性别、年龄和季节对睾酮参考区间的影响

宗健敏 肖 姗 姜 玲 蒋 钰

（南京市职业病防治院检验科，江苏 南京 210018）

睾酮作为下丘脑-垂体-性腺轴的组成部分，对男性原发性或继发性性腺功能减退、女性雄激素过多症的诊治至关重要[1]。目前，大部分国内实验室直接引用试剂说明书提供的性别特异性参考区间。然而，除性别外，年龄、季节等多种因素均可能影响睾酮水平[2]。试剂厂商提供的参考区间在本地区不具代表性。为此，本研究拟按美国临床实验室标准化学会（the Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）C28-A3文件的要求[3]，通过分析实验室信息管理系统中的数据，采用间接法建立睾酮的参考区间，并探讨性别、年龄和季节对睾酮参考区间的影响。

1 材料和方法

1.1 研究对象

收集2018年1月-2020年12月南京市职业病防治院实验室信息管理系统中≥18岁的健康体检者信息。排除标准：1）患有可能引起睾酮水平变化的疾病，如糖尿病、肾病综合征；2）6个月内使用过可能改变睾丸激素水平的药物，如利福平、地高辛等；3）有雄激素替代治疗史；4）妊娠或哺乳期妇女；5）样本性状不合格。共纳入22 960名健康体检者，其中男14 969名、女7 991名，年龄（35±10）岁。

1.2 方法

采用cobas e601全自动电化学发光分析仪（瑞士Roche公司）和配套试剂、校准品检测血清睾酮水平。

对数据进行正态性检验并剔除离群值后，按性别、年龄、季节分别分组，比较各组间睾酮水平的差异，合并无差异的分组，计算其数据分布的第2.5百分位数（P2.5）和第97.5百分位数（P97.5），分别作为参考区间的上、下限。

1.3 统计学方法

使用SPSS 19.0软件进行统计分析。采用Kolmogorov-Smirov法进行正态性检验，采用四分位间距法剔除离群值。呈非正态分布的计量资料以中位数（M）[四分位数（P25～P75）]表示，2个组之间比较采用Mann-WhitneyU检验，多组间比较采用Kruskal-WallisH检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 睾酮参考区间的建立

睾酮数据呈非正态分布（P＜0.05）。男性睾酮水平[4.55（3.58～5.72）ng/mL]显著高于女性[0.30（0.21～0.41）ng/mL]（P＜0.001）。不同性别人群中睾酮随年龄变化的趋势见图1。男、女性睾酮水平均在20岁左右达到高峰，而后出现下降，其中男性30～35岁后趋于平缓；女性持续波动下降，约55岁后出现轻微上升趋势。

图1 男性和女性睾酮水平随年龄变化的趋势

根据波动特点，将年龄以10岁为间隔分成6个组（18～29岁组、30～39岁组、40～49岁组、50～59岁组、≥60岁组），结果显示，男性30～39岁组、40～49岁组、50～59岁组、≥60岁组睾酮水平显著低于18～29岁组（P＜0.05），女性40～49岁组、50～59岁组、≥60岁组睾酮水平显著低于18～29岁组和30～39岁组（P＜0.05），见表1。合并各年龄组，建立了本地区表观健康成人的睾酮参考区间：男性18～29岁为2.49～8.82 ng/mL，≥30岁为2.25～8.30 ng/mL；女性18～39岁为0.1～0.81 ng/mL，≥40岁为0.02～0.58 ng/mL。

表1 不同性别、年龄成人睾酮水平分布 ng/mL

2.2 睾酮水平的季节变化特征

2018-2021年各年睾酮水平的最高值（中位数）分别出现在1月（3.99 ng/mL）、3月（3.92 ng/mL）、1月（3.88 ng/mL）、1月（3.77 ng/mL），最低值分别出现在9月（3.44 ng/mL）、9月（3.22 ng/mL）、8月（3.28 ng/mL）、8月（3.16 ng/mL）。

以3-5月为春季，6-8月为夏季，9-11月为秋季，12-次年2月为冬季。2018-2021年4年间睾酮中位数呈相似的季节性变化趋势，春冬季较高，夏秋季较低，见图2。春冬季睾酮水平[3.57（0.41，5.14）ng/mL]高于夏秋季[3.26（0.37，4.58）ng/mL]（P＜0.001），春季与冬季、夏季与秋季之间差异无统计学意义（P＞0.05）。

图2 2018-2021年各年不同月份睾酮水平的变化特征

3 讨论

合适的参考区间有助于临床的诊疗。CLSI C28-A3文件推荐实验室筛选参考人群建立参考区间，然而该法缺乏统一筛选标准，且操作复杂。随着数据管理技术的发展，基于统计学分析的间接法因经济、便捷、可操作性强等优点被广泛应用[4]。

本研究通过分析大数据建立了睾酮年龄、性别特异性参考区间。目前，普遍认为睾酮水平自成年后持续降低[5]。KANABAR等[6]发现男性睾酮水平在30岁左右急剧下降，50岁左右可能反弹并维持。还有研究指出年龄与睾酮的相关性不明显，没有必要使用按年龄分组的参考区间。但由于性腺机能减退的症状和雄激素的治疗效果在不同年龄的受试者间存在差异[7]，根据年龄设立的雄激素参考区间在不同年龄人群的激素替代治疗或戒断治疗方面可以提供更多的信息，因此根据年龄分组的参考区间不是没有意义的。

NEALS等[8]建立的英国地区睾酮参考区间为男性3.05～9.19 ng/mL，女性＜0.49 ng/mL；陆优丽等[9]建立的上海地区睾酮参考区间为≥16岁男性2.77～9.29 ng/mL，16～50岁女性0.10～0.59 ng/mL，＞50岁女性0.04～0.37 ng/mL。除去人种和地域因素，上述研究使用的均是睾酮检测的金标准--高效液相色谱串联质谱法，而本研究使用的是我国临床实验室常用的化学发光免疫分析法。有研究结果显示，免疫法会低估男性的睾酮水平，高估女性的睾酮水平[10]，该结论也可部分解释文献报道与本研究的差异。YU等[11]基于UniCel DXI800全自动化学发光分析仪（美国贝克曼库尔特公司）的多中心研究建立的中国成年男性睾酮的参考区间为2.13～7.06 ng/mL，与本研究有一定的差异，可能与使用的检测系统不同有关。BRAUNSTEIN等[12]建立的＜50岁女性的睾酮参考区间为0.15～0.46 ng/mL，与本研究也有一定的差异，可能与BRAUNSTEIN等[12]纳入了较多处于围绝经期或绝经后的女性个体，且他们建立的参考区间取值范围为第5百分位数和第95百分位数有关。另外，以上研究均是通过筛选参考人群建立睾酮参考区间，而本研究是基于大数据分析建立睾酮参考区间，因此参考区间的取值存在一定的差异。

睾酮的季节变化规律尚存在一定的争议。有研究结果显示，睾酮在夏季或温度高的月份水平较低[13-14]，与本研究结果一致。SANTI等[15]的研究结果显示，睾酮水平在夏季较高。也有研究未观察到显著的季节变化规律，睾酮相对更明显的昼夜变化规律可能掩盖了其季节变化[16]。虽然在临床实践中根据季节建立睾酮参考区间较为困难，但实验室在进行检验结果解释时应考虑到季节和气温波动对睾酮水平的影响。

本研究尚有一定的不足之处：数据来源相对单一，覆盖面有限；对体重、腰围、吸烟、运动情况等其他可能影响睾酮水平变化的指标未予以讨论。

综上所述，本研究初步建立了南京地区睾酮年龄、性别特异性的参考区间。睾酮水平春冬季较高，夏秋季较低。下一步拟综合考虑睾酮水平的各项影响因素，进一步完善睾酮参考区间。