川贝母及其市场常见易混品的传统鉴别

张雪影,李莉娅,蒲婧哲,张亚中,

(1.安徽中医药大学药学院,安徽 合肥 230012;2.安徽省食品药品检验研究院,安徽 合肥 230051)

中药川贝母为百合科贝母属植物川贝母(卷叶贝母)FritillariacirrhosaD.Don、暗紫贝母F.unibracteataHsiao et K.C.Hsia、甘肃贝母F.przewalskiiMaxim.、梭砂贝母F.delavayiFranch.、太白贝母F.taipaiensisP.Y.Li或瓦布贝母F.unibracteataHsiao et K.C.Hsia var wabuensis(S.Y.Tang et S.C.Yue)Z.D.Liu,S.Wang et S.C.Chen的干燥鳞茎。按性状不同分别习称“松贝”“青贝”“炉贝”和“栽培品”。川贝母具有清热润肺、化痰止咳、散结消痈的功效,主要用于治疗肺热燥咳、干咳少痰等症[1],主产于海拔3 000～4 000 m的四川甘孜、阿坝州以及与青海、甘肃、西藏交界地区[2]。

由于其特殊的生长环境,加之种子休眠期长、自然萌发率低、野生资源过度采挖等原因,正品川贝母资源匮乏、价格昂贵,难以满足临床需求[3]。因此,市场上出现了以市售价格低廉的伊贝母(FritillariapallidifloraSchrenk)、平贝母(FritillariaussuriensisMaxim)、浙贝母(Fritillariathunbergii)、湖北贝母(FritillariaeHupehensisBulbus)等掺杂或冒充川贝母进行销售的现象,这不仅进一步加剧了川贝母药用混乱的情况,也导致其临床效果得不到保障[4]。本研究从传统的性状、显微鉴别两方面将川贝母与常见的易混品进行初步区分。性状鉴别将根据药材的大小、形态、颜色、质地、断面、气味等特征进行区分[1,5-6]。显微鉴别则是根据药材淀粉粒的形状、大小,脐点的形状、位置,层纹的有无、形状,导管的类型和直径等特征进行区分[7-10]。

1 仪器与试药

1.1 仪器 α6 Sony相机:日本索尼有限公司;直尺:浙江得力集团有限公司;DM4B Leica显微镜:德国徕卡显微镜公司。

1.2 试药 水合氯醛(批号20200320,分析醇)、丙三醇(批号20201012,分析醇):国药集团化学试剂有限公司;载玻片(25 mm×75 mm)、盖玻片(24 mm×24 mm):江苏世泰实验器材有限公司。样品采集信息见表1,经鉴定均为正品。

表1 不同品种贝母的性状、显微鉴别、样品采集信息

2 方法

2.1 性状鉴别方法 参照《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0212[1],采用性状观察与测定,对收集到的川贝母及其市场易混品药材样品,通过感官记录药材的形状、表面(色泽与质地)、气味等。使用直尺测量长度、直径,相机拍照进行记录。

2.2 显微鉴别方法 粉末制片:取干燥药材粉末,参照《中华人民共和国药典》2020年版四部通则2001的显微鉴别法[1],用显微镜对其组织、细胞或内含物等特征进行鉴别。水装片(主要观察淀粉粒):取样品粉末适量,置于载玻片上,滴加超纯水,加盖盖玻片,置于显微镜下观察,调整放大倍数,拍照并记录。水合氯醛装片(主要观察导管),取药材样品粉末适量,置于载玻片上,滴加水合氯醛溶液,置于酒精灯上加热,重复此步骤2～3次,放冷,滴加稀甘油,加盖盖玻片,置于显微镜下观察,调整放大倍数,拍照并记录。

3 结果

3.1 性状鉴别结果 对收集到的川贝母及其市场常见易混品进行拍照记录,比较其性状存在的差异。见图1和表2。

注:A.松贝;B.青贝;C.炉贝;D.新疆贝母;E.伊犁贝母;F.平贝母;G.浙贝母;H.湖北贝母;图中标尺示1 cm

表2 不同种类贝母药材性状鉴别

3.1.1 川贝母 松贝多呈类圆锥形或近球形,直径为0.3～1.0 cm,表面类白色;外层肉质鳞叶2片,大小悬殊,大片紧抱小片,未抱合部分呈新月状,俗称“怀中抱月”;顶端闭合,先端稍尖,底部平,微凹;气微,味微甘、微苦。

青贝多呈类扁球形,直径为0.4～1.6 cm,表面类白色;外层2片肉质鳞茎,大小相近,相对抱合;顶部开裂,裂口稍大,底部较平,微凹;气微,味微甘、微苦。

炉贝多呈长圆锥形,直径为0.5～2.5 cm,表面类白色、浅棕黄色或间有棕色斑纹,俗称“虎皮斑”;外层鳞叶2片,大小相近;顶部开裂而略尖,俗称“马牙嘴”,底部稍尖或稍钝;气微,味微甘、微苦。

3.1.2 伊贝母 新疆贝母多呈扁球形,直径为0.5～1.5 cm,表面类白色;外层2片肥厚的肉质鳞叶呈月牙形,大小相近而紧靠;顶端平展而开裂,裂口小,底部圆钝;气微,味微苦。伊犁贝母多呈圆锥形或椭球形,个体较大,表面浅黄棕色,稍粗糙;外层两片肥大的肉质鳞片呈心形,一片较大或近等大,抱合;顶端稍尖,少有开裂,底部微凹;气微,味苦。

3.1.3 平贝母 平贝母多呈扁球形或圆锥形(小平贝),直径为0.5～2 cm,表面类白色至黄白色;外层2片肉质鳞叶肥厚,大小相近或一片稍大,抱合;顶端略平、稍开裂,底部较平,不突出;气微,味苦。

3.1.4 浙贝母 浙贝母(珠贝)多呈扁球形,直径为0.6～1.2 cm,表面类白色或淡黄色;外层两片鳞叶肥厚似肾形,一片稍大,相互抱合;顶端不开裂,稍尖或钝圆,底部较平,不突出;气微,味苦。

3.1.5 湖北贝母 湖北贝母多呈扁圆球形,大小为0.8～3.5 cm,表面浅棕色至黄棕色;外层2片肉质鳞叶肥厚略呈肾形,或大小悬殊,大片紧抱小片;顶端闭合或开裂,底部凹陷呈窝状;气微,味苦。不同种类贝母药材性状主要鉴别点见表2。

3.2 显微鉴别结果 对收集到的贝母药材样品进行打粉、制片,观察并比较不同种类贝母的淀粉粒和导管的差异。见图2、表3。

图2 川贝母及其市场易混品显微特征

表3 川贝母及其市场易混品显微特征鉴别区分

3.2.1 川贝母 暗紫贝母粉末类白色,淀粉粒极多,多为单粒,三角状卵形、类圆形、灯泡形、椭圆形或长椭圆形,边缘较平整、略不平或有尖突,直径4～64 μm;脐点明显,线条较粗,大多位于较小端,形如点状、短缝状、“人”字状或马蹄状;纹隐约可见。导管为螺纹或环纹—螺纹,直径10～55 μm。

甘肃贝母粉末类白色。淀粉粒极多,多单粒,类圆形、广卵形或灯泡形,边缘较平整,少数边缘为凹凸或一边稍隆起,直径4～56 μm;脐点明显,线条较粗,多位于近小端多近中央,形如点状、短缝状、“人”字状或马蹄状;层纹隐约可见,有的较明显。螺纹或环纹—螺纹导管,直径10～45 μm。

卷叶贝母粉末类白色。淀粉粒极多,多为单粒,圆形、椭圆形或类贝壳形,形状较均一,边缘较平整,直径5～56 μm。脐点大多不明显,少数可见,线条较细,位于较小端,形如点状、短缝状或马蹄状;层纹清晰,较粗。螺纹导管直径6～67 μm。

梭砂贝母粉末浅黄色。淀粉粒极多,单粒类,圆形、广卵形、灯泡形,边缘较平滑或略凹凸不平,直径5～76 μm;脐点明显,线条较粗,多位于较小端,少数位于较大端或中央形如“人”字状、短缝状、弧线状、马蹄状、星状或“大”字状;层纹隐约可见,少数明显。螺纹导管直径50 μm。

3.2.2 伊贝母 新疆贝母粉末类白色。淀粉粒极多,多单粒,类圆形、广卵形或类贝壳形,边缘多数较平滑,有的小端较尖。直径5～66 μm;脐点小,大多不明显,线条极细,位于较小端或近中央,形如点状、短线状、马蹄状或“人”字状;层纹明显。螺纹导管直径约18 μm。

伊犁贝母粉末淡黄色。淀粉粒极多,多单粒,广卵形、灯泡形、三角卵状、贝壳形,边缘较平滑或稍凹凸不平,有的较小端稍尖,直径6～70 μm;脐点不甚明显,线条较细,多位于较小端,少数位于中央,形如点状、“人”字状、马蹄状或“十”字状;层纹较明显,有的深浅不一。螺纹导管直径约50 μm。

3.2.3 平贝母 平贝母粉末类白色。淀粉粒极多,多单粒,类圆形、广卵形、灯泡形或类扇形,边缘多数较平滑,直径6～77 μm;脐点大多明显,线条较细,多位于较小端,偶有位于较大端或近中央,形如点状、短缝状、“人”字状、马蹄状或“十”字状;层纹明显,较细密。螺纹导管直径约25 μm。

3.2.4 浙贝母 浙贝母粉末淡黄白色。淀粉粒极多,多单粒,广卵形、长卵形、类圆形、灯泡状、类贝壳形,边缘多平整,直径5～66 μm;脐点隐约可见,线条较细,位于较小端,形如点状、短缝状、“人”字状或马蹄状;层纹明显且细密,有的深浅不一。螺纹导管居多,直径约18 μm。

3.2.5 湖北贝母 湖北贝母粉末淡棕黄色。淀粉粒极多,多单粒,广卵形、类圆形或圆贝壳形,形状较均一,边缘平整,直径4～60 μm;脐点隐约可见,线条极细,位于较小端,有的明显,短缝状、点状、“人”字状或马蹄状;层纹明显。螺纹或环纹—螺纹导管直径5～36 μm。

4 讨论

2010年版、2015年版和2020年版《中华人民共和国药典》虽按性状将川贝母分为松贝、青贝、炉贝和栽培品,但经实地中药材市场调研发现,川贝母市场规格等级分类主要为松贝、青贝、炉贝。因此,关于川贝母及其市场常见混伪品的性状鉴别,主要为川贝母(松贝、青贝、炉贝)与伊贝母、平贝母、浙贝母、湖北贝母之间的性状鉴别。通过性状对比结果可知,川贝母与伊贝母、平贝母、浙贝母、湖北贝母之间具有一定的差异,可以此作为鉴别川贝母与其他种类贝母的参考依据。

然而,经实地考察及网络搜索发现,市场存在用小平贝、小浙贝冒充松贝或掺伪松贝,新疆贝母掺伪青贝,伊犁贝母掺伪炉贝进行销售的情况。因此,单凭性状对不同种类贝母进行鉴别,需要操作者有非常熟练的专业知识和经验。另外,性状鉴别多适用于外观形状比较完整的不同种类贝母之间的鉴别。随着不同种类贝母的栽培品涌入市场,人工干预下生长的贝母与传统野生的贝母在外观形状上势必会发生一定的变化,也增加了性状鉴别的难度,导致市场上贝母类药材性状的多样性以及临床用药的混乱。

由显微实验结果可知:暗紫贝母、甘肃贝母、梭砂贝母脐点大多明显,较大,颜色较深,脐点线条杂乱不规整;卷叶贝母和伊犁贝母脐点稍不明显;湖北贝母、浙贝母及平贝母脐点大多不明显;新疆贝母脐点极不明显。平贝母、浙贝母、湖北贝母、伊犁贝母层纹明显,且尤以平贝母和浙贝母层纹较为细密;新疆贝母层纹较明显,深浅不一;川贝母类层纹不明显。9种贝母的导管类型均为螺纹或螺纹—环纹,其中以浙贝母、平贝母导管直径较小,伊犁贝母、湖北贝母次之,其余直径大小相当。

通过显微实验观察到的淀粉粒的形状、边缘形态,脐点的大小、明显与否,层纹的明显程度以及螺纹或螺纹—环纹导管的大小,可将川贝母类与伊贝母、平贝母、浙贝母、湖北贝母等不同种类的贝母进行初步鉴别。然而显微实验仅能鉴别单一贝母品种的粉末,对于两种或多种品种贝母粉末掺杂的情况不能予以准确鉴别区分。

因此,除性状鉴别、显微鉴别外,还应借助更为准确、精密的仪器与其他鉴别手段相结合才能更准确无误地鉴别川贝母及其市场混伪品。