松花粉青梅复合提取液的促消化功能研究

董旭 尹利端 杜芬 刘楚怡

摘要［目的］评价松花粉青梅复合提取液对功能性消化不良动物模型的作用。［方法］建立功能性消化不良小鼠的动物模型，并利用该模型考察松花粉青梅复合提取液对消化系统的促进能力。综合评价松花粉青梅复合提取液对动物的食物利用率、小肠运动情况、消化酶分泌情况和胃排空试验的影响。［结果］松花粉青梅复合提取液对体重增重、摄食量和食物利用率都有明显促进作用，且能够增加消化不良模型小鼠的墨汁推进率，增加胃蛋白酶活性和模型小鼠的胃排空率。［结论］松花粉青梅复合提取液能够明显提升小鼠的胃肠运动功能。

关键词功能性消化不良；松花粉青梅复合提取液；动物模型；墨汁推进率

中图分类号R 284文献标识码A

文章编号0517-6611（2023）24-0170-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2023.24.038

Study on Digestionpromoting Function of Compound Extract of Pine Pollen and Greengage

DONG Xu1，YIN Liduan2，DU Fen3 et al

（1.Key Laboratory of Marine Drugs，Ministry of Education，School of Medicine and Pharmacy，Ocean University of China，Qingdao，Shandong 266003;2.Yantai New Era Health Industry Chemical Co.，Ltd.，Yantai，Shandong 264006;3.Marine Biomedical Research Institute of Qingdao，Qingdao，Shandong 266001）

Abstract［Objective］To evaluate the effect of compound extract of pine pollen and greengage on digestive function of animal model.［Method］The animal model of functional dyspepsia in mice was established and used to investigate the promoting effect of compound extract of pine pollen and greengage on digestive system.The effects of pine pollen and greengage compound extract on food utilization，movement of small intestine，secretion of digestive enzymes and gastric emptying in rats were evaluated comprehensively.［Result］The compound extract of pine pollen and greengage had a significant promoting effect on weight gain，food intake and food utilization rate，and could increase the ink propulsion rate of dyspeptic mice，pepsin activity and gastric emptying rate of model mice.［Conclusion］The compound extract of pine pollen and greengage can significantly enhance the gastrointestinal motility of mice.

Key wordsFunctional dyspepsia;Compound extract of pine pollen and greengage;Animal model;Ink propulsive rate

近年来，随着生活节奏的加快、饮食结构的变化，使得当今社会人们消化功能紊乱等疾病的发病率显著上升。消化不良主要表现是由消化功能减弱、内部功能紊乱所引发的胃肠道不适的系统性疾病［1］。功能性消化不良疾病起源于胃十二指肠区域，表现为上腹部存在不适或慢性和复发性疼痛，是最常见的消化系统综合征［2-3］。有数据显示，目前门诊疾病中消化内科疾病发病率高达23%［4-5］。

针对这类消化系统疾病，临床上主要使用H2受体拮抗剂、促胃肠动力药和质子泵抑制剂等合成药［6］，长期治疗副作用大，效果却不理想［7-8］。从天然药食同源植物中探索副作用小且具有促消化功能的原材料，进行有效配伍，并结合现代制剂技术开发产品，越来越受到人们的关注，具有良好的市场前景和较高的社会价值［9-10］。

松花粉多糖具有良好的免疫调节［11］以及降血糖、降血脂功能［12］，也被广泛应用于功能制品中。前期研究發现松花粉也具有一定的促消化作用，并将其与青梅提取物进行最适比例的复配，获得具有良好性状与活性的复配提取物［13-14］。该研究旨在建立功能性消化不良动物模型，并利用该模型研究松花粉青梅复合提取物对功能性消化不良动物食物利用率、小肠运动情况、消化酶分泌情况和胃排空的影响，考察其促消化功能。

1材料与方法

1.1试验材料

松花粉青梅复合提取液，烟台新时代健康产业有限公司；乙醇、盐酸、柠檬酸、乙醚北、淀粉、葡萄糖、羧甲基纤维素钠，北京化学试剂公司；磷酸盐缓冲液（PBS）、胃蛋白酶活性检测试剂盒，索来宝公司；阿托品，Sigma公司；墨汁，荣宝斋；奶粉，飞鹤集团公司；生理盐水；小鼠（18～22 g）、SD大鼠（120～150 g），济南鹏悦动物繁育公司。

1.2试验设备

SY21-NI4V恒温水浴锅，北京长风仪器仪表公司；GL-20B高速冷冻离心机，上海安亭实验仪器厂；TS-1 涡旋振荡器，其林贝尔仪器制造有限公司；AY220电子分析天平，日本岛津公司；电热恒温鼓风干燥箱，上海市实验设备厂； pHS-3C精密pH计，上海精密科学仪器有限公司；紫外可见分光光度计，UNICO公司；96孔培养板（平底），Gibico公司。

1.3试验方法

1.3.1松花粉青梅复合提取液的制备。

将干燥松花粉按料液比1∶25（g∶mL）与纯化水混合，经浸提、超声处理后，过滤、浓缩得松花粉提取液；八成熟新鲜青梅果经清洗、热烫、去核处理后，打浆，离心，过滤，得青梅汁；将松花粉提取液与青梅汁按照1∶1重量比混合，即得松花粉青梅复合提取液。

1.3.2松花粉青梅复合提取液对大鼠食物利用率的影响。

选用同性别120～150 g SD大鼠，每组8只，分为阴性对照组、松花粉青梅复合提取液人体推荐剂量5倍、10倍和20倍剂量组，经口给予对应受试样品30 d，每7 d测2次体重和食物摄入量，计算体重增重、摄食量和食物利用率。

1.3.3松花粉青梅复合提取液促进大鼠消化酶分泌试验。经口给予各组大鼠对应受试样品30 d后，乙醚麻醉大鼠，幽门结扎法收集胃液，测定单位时间内胃液量和胃蛋白酶活，按以下公式计算胃蛋白酶排出量。

胃蛋白酶排出量（U/h）=胃蛋白酶活性×每小时胃液量

1.3.4松花粉青梅复合提取液促进小鼠小肠运动试验。

选用体重在18～22 g同性别小鼠，每组10只，除空白组外，模型组和低、中、高剂量样品组均用0.05%复方地芬诺酯造模，经口给予对应受试样品30 d。最后一次给予受试样品30 min 后给予复方地芬诺酯，30 min后再给予墨汁指示剂，25 min后处死动物，按以下公式计算墨汁推进率。

墨汁推进率=墨汁推进长度/小肠总长度×100%

1.3.5松花粉青梅复合提取液促进小鼠胃排空试验。

经口给予各组大鼠对应受试样品30 d后，各组小鼠腹腔注射1 mg/kg 阿托品，20 min 后每只灌胃0.8 mL半固体营养糊（10 g 羧甲基纤维素钠、16 g 奶粉、8 g 糖、8 g 淀粉和 2 g 活性炭溶于 250 mL 蒸馏水），20 min 后脱颈处死小鼠，迅速剖腹进行全胃切除称重，并洗去胃内容物后称胃净重，按以下公式计算胃内残留率和排空率。

胃残留率=（胃全重-胃净重）/半固体营养糊质量×100%

胃排空率=1-胃残留率

1.4数据分析

采用Microsoft Office Excel 2003 进行绘图，统计学分析采用 SPSS 19.0软件进行，以 t 检验进行显著性分析，P<0.05 时表示有显著性差异，P<0.01时表示有极显著差异。所有数据均以±S表示。

2结果与分析

2.1松花粉青梅复合提取液对大鼠食物利用率的影响

试验过程中，各试验组大鼠在30 d内体重变化统计结果如表1所示。从表1可以看出，试验过程中，各试验组动物均未出现拒食现象，体重均呈现逐渐增加的趋势。前21 d，与对照组相比各组大鼠体重均不存在显著差异；但自24 d后，中、高剂量组与对照组相比体重呈现显著差异；27 d后，各剂量组与对照组相比体重均呈现极显著差异，说明松花粉青梅复合提取液对大鼠的体重增加有显著作用。

对大鼠体重增重、摄食量和食物利用率分析结果见表2。从体重增重来看，与对照组相比，低、中、高剂量组大鼠体重增重均极显著增加（P＜0.01），但不同剂量试验组间不存在显著差异（P＞0.05），说明松花粉青梅复合提取液对大鼠体重增加会产生显著影响，但在设定的试验剂量范围内不存在剂量依赖关系。

在摄食量方面，与对照组相比，低、中、高剂量组摄食量均极显著增加（P＜0.01），且随着松花粉青梅复合提取液摄入剂量的增加，大鼠的食物摄入量也逐渐增加，这说明松花粉青梅复合提取液能够显著增加大鼠食欲且增加摄食量。松花粉青梅复合提取液组大鼠食物利用率与对照组相比均有所增加，其中低剂量组能够极显著提高其食物利用率（P＜0.01），但与摄入量不存在线性关系，且不同剂量试验组间不存在显著差异（P＞0.05）。

2.2松花粉青梅复合提取液对小鼠小肠运动的影响

松花粉青梅复合提取液对小鼠小肠运动影响结果如表 3所示。与对照组相比，模型组的墨汁推进率明显降低，差异有统计学意义（P<0.01），表明小鼠在灌胃给予复方地芬诺酯后，肠蠕动抑制模型建立成功。在模型成立的条件下，松花粉青梅复合提取液的高、中、低剂量给药组墨汁推进率与模型组比较均具有显著差异（P<0.01），表明松花粉青梅复合提取液能增加小鼠小肠的蠕动。

2.3松花粉青梅复合提取液对大鼠消化酶分泌的影响

从表4可以看出，与对照组相比，低、中、高剂量组大鼠的胃蛋白酶活性、胃液量和胃蛋白酶排出量均有所增加（P＜0.05），且不同剂量试验组间不存在显著差异（P＞0.05）。说明促消化功能产品会增加大鼠的胃蛋白酶活性和胃液分泌，能够较好地促进动物消化。

参照《保健食品检验与评价技术规范（2020 版）》规定，动物体重、体重增重、摄食量，小腸运动试验和消化酶测定指标中任2个结果阳性即可判定该受试样品结果阳性。因此，松花粉青梅复合提取液具有促消化功能。

安徽农业科学2023年

2.4松花粉青梅复合提取液对小鼠胃排空的影响

功能性消化与胃排空障碍和胃容受性舒张功能紊乱密切相关［7-8］，因此，该研究增加了胃排空试验考察松花粉青梅复合提取液对胃肠道功能障碍的影响。从表5可以看出，对照组、模型组小鼠的胃排空率分别为61.61%、38.12%，对照组的胃排空率极显著高于模型组（P<0.01），表明小鼠胃动力抑制模型建立成功。而与模型组相比，松花粉青梅复合提取液低、中、高剂量组小鼠固体食物胃排空率均有极显著增加（ P＜0.01），且随着添加剂量增加，胃排空率逐渐增高。这说明松花粉青梅复合提取液可显著提升小鼠的胃运动功能。

3结论

该研究建立了功能性消化不良大鼠动物模型及小鼠動物模型，并利用该模型研究了松花粉青梅复合提取液对消化功能的促进能力。松花粉青梅复合提取液对大鼠的体重增重、摄食量和食物利用率都有明显促进作用，对大鼠的胃蛋白酶活性和胃液分泌有显著促进作用，且能够增加消化不良模型小鼠的墨汁推进率和胃排空率，说明松花粉青梅复合提取液能够明显提升小鼠的胃肠运动功能。

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