电针联合康复运动训练对膝骨关节炎患者血液流变学和TLR4/MyD88/NF-κB 信号通路的影响

陆海红 孟庆芳★ 冷珊珊 谭长龙

膝骨关节炎（knee osteoarthritis，KOA）常引起本体感觉减退、膝关节疼痛、关节周围肌肉萎缩、肌力下降、神经-肌肉反馈降低等感觉障碍和运动功能障碍［1-2］。因此，如何有效治疗KOA 是临床上亟待解决的问题。KOA 治疗方案多样，疗效不一，其中康复运动训练是KOA 的基础治疗之一，对于恢复肌肉力量、增强膝关节的稳定性方面具有较好的改善作用，但是病情反复，疗效不稳定［3］。针灸在缓解KOA 临床症状方面具有显著功效。电针是近代人利用现代的技术跟针灸结合起来的一种方法，它主要就是针刺之后，在针的位置要加上微量的电，来增加刺激，增加临床疗效的方法［4］。本研究对海军青岛特勤疗养中心收治的部分KOA患者予以电针联合康复运动训练，总结如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

采用随机数字表，将2021 年1 月至2022 年8 月在本中心接受诊治的86 例KOA 患者分为对照组（接受康复运动训练，43 例）和研究组（对照组基础上联合电针治疗，43 例）。本试验流程由院伦理委员会审查并确认通过，受试者已签署知情同意书。

1.2 纳入排除标准

纳入标准：①诊断参考《膝骨关节炎阶梯治疗专家共识（2018 年版）》［5］；②K-L 分级Ⅰ～Ⅱ级［6］者等。排除标准：①严重心脑血管疾病患者；②合并其他膝关节疾病、膝关节骨折患者；③有手术指征须行手术治疗者等。

1.3 方法

两组均给予美洛昔康片（苏州爱美津制药有限公司，国药准字H20020141，规格：7.5 mg），口服，7.5 mg/次，1 次/d，如果症状没有改善，剂量可增至15 mg/次，1 次/d。在此基础上，对照组接受康复运动训练，训练前先行自拟中药涂擦（组方：桂枝、麻黄、忍冬藤、制草乌、马钱子、入地金牛各10 g 放入70%乙醇浸泡，浸泡时间＞2 个月）30 min/次，2 次/d。随后进行长收缩锻炼、抬腿运动、步行训练等康复运动训练，30 min/次，3 次/d。共治疗1 个月。

研究组在对照组的基础上接受电针治疗，取穴：患侧梁丘、血海、内膝眼、外膝眼、阴陵泉、阳陵泉及双侧尺泽、足三里、太冲、太溪、合谷。操作方法：患者取仰卧位，用毛毯垫高膝关节，膝关节屈曲120°左右，各穴常规手法针刺，得气后，选取患侧外膝眼和内膝眼穴，连接电针治疗仪（青岛中和医疗器械有限公司，型号规格：ZH666），选择疏密波治疗，留针30 min，每日1 次，每周治疗6 次，休息1 d。共治疗1 个月。

1.4 观察指标

1.4.1 疼痛视觉模拟评分法（visual simulation scoring，VAS）、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数（the western ontario and memaster universities osteoarthritis index，WOMAC）、Lysholm 膝关节功能评分

治疗前、治疗1 个月后用VAS［7］、WOMAC［8］、Lysholm 膝关节功能评分［9］评价病情。其中VAS总分10 分，分越高，疼痛感越强烈。WOMAC 总分120 分，分越高，疾病严重程度越重。Lysholm膝关节功能评分评为100 分，分越高，膝关节功能越好。

1.4.2 膝关节屈曲活动度（range of motion，ROM）和肌力情况

治疗前和1 个月后观察两组膝关节屈曲活动度（ROM）和肌力情况，使用无线便携式肌力测试与关节活动度计进行测量。

1.4.3 血液流变学指标

治疗前和1 个月后采集患者清晨空腹肘静脉血8 mL，其中4 mL 用北京赛科希德科技股份有限公司采购的SA-9800 全自动血液流变仪检测全血黏度（高切/低切）、血浆黏度、红细胞聚集指数。

1.4.4 外周血单核细胞Toll 样受体4/髓样分化因子88/核转录因子-κB（Toll like receptor 4/Myeloid differentiation factor 88/Nuclear transcription factorκB，TLR4/MyD88/NF-κB）信号通路

另取4 mL 血液标本将分离的外周血单核细胞调整细胞浓度至5×106/L，随后接种于细胞培养板中，37℃下培养4 h，弃细胞培养上清，获得单核细胞。经实时荧光定量扩增法（polymerase chain reactio，PCR）检测TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关指标：TLR4mRNA、MyD88mRNA、NF-κBmRNA。以GAPDH作为内参基因，采用2-ΔΔCT的数据统计方法分析基因的相对表达量。引物由XX 公司合成。见表1。

表1 引物序列Table 1 Primer sequences

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 一般资料对比

两组一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 两组一般资料比较［（），n（%）］Table 2 Comparison of general data between the two groups［（），n（%）］

表2 两组一般资料比较［（），n（%）］Table 2 Comparison of general data between the two groups［（），n（%）］

2.2 量表评分对比

与治疗前比较，两组治疗1 个月后VAS、WOMAC 评分降低，Lysholm 膝关节功能评分升高，且研究组改善效果优于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 两组量表评分对比［（），分］Table 3 Comparison of scale scores between the two groups［（），score）］

表3 两组量表评分对比［（），分］Table 3 Comparison of scale scores between the two groups［（），score）］

注：与治疗前对比，aP＜0.05。

2.3 两组ROM 和肌力对比

与治疗前比较，两组治疗1 个月后ROM 和肌力增加，且研究组高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表4。

表4 两组ROM 和肌力对比（）Table 4 Comparison of ROM and muscle strength between the two groups（）

表4 两组ROM 和肌力对比（）Table 4 Comparison of ROM and muscle strength between the two groups（）

注：与治疗前对比，aP＜0.05。

2.4 两组血液流变学指标对比

与治疗前比较，两组治疗1 个月后全血黏度（高切/低切）、血浆黏度、红细胞聚集指数下降，且研究组低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表5。

表5 两组血液流变学指标对比（）Table 5 Comparison of hemorheological indexes between the two groups（）

表5 两组血液流变学指标对比（）Table 5 Comparison of hemorheological indexes between the two groups（）

注：与治疗前对比，aP＜0.05。

2.5 两组外周血单核细胞TLR4/MyD88/NF-κB 信号通路对比

与治疗前比较，两组治疗1 个月后TLR4mRNA、MyD88mRNA、NF-κBmRNA 下降，且研究组低于对照组（P＜0.05）。见表6。

表6 两组外周血单核细胞TLR4/MyD88/NF-κB 信号通路对比（）Table 6 Comparison of TLR4/MyD88/NF-κB signaling pathway in peripheral blood monocytes between the two groups（）

表6 两组外周血单核细胞TLR4/MyD88/NF-κB 信号通路对比（）Table 6 Comparison of TLR4/MyD88/NF-κB signaling pathway in peripheral blood monocytes between the two groups（）

注：与治疗前对比，aP＜0.05。

3 讨论

KOA 患者因关节疼痛和活动受限，使得肌肉无力，而肌肉无力又促进了KOA 进展，从而导致患者日常生活活动能力下降。因此，KOA 的治疗已从单纯治疗发展到综合康复治疗，如康复运动训练、电刺激、针刺等，其中康复运动训练可恢复关节周围组织良好的生物力学特征，强化膝周动态稳定性及运动能力，改善膝关节整体功能，但仍有部分患者改善效果一般。针刺疗法对于KOA的疗效已有一定的共识，而电针是在针刺基础上发展而来的一种疗法，可通过设置特定的强度、频率及治疗时间，削弱普通针刺手法差异带来的误差，力争达到最佳的治疗效果。

本文中电针联合康复运动训练治疗KOA 患者，可降低VAS、WOMAC 评分，提高Lysholm 膝关节功能评分，同时还可改善膝关节ROM 和肌力。可见电针联合康复运动训练治疗KOA 患者，对于改善患者的症状，应用价值较高。针刺阴陵泉、内膝眼、梁丘、外膝眼、血海、阳陵泉等穴位简便有效，而电针既有针刺的调节作用，又能使电刺激的效应透入穴位，可达强筋骨、祛除病邪等作用，缓解患膝疼痛、肿胀等症状［10］。结合康复运动训练，有助于改善关节软骨的营养，达到更好的治疗效果［11］。相关报道证实［12］，电针具有促进软骨生成、改善关节活动度的作用。本次研究结果也发现，电针联合康复运动训练可改善KOA 患者的血液流变学相关指标。主要是因为电针可产生舒适的深部肌肉按摩效果，促进膝关节局部血液循环，有助于改善血液流变学，促进关节内炎症吸收，加速致痛物质的排泄，从而有利于临床症状改善。现代医学对KOA发病机制认识仍不明确，但已有不少研究证实免疫炎症反应参与着KOA 的病情进展［13］。非特异性免疫是机体低于病原体入侵的第一道防线，主要是通过一系列基因保守且稳定的细胞表面受体，即Toll样受体（TLRs）。TLR4是TLRs家族的主要成员之一，其中信号转导方式主要通过MyD88依赖型信号通路或非依赖型信号通路进行。当TLR4与MyD88相互作用后，可导致IPAK 磷酸化，而磷酸化后的IPAK 因亲和力下降，会转向同MyD88结合，进而启动适应性免疫应答，导致NF-κB被激活，促进炎性因子激活和分泌，最后诱发炎症，参与疾病进展。既往有研究证实［14］，外周血单核细胞TLR4/MyD88/NF-κB信号通路参与KOA 进展。本文中电针联合康复运动训练可抑制KOA 患者外周血单核细胞TLR4/MyD88/NF-κB信号通路激活。既往实验证实［15］，电针能下调KOA 模型鼠中的TLR4、MyD88、NF-κB的mRNA 表达，减轻滑膜炎症，这可能也是电针治疗KOA 的主要机制之一。

综上所述，电针联合康复运动训练治疗KOA患者，可改善患者的临床症状和血液流变学，同时还可调节外周血单核细胞TLR4/MyD88/NF-κB信号通路。