平比较

2.2 观察组患者疾病活动期和静止期Th22、Th17、Treg、5-HT、MT水平

观察组患者活动期Th22、Th17水平高于静止期(P<0.05),Treg、5-HT、MT水平低于静止期(P<0.05),见表2。

表2 观察组患者疾病活动期和静止期Th22、Th17、Treg、5-HT、MT水平比较

2.3 观察组疾病寻常型和节段型患者IL-22、IL-17、Foxp3、5-HT、MT水平

观察组寻常型Th22、Th17水平高于节段型(P<0.05),Treg、5-HT、MT水平低于节段型(P<0.05),见表3。

表3 观察组疾病寻常型和节段型患者IL-22、IL-17、Foxp3、5-HT、MT水平比较

2.4 白癜风患者Th22、Th17、Treg水平与5-HT、MT水平相关性

Pearson相关性分析结果显示患者Th22、Th17与5-HT、MT水平呈负相关(P<0.05),Treg水平与5-HT、MT水平呈正相关(P<0.05),见表4。

表4 白癜风患者Th22、Th17、Treg与5-HT、MT水平相关性分析

3 讨论

白癜风是临床上常见的皮肤病,以皮肤黑素细胞破坏为特征,导致皮损部位黑素细胞明显减少或缺失[12]。目前,临床上对于白癜风发病机制尚不完全知晓,普遍认为与自身免疫、黑色细胞毒性、神经体液调节及遗传因素有关[13]。白癜风的发生是一个多因素过程,常伴有多种免疫细胞与细胞因子参与,而细胞毒T细胞能通过细胞凋亡形式破坏黑素细胞,导致黑素细胞分化抗原特异性细胞毒T细胞免疫破坏[14],但是其具体机制尚未明确。Th22淋巴细胞是近年来新发现的CD4+T和淋巴亚群,独立于Th1、Th2及Th14淋巴细胞水平[15]。Th22在诸多自身免疫性皮肤病如银屑病、系统性红斑狼疮等发挥了重要的作用[16]。Th22是一类以IL-22、IL-26、IL-22为主的淋巴细胞,其在表皮免疫及重构中发挥重要作用,与皮肤疾病的发生、发展及皮肤功能平衡有着密切联系,在T细胞介导的皮肤中发挥了重要的作用。同时,Th22亦可发挥促进抗微生肽生存、抵抗细菌或病毒感染作用,能促进角质细胞的增殖。白癜风患者Th22水平相对较高,且活动期水平高于静止期时。寻常型白癜风高于节段型[17]。Th17淋巴细胞是近年来发现的一种CD4+T淋巴细胞。Th17淋巴细胞在肿瘤、自身免疫性疾病及炎症等疾病中发挥了重要的作用[18]。白癜风免疫机制相对复杂,Th17淋巴细胞能产生并接到IL-17,从而能介导前炎症反应[19]。本次研究结果显示白癜风患者Th17水平高于正常人群,且活动期高于静止期,寻常型高于节段型。Treg淋巴细胞是一种对机体免疫具有负性调节作用的T淋巴细胞亚群,在免疫平衡中能发挥免疫调节与监控作用。Treg淋巴细胞能诱发皮肤黑素细胞分泌IL-6,从而能引起自身免疫反应、炎症及氧化应激机制,能参与白癜风的发生、发展[20-21]。本研究结果显示观察组白癜风患者Th22、Th17水平高于对照组,Treg、5-HT、MT水平低于对照组。观察组活动期Th22、Th17水平高于静止期,Treg、5-HT、MT水平低于静止期。观察组寻常型Th22、Th17水平高于节段型,Treg、5-HT、MT水平低于节段型。

5-HT是一种重要的神经递质,主要在脑神经细胞内合成酶的作用下合成,其合成减少会引起机体免疫及微环境发生异常,且在白癜风中多呈低表达[22]。MT是5-HT的衍生物,能发挥免疫调节、抗氧化、保持与平衡内分泌等多种生理作用。本研究结果显示5-HT、MT在白癜风患者中均呈低表达,直接参与白癜风的发生、发展。Pearson相关性分析结果显示白癜风患者Th22、Th17与5-HT、MT水平呈负相关,Treg水平与5-HT、MT水平呈正相关,说明白癜风患者伴有免疫功能紊乱,且与5-HT、MT水平存在紧密的联系,加强患者5-HT、MT水平及免疫测定能反映患者疾病严重程度,对于确诊者应及时制定有效的措施干预,且治疗期间可加强5-HT、MT水平评估预后及指导临床治疗[23-24]。

4 结论

白癜风患者中Th22、Th17呈高表达,而Treg淋巴细胞呈低低表达,且与5-HT、MT水平呈相关性,能相互促进、相互影响,疾病的进展可能与Th22、Th17、5-HT及MT的表达相关。