肝细胞癌患者经导管动脉化疗栓塞术前后血清HIF-1α、VEGF水平变化及其意义

宋淑莉，王淑娇，李红梅，薛芝敏

沧州市人民医院本部消化内科，河北 沧州 061002

肝细胞癌（HCC）是世界范围内癌症相关死亡的主要原因，其发病率和癌症特异性死亡率仍在不断升高。经导管动脉化疗栓塞术（TACE）能够将高剂量的细胞毒性药物选择性地施用于瘤床并予动脉栓塞，诱导肿瘤组织缺血、缺氧和坏死，是目前治疗HCC 的常用手段［1-2］。缺氧诱导因子1α（HIF-1α）是对缺氧做出适应性反应的关键调节因子，可激活血管内皮生长因子（VEGF），促进血管生成，从而有利于肿瘤进展［3］。有研究报道，HIF-1α 过表达的HCC患者更易发生侵袭和转移，预后非常差［4］。一项荟萃分析亦显示，约50% HCC 患者HIF-1α 过表达，并与较差的总体生存率相关［5］。HIF-1α 和VEGF作为肿瘤血管生成的重要因子，在HCC的发生、发展中发挥重要作用，对HCC 患者TACE 的疗效评价和个体化治疗具有重要意义。因此，监测肝癌组织HIF-1α、VEGF 表达变化是评价HCC 疗效的一部分。但TACE治疗前后血清HIF-1α、VEGF水平变化与HCC患者预后的关系尚不明确。鉴于此，本研究观察了HCC 患者TACE 治疗前后血清HIF-1α、VEGF 水平变化，并探讨其临床意义。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2016 年10 月—2019 年10 月在沧州市人民医院接受TACE 治疗的HCC 患者142例，男108 例、女34 例，年龄38～62（59.5 ± 8.4）岁。纳入标准：①符合HCC 诊断标准；②肝功能Child-Pugh 分级A、B 级；③ECOG 评分0～2 分；④预计生存期＞3 个月；⑤具备TACE 治疗适应证且无相应禁忌证［6］。排除标准：①合并肝性脑病、难治性腹水、肝肾综合征等导致肝功能障碍的疾病者；②门静脉主干完全被癌栓栓塞且侧支血管形成少者；③合并活动性肝炎者；④合并肾功能障碍者；⑤合并其他部位肿瘤者。本研究经沧州市人民医院伦理委员会批准（审批编号：20190521），所有研究对象或其家属知情同意并签署书面知情同意书。

1.2 治疗方法 所有研究对象入院后完善相关检查，禁食4～6 h，常规建立静脉通路、留置导尿管。患者取平卧位，采用Seldinger法经皮穿刺股动脉，放置导管鞘插入导管行肝动脉造影，明确肿瘤的位置、大小、数目及供血情况，再将导管选择性插入肿瘤的供血动脉，顺铂、5-氟尿嘧啶灌注化疗，然后吡柔比星和超液化碘油混合制成乳剂栓塞肿瘤血管，术后予保肝、止吐、镇痛等对症治疗。

1.3 血清HIF-1α、VEGF 检测 TACE 治疗前和治疗后3天，采集所有研究对象空腹肘静脉血5 mL，待血液自然凝固，取上清液，3 000 r/min 离心10 min、离心半径16 cm，留取上层血清，-80 ℃冰箱保存。采用ELISA 法检测血清HIF-1α、VEGF。ELISA 试剂盒购自武汉赛培生物科技有限公司，所有操作严格按试剂盒说明进行。

1.4 随访 所有研究对象经TACE 治疗，病情好转出院。出院后以电话和门诊复查形式定期随访3年，随访截至2022年10月，以患者死亡为终点事件，记录患者生存状况。

1.5 资料收集 收集HCC 患者入院后临床资料，包括性别、年龄、BMI、肿瘤数量、肿瘤最大径、TNM分期、ECOG评分、肝功能Child-Pugh分级，是否合并血管侵犯、转移、静脉癌栓、门静脉高压、腹水以及ΔHIF-1α、ΔVEGF。其中，ΔHIF-1α=治疗前血清HIF-1α 水平-治疗后血清HIF-1α 水平，ΔVEGF=治疗前血清VEGF水平-治疗后血清VEGF水平。

1.6 统计学方法 采用SPSS21.0 统计软件。正态分布的计量资料以xˉ±s表示，结果比较采用独立样本t检验；非正态分布的计量资料以M（P25，P75）表示，结果比较采用秩和检验。计数资料比较采用χ2检验。危险因素分析采用多因素Cox 回归模型。生存分析采用Kaplan-Meier 法，生存率比较采用Log-rank检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组治疗前后血清HIF-1α、VEGF水平比较 截至2022年10月，所有研究对象随访8～36个月、中位随访28个月，随访期间死亡40例（死亡组）、存活102例（存活组）。两组治疗前后血清HIF-1α、VEGF水平比较见表1。死亡组与存活组血清ΔHIF-1α 水平分别为0.11（0.06，0.98）、0.36（0.12，1.15）ng/mL，血清ΔVEGF 水平分别为26.28（13.21，98.32）、56.25（23.21，135.30）pg/mL。死亡组血清ΔHIF-1α、ΔVEGF 水平均低于存活组（Z分别为4.210、12.632，P均＜0.05）。

2.2 HCC 患者TACE 治疗后3 年死亡的危险因素分析结果 两组临床资料比较见表2。将表1、2 中差异有统计学意义的指标纳入多因素Cox 回归模型，结果显示肿瘤最大径、TNM 分期Ⅲ期、ECOG 评分2分、血管侵犯、转移、ΔHIF-1α、ΔVEGF是HCC患者TACE 治疗后3 年死亡的危险因素（P均＜0.05），见表3。

表2 两组临床资料比较

表3 HCC患者TACE治疗后3年死亡的多因素Cox回归分析结果

2.3 不同血清ΔHIF-1α、ΔVEGF 水平HCC 患者TACE治疗后3年累积存活率比较 以血清ΔHIF-1α水平的中位数为临界值，将患者分为血清ΔHIF-1α高水平者82例和低水平者60例，血清ΔHIF-1α高水平者与低水平者TACE 治疗后3 年累积存活率分别为73.2%、53.3%，血清ΔHIF-1α 高水平者与低水平者生存曲线比较差异有统计学意义（Log-rankχ2=6.287，P＜0.05）。以血清ΔVEGF 水平的中位数为临界值，将HCC 患者分为血清ΔVEGF 高水平者74例和低水平者68 例，血清ΔVEGF 高水平者与低水平者TACE 治疗后3 年累积存活率分别为73.0%、55.9%，血清ΔVEGF 高水平者与低水平者生存曲线比较差异有统计学意义（Log-rankχ2=5.312，P＜0.05）。

3 讨论

肝癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一，预后较差，5 年生存率不足15%。HCC 是肝癌最常见的病理类型，占原发性肝癌的75%～80%。HCC 起病隐匿，大多数患者就诊时已处于中晚期，错过了根治性手术的最佳时机。TACE 是中晚期HCC 的重要治疗手段，已被推荐为肝癌的一线疗法［7-8］。

HCC 的恶性程度较高，易发生门静脉侵袭和远处转移。而抑制侵袭和转移是目前HCC 治疗的难题之一［9］。HCC 是一种高度血管化的实体肿瘤，肿瘤血管生成在其发生、发展中具有至关重要的作用。HIF-1α 和VEGF 是肿瘤血管生成的重要因子。HIF-1α通过激活人VEGF 基因转录，在促进HCC 的侵袭、转移和血管生成中发挥重要作用［10］。LIN等［11］研究报道，HCC 患者TACE 治疗后3 天血清HIF-1α 水平显著降低，并且其水平变化可反映TACE 的治疗效果。有研究还发现，在原发性肝癌中HIF-1α 表达与整体生存率显著相关，是TACE 疗效和肿瘤转移的预测指标［12］。有研究认为，恶性肿瘤患者血管生成和缺氧状况可通过检测血清HIF-1α水平来评估［13］。较高的ΔHIF-1α、ΔVEGF 水平表明TACE 治疗后血清HIF-1α、VEGF 水平显著降低，提示治疗效果较好［11］。

本研究结果显示，死亡组和存活组TACE 治疗后血清HIF-1α、VEGF 水平均低于治疗前，但死亡组血清ΔHIF-1α、ΔVEGF 水平均低于存活组。结果表明，血清ΔHIF-1α、ΔVEGF水平降低有利于改善HCC患者预后。本研究多因素Cox回归分析显示，ΔHIF-1α、ΔVEGF均为HCC患者TACE治疗后3年死亡的危险因素。有研究报道，靶向HIF-1α/VEGF 信号通路的药物可抑制HCC 生长，是一种非常有前景的治疗策略［14-15］。本研究以血清ΔHIF-1α、ΔVEGF 水平的中位数为临界值，将HCC 患者分为血清ΔHIF-1α 高水平者与低水平者、血清ΔVEGF 高水平者与低水平者。经TACE 治疗后，血清ΔVEGF、ΔHIF-1α 低水平者TACE治疗后3年累积存活率均低于其高水平者，表明血清ΔHIF-1α、ΔVEGF 高水平与HCC 患者TACE治疗后预后不良密切相关。

综上所述，HCC 患者TACE 治疗后死亡者血清HIF-1α、VEGF水平均高于存活者，并且血清ΔHIF-1α、ΔVEGF 高水平与HCC 患者TACE 治疗后预后不良密切相关。